馬鈴薯扦插生根劑的篩選

張 毅，陳 亮，陳佰鴻，梁子龍

（1.中國種子集團(tuán)張掖生產(chǎn)基地，甘肅 張掖 734000；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)，陜西 楊凌 712100；3.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，甘肅 蘭州 730070）

馬鈴薯原原種的生產(chǎn)一般是在防蟲溫室、網(wǎng)室中的基質(zhì)上定植脫毒苗，或利用脫毒苗進(jìn)行剪枝扦插獲得馬鈴薯的微小塊莖（mini-tuber）。脫毒苗的擴(kuò)繁相對成本較高，周期較長，而利用剪枝扦插則可以在較短時間內(nèi)迅速擴(kuò)大脫毒苗的數(shù)量，并且不影響基礎(chǔ)苗的結(jié)薯數(shù)量和質(zhì)量，是目前普遍采用的生產(chǎn)方法［1～4］。剪枝扦插中很重要的一點(diǎn)是生根劑的選擇和使用，但目前效優(yōu)的生根劑價格較高。蔗糖與生根激素相比，不但具有效果穩(wěn)定、安全（不易損壞插穗）、易掌握等優(yōu)點(diǎn)，而且價格便宜易于購置，利于插穗吸收，增加插穗體養(yǎng)分，促進(jìn)其迅速生根，效果特別明顯［5］。據(jù)此，我們設(shè)計(jì)了兩種新型的生根劑配方，并與國際馬鈴薯中心推薦的改良生根劑進(jìn)行了對比，以期篩選出效優(yōu)價廉的馬鈴薯生根劑配方。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

脫毒苗為國家馬鈴薯改良中心固原分中心自繁，品種為青薯168。生根劑均為分析純，溶劑為蒸餾水和95%酒精。

1.2 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)設(shè)3個處理，處理A為CIP推薦的改良生根劑，即IBA（吲哚丁酸）200mg/kg+NAA（萘乙酸）100 mg/kg+硼酸175mg/kg+20mL吐溫-80，pH=5.5；處理B為新型生根劑，即100 g/kg蔗糖+50mg/kg青霉素，pH=5.5～5.8；處理C為新型生根劑，即75 g/kg蔗糖+50mg/kg青霉素+25mg/kg頭孢霉素，pH=5.5～5.8。3次重復(fù)，隨機(jī)區(qū)組排列，每小區(qū)25株。用MS培養(yǎng)基，在121℃高溫下滅菌15~20min，冷卻待用。將脫毒苗剪切成1 cm左右?guī)?葉1芽的莖段，接種于繼代培養(yǎng)基上，每瓶培養(yǎng)基接種10~15個莖段，莖段長成高10 cm左右的小苗（培養(yǎng)15~30 d）時轉(zhuǎn)接，如此反復(fù)繼代培養(yǎng)繁殖。培養(yǎng)條件為日溫25℃、夜溫15℃、光照時數(shù)12~14 h/d、光照強(qiáng)度2 000~3 000 Lx。10月9日擴(kuò)繁脫毒試管苗，11月11日剪枝扦插。剪取帶4～5片葉植株的上半部，在供試生根劑中浸泡15～20min后扦插于有機(jī)質(zhì)苗盤中，密度為5 cm×5 cm。預(yù)先在苗盤中上好底肥、潤透水分，扦插后上好拱架，成活后常規(guī)管理，并及時觀察扦插苗的膨大時間（從扦插至腋芽明顯膨大所需時間）和生根時間（即從扦插到生成不定根所需時間）。扦插20 d后測定扦插苗的生根數(shù)、莖粗、株高、根鮮重。

1.3 測定方法

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的確定 取50μg/mlα-萘胺母液各0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，均補(bǔ)水至11mL，加入磷酸緩沖液、1%對氨基苯磺酸、100μg/ml亞硝酸鈉各1mL，搖勻，置室溫（20～25℃）下顯色5 min，然后加入蒸餾水，使每管總體積為20mL，搖勻，在20～60min以0號管為空白對照，于520 nm波長處測定每管吸光度A值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.3.2 根系活力測定 將扦插后35 d的根系用水洗凈，再用吸水紙吸干根上的水，稱取1～2 g，放入100mL三角瓶中，加入50μg/mLα-萘胺溶液和磷酸緩沖液的等量混合液50mL，輕輕搖動，靜置10 min后從瓶中取2mL溶液放入20mL刻度試管，測定α-萘胺含量，以此作為開始值A(chǔ)（第1次取液時的α-萘胺濃度為A）；其余溶液塞好瓶塞后放在振蕩器上，在25℃條件下振蕩30min，反應(yīng)時間完畢后再取2 mL溶液放入刻度試管待測（第2次取液時的α-萘胺濃度為B）。因α-萘胺溶液會自動氧化，所以在做根系處理的同時做空白對照（α-萘胺減少的濃度為C），即α-萘胺振蕩1h的自身氧化量。在上述2次所取及2次空白實(shí)驗(yàn)所取得2mL測定液中，各加入10mL蒸餾水，混勻后再加入1%對氨基苯磺酸1mL，與100 μg/mL的亞硝酸鈉溶液1mL混勻，置室溫（20～25℃）顯色5min，然后加蒸餾水至20mL搖勻，在20～60min，以標(biāo)準(zhǔn)曲線0號管為空白對照，根據(jù)第1次和第2次樣液所測得的吸光度值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線查出α-萘胺含量。由于取樣為2mL，酶促反應(yīng)是在48 mL的α-萘胺溶液中進(jìn)行的，其計(jì)算公式如下：

其中：Y為α-萘胺氧化量，X為稀釋液體積

2 結(jié)果與分析

2.1 不同生根劑對扦插苗生物性狀的影響

從表1可以看出，不同生根劑對扦插苗成活率的影響不大，處理C的成活率最高，達(dá)92.00%；處理A和處理B的成活率相同，為90.67%。各處理的膨大時間5～7 d不等，生根時間5～9 d不等，處理B最早開始生根，處理A生根所需時間最長。生根數(shù)處理A和處理B為6～9條，處理C為7～8條，相差不是很大。莖粗以處理C最粗，為2.7mm；處理A最細(xì)，為2.3mm。株高以處理B最高，為8.5~11.0 cm；處理A和處理C相同，為8.0~10.5 cm。說明蔗糖和青霉素促進(jìn)馬鈴薯扦插苗生根的效果不低于CIP推薦的配方。

表1 不同生根劑處理的扦插苗生物性狀

2.2 不同生根劑對扦插苗根系活力的影響

根系活力是衡量根系新陳代謝活動強(qiáng)弱、反應(yīng)根系吸收能力的一項(xiàng)綜合指標(biāo)。根系特性及發(fā)育狀況直接關(guān)系到馬鈴薯對土壤養(yǎng)分、水分的吸收，關(guān)系到營養(yǎng)物質(zhì)的貯藏與轉(zhuǎn)化［6～7］。從表1、表2可以看出，各處理對扦插苗根系活力的影響較大，根鮮重以處理C最重，為0.78 g；其次是處理A，為0.44 g；處理B最輕，為0.33 g。處理A和處理C的α-萘胺生物氧化強(qiáng)度明顯低于處理B，表明處理B可促進(jìn)根系活力的提高。

表2 不同生根劑處理的α-萘胺氧化值

3 小結(jié)與討論

1） 3種生根劑對比試驗(yàn)結(jié)果表明，新型生根劑B（100 g/kg蔗糖+50mg/kg青霉素，pH=5.5～5.8）促進(jìn)馬鈴薯扦插苗生根的效果比較理想，不但成活率高，緩苗快，莖稈粗壯，枝葉繁茂，而且根系活力很高，可作為扦插的首選生根劑。新型生根劑C（75g/kg蔗糖+50 mg/kg青霉素+25mg/kg頭孢霉素，pH=5.5～5.8）對改善扦插苗生物性狀也有較好的作用，可以參考使用。

2） 在馬鈴薯扦插生產(chǎn)中，生育期的管理至關(guān)重要，要求扦插初期保證遮蔭、保水，生長過程中保證扦插苗的溫度和水分的要求，生根劑的應(yīng)用只是其中的一個關(guān)鍵環(huán)節(jié)，要綜合各方面的措施，原原種的生產(chǎn)才能有一個比較理想的結(jié)果。

［1］ 邱光若，李壽如，何 儒，等.不同生根劑對馬鈴薯脫毒苗剪枝扦插的影響［C］.2007年中國馬鈴薯大會（中國馬鈴薯專業(yè)委員會年會暨學(xué)術(shù)研討會）、全國馬鈴薯免耕栽培現(xiàn)場觀摩暨產(chǎn)業(yè)發(fā)展研討會論文集.哈爾濱工程大學(xué)出版社，2007.

［2］ 顧建新，丁 鑫，李芳艷，等.馬鈴薯脫毒種薯扦插快繁技術(shù)研究［J］. 新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，46（2）：266-268.

［3］ 孫慧生.馬鈴薯生產(chǎn)技術(shù)百問百答［M］.北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2005.

［4］ 楊 春，杜 珍.萘乙酸、吲哚丁酸、赤霉素對脫毒馬鈴薯扦插苗成活率的影響［J］.馬鈴薯雜志，1998，12（4）：199-202.

［5］ 李祖清.園藝實(shí)用知識［M］.成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，2002：100-101.

［6］ 馬光恕，廉 華，林曉影.硫酸錳葉面噴施對馬鈴薯根系生長的影響［J］.吉林農(nóng)業(yè)C版，2010（7）：44-45.

［7］ 王衛(wèi)成，賀成英，韓富軍.基質(zhì)配比及生根劑濃度對紫葉矮櫻扦插生根率的影響［J］.甘肅農(nóng)業(yè)科技，2005（6）：27-28.