桑杏平喘顆粒對小白鼠的急性毒性試驗

摘要：為了解桑杏平喘顆粒對動物的毒性，對其進行了小白鼠的急性毒性試驗。將50只昆明系小白鼠分成5組，每組10只，雌雄各半，分別按生藥250.00 g/（kg·bw）、300.00 g/（kg·bw）、360.00 g/（kg·bw）、432.00 g/（kg·bw）、518.40 g/（kg·bw）灌胃給藥，其半數致死量LD50為319.16 g/（kg·bw）。結果表明，桑杏平喘顆粒是一種安全的、無毒的復方中藥制劑。

關鍵詞：桑杏平喘顆粒；小白鼠；急性毒性；半數致死量

中圖分類號：S853.75 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）14-3373-02

近年來豬場的規模化養殖程度越來越高，但飼養管理方式和衛生條件仍然相對落后，伴隨而來的問題是豬病復雜化趨勢日益嚴重，給養殖戶造成了巨大的經濟損失。豬支原體肺炎（Mycoplasmal pneumonia of swine，MPS）是由豬肺炎支原體（Mycoplasma hyopneumoniae， Mhp）引起的一種接觸性、慢性呼吸道疾病，以咳嗽、喘氣、呈腹式呼吸為特征性癥狀，在豬群中可造成地方性流行；患豬生長發育遲緩，飼料利用率降低，若不及時治療，易繼發混合感染豬巴氏桿菌、放線桿菌、圓環病毒（PCV）、豬流感病毒、豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒等多種傳染病，最后導致成豬呼吸道疾病綜合征（PRDC），對養豬生產危害很大，給該病的免疫和防治帶來了很大困難。另外臨床上常用的豬支原體減毒疫苗存在產量低、成本高、反應較大等缺陷，采用胸腔注射的免疫途徑也不容易被一般用戶所接受， 因而在推廣應用上受到限制。而中藥通過對動物的生理機能進行綜合調理，提高機體非特異性免疫力，發揮其抗菌、抗病毒、抗應激的自身優勢，從而可以有效地防控和治療該病，并取得了一定的效果；且兼有低毒、低殘留、無耐藥性等優點，符合當前人們對畜產品安全的需求。

桑杏平喘顆粒是中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所自主研發的，根據中獸醫辨證觀和整體觀，選擇具有清熱宣肺、止咳平喘功能的桑白皮、杏仁、石膏、甘草等中藥辨證組方而成，利用現代制藥工藝研制而成的用于防治豬支原體肺炎的中獸藥新制劑。為了解其對動物的毒性反應及為臨床安全用藥提供科學的數據支持，以小白鼠為試驗動物進行了急性毒性試驗，現報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

昆明系小白鼠，18～22 g，50只，雌雄各半，購自蘭州大學醫學院動物中心。

桑杏平喘顆粒來自中國農業科學院蘭州畜牧與獸藥研究所。試驗前將桑杏平喘顆粒用滅菌水配成相當于原藥材10 g/mL的濃溶液，待用。

1.2 方法

將50只小白鼠在實驗室條件下適應性飼喂3 d后，隨機分成5組，每組10只，雌雄各半。禁食8 h（不禁水）后，分別按生藥250.00 g/（kg·bw）、300.00 g/（kg·bw）、360.00 g/（kg·bw）、432.00 g/（kg·bw）、518.40 g/（kg·bw）灌胃給藥，1次給藥量≤0.8 mL，低劑量組一次給藥，高劑量組可以在24 h內分兩次給藥。觀察給藥后小白鼠的精神、行為、飲食欲等情況，記錄小白鼠死亡時間和數量，剖檢死亡小白鼠，觀察各臟器組織的病理變化。試驗共7 d，試驗結束后統計小白鼠的死亡數。用SPSS 13.0軟件計算桑杏平喘顆粒對小白鼠的LD50及其95%可信限。

2 結果與分析

用灌胃針經口灌入已制備好的藥物后，大部分小白鼠表現靜伏少動，自發活動減少，行動遲緩，個別小白鼠出現運動失調，呼吸急促或明顯的神經癥狀，隨著劑量的增大其癥狀加劇。小白鼠死亡前出現后肢抽搐癥狀，被毛粗亂，皮膚發紺，呼吸困難。7 d后存活的小白鼠飲食欲良好，精神好轉，活動正常，被毛柔順而有光澤。死亡的時間主要集中在灌藥后1～2 h，解剖觀察主要的臟器病變為：十二指腸出血，肝臟顏色發暗，有不明顯的出血、淤血，其他臟器無明顯的眼觀病變。7 d之內5組小鼠分別死亡0、4、9、9、10只，見表1。

由SPSS 13.0軟件通過Bliss方法計算出桑杏平喘顆粒對小白鼠的LD50及其95%可信限，LD50為319.16 g/（kg·bw），95%的可信限為270.31～363.68 g/（kg·bw）。

3 小結與討論

豬支原體肺炎是由豬肺炎支原體引起的一種慢性呼吸道疾病，感染率高，流行快，新發病的豬群中常呈暴發性流行，發病率和死亡率都很高，且多為急性經過；老疫區病豬多呈慢性經過，易與巴氏桿菌、豬圓環病毒等混合感染，長期攜帶致病微生物并向外傳播，所以豬支原體肺炎是目前及今后很長一段時間內影響養豬生產的主要疾病之一，也是全球養豬界公認的最難凈化的疫病[1]。目前，化學藥物防治的效果不理想，初期會有一定的防治效果，但是伴隨這些藥物的長期使用，病原菌的耐藥性會大大降低藥物的有效性。同時，大量使用化學藥物造成的動物產品殘留問題日益引起人們的重視，難以滿足人們對畜產品安全性的要求。抗生素只能抑制支原體生長，無法完全清除，使用藥物是為了緩解病情，降低繼發感染，一旦停止用藥容易復發，并且支原體的耐藥性強，在肺部黏膜表面的有效濃度低，因此抗生素的效果很難保證[2]。使用疫苗也可以在一定程度上起到預防的作用，目前國內自主研發的相關疫苗只有弱毒疫苗，但是該疫苗由于需要胸腔接種所以不易于推廣普及，進口的滅活疫苗雖易操作但成本過高[3]。

桑杏平喘顆粒其方劑由桑白皮、杏仁、石膏、甘草等中藥組成，全方具有清肺平喘、宣泄郁熱、化痰止咳的功效，集石膏的清熱解毒、杏仁的止咳平喘、桑白皮的瀉肺平喘為一體，組方中其他中藥則有清肺止咳、降逆止嘔、排膿消癰等功效，適用于豬支原體肺炎咳嗽和喘氣等癥狀的治療。

現代藥理作用表明，NO是機體生理、生化功能的重要調節物質，在調節支氣管平滑肌張力和治療哮喘發病方面也有重要作用，桑白皮丙酮提取物可以通過提高支氣管NO含量，松弛支氣管平滑肌，對抗乙酰膽堿引起的支氣管痙攣性哮喘發作[4]。韋媛媛等[5-7]研究了桑白皮總黃酮的鎮咳、祛痰及平喘作用，發現桑白皮總黃酮可顯著抑制濃氨水、SO2所致小白鼠咳嗽潛伏期，減少氨水引咳次數，拮抗乙酰膽堿對小白鼠肺支氣管的收縮作用；延長組胺、乙酰膽堿引喘潛伏期和豚鼠卵蛋白性哮喘潛伏期，降低哮喘豚鼠嗜酸性粒細胞（EOS）的浸潤，并且對組胺引發的離體豚鼠氣管收縮有抑制作用，對支氣管痙攣顯示出解痙作用。苦杏仁苷內服后，可被體內苦杏仁酶分解為氫氰酸和苯甲醛，氫氰酸對呼吸中樞可產生一定的抑制作用，能使呼吸加深，咳嗽減輕[8]。石膏可抑制體溫中樞的亢進而產生有力的解熱作用，同時發汗中樞也被抑制，故解熱而不發汗，無傷津之弊[9]。甘草調和諸藥，《千金方》記載“甘草能解百毒”，可通過其所含化學成分吸附毒物或與毒物結合，使毒物轉化為毒性較小或無毒性的物質以達到解毒之功能，另外其所具有的腎上腺皮質激素樣作用可提高機體對外界刺激的適應性并能起到保護機體作用[10]。故由桑白皮、杏仁、石膏、甘草等組成的桑杏平喘顆粒具有松弛支氣管平滑肌、清熱解毒、鎮咳平喘等作用，對于豬支原體肺炎具有良好的療效。

昆明系小白鼠的急性毒性試驗表明，桑杏平喘顆粒對小白鼠的LD50為319.16 g/（kg·bw），農業部《新獸藥一般毒性試驗技術要求》判定，桑杏平喘顆粒安全無毒。通過以上試驗結果證明，桑杏平喘顆粒是一種安全無毒產品，可安全地應用于獸醫臨床。

參考文獻：

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