不同種植密度白花曼陀羅糖類成分分析

摘要：以白花曼陀羅（Datura stramonium L.）葉、花、種子為試驗(yàn)材料，采用紫外分光光度法研究不同種植密度A組（行距×株距為60 cm×70 cm）、B組（60 cm×60 cm）、C組（60 cm×50 cm）對(duì)白花曼陀羅不同部位糖類成分的影響。結(jié)果表明，白花曼陀羅種子中總糖含量明顯比葉子和花中總糖含量高，種子、葉子和花中還原糖含量相差不大。在B組（60 cm×60 cm）種植密度下，白花曼陀羅種子、葉子和花中總糖含量明顯比其他兩種種植密度含量高。

關(guān)鍵詞：白花曼陀羅（Datura stramonium L.）；糖類成分；紫外分光光度法

中圖分類號(hào)：S567；Q53 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2013）20-4980-03

Analysis of Sugar Components in Different Planting Density of Datura stramonium L.

LI Min，ZHAO Quan，LI Yu-xian

（College of Traditional Chinese Medicine， Jilin Agricultural Science and Technology College， Jilin 132101， Jilin， China）

Abstract： Using leaves，flowers，seeds of Datura stramonium L. as matrirals， effects of sugar component in different parts of D. stramonium L. were studied in different planting densities in cluding A group（row spacing 60 cm×plant spacing 70 cm）， B group （60 cm×60 cm）， C group （60 cm×50 cm） by UV spectrophotometry. The results showed that the total sugar content in seeds was significantly higher than those in leaves and flowers. Reductive sugar in seeds， leaves and flowers were almost the same. The total sugar contents in seeds， leaves and flowers of B group（60 cm×60 cm） planting density were higher than those of the other planting densities.

Key words： Datura stramonium L.； sugars component； UV spectrophotometry

白花曼陀羅（Datura stramonium L.）是茄科（Solanales）白花曼陀羅屬（Datura）的一年生草本植物，別名醉心花、狗核桃。分布于熱帶和溫帶，在低緯度地區(qū)可長成亞灌木。生于荒地、旱地、向陽山坡、草地[1]。全株有劇毒，特別是種子毒性最大，其葉、花、種子均可入藥，味辛性溫。白花曼陀羅主治咳逆氣喘、面上生瘡、脫肛、風(fēng)濕、跌打損傷，還可作麻藥[2]。花能祛風(fēng)濕，止喘定痛，可治驚癇和寒哮，煎湯洗治諸風(fēng)頑痹及寒濕腳氣?；ò甑逆?zhèn)痛作用尤佳，可治神經(jīng)痛等。葉和種子可用于鎮(zhèn)咳鎮(zhèn)痛[3，4]。目前對(duì)白花曼陀羅的化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試結(jié)果表明，白花曼陀羅中含有多糖、黃酮、生物堿、鞣質(zhì)類、甾體、萜類、蒽醌及其甙類、香豆素及其甙類、皂甙類、揮發(fā)油、油脂類、氨基酸等化學(xué)成分[5]。

多糖廣泛存在于自然界，是多種中草藥的有效成分之一，具有多種生物活性，是理想的免疫增強(qiáng)劑，它能促進(jìn)T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的功能，還能促進(jìn)白介素、干擾素、腫瘤壞死因子等細(xì)胞因子的產(chǎn)生。目前對(duì)多糖的作用機(jī)理、生物功能與結(jié)構(gòu)的關(guān)系的研究不斷深入[6]。筆者通過試驗(yàn)研究不同種植密度的白花曼陀羅不同部位中糖類成分的含量，為開發(fā)新的藥用資源及提高白花曼陀羅資源利用率提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 材料

試驗(yàn)所用材料采自吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院南校區(qū)藥植園長勢好、無病蟲害的白花曼陀羅，3種種植密度：行距×株距分別為A組60 cm×70 cm、B組60 cm×60 cm、C組60 cm×50 cm。取成熟期花、葉子、種子，放陰涼處陰干至恒重，編號(hào)為種子A、種子B、種子C，葉A、葉B、葉C，花A、花B、花C，保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 儀器與試劑

電子天平（梅特勒）；722分光光度計(jì)（上海精密儀器儀表有限公司）；恒溫槽（上海儀器廠）；刻度吸管；量筒；容量瓶；錐形瓶。

葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品（上海市億欣生物科技有限公司）；3，5-二硝基水楊酸；無水乙醇；甲醇；酚酞；鹽酸；碘-碘化鉀試劑；酒石酸鉀鈉（以上試劑均為分析級(jí)）。

1.3 方法

1.3.1 葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備 精確稱取干燥無水葡萄糖100 mg于100 mL容量瓶中，用蒸餾水溶解并定容至刻度，混勻，配制成1 mg/mL對(duì)照品，備用。

1.3.2 總糖的測定 精確稱取樣品0.600 g，放入50 mg錐形瓶中，加入30 mL蒸餾水，20 mL 6 mol/L HCl，于沸水浴中加熱水解40 min，取一滴水解液于白瓷板上，以碘-碘化鉀試劑檢查，水解液不呈藍(lán)色為水解完全，冷卻后加1滴酚酞指示劑，以6 mol/L NaOH中和并過濾至100 mL容量瓶中，殘?jiān)哉麴s水沖洗，然后定容至刻度，編號(hào)A、B、C，濾液混勻備用。在試管中分別加入1.0 mL樣品測定液，1.0 mL蒸餾水，1.5 mL 3，5-二硝基水楊酸，在520 nm處測定溶液吸光度并計(jì)算總糖含量。

1.3.3 還原糖的測定 精確稱取樣品0.600 g于50 mL錐形瓶中，加少量蒸餾水振蕩，再加20 mL蒸餾水，80 ℃水浴中加熱40 min，然后過濾于100 mL容量瓶中，以蒸餾水沖洗殘?jiān)?，并定容至刻度，編?hào)A、B、C，備用。在試管中分別加入1.0 mL樣品測定液，1.0 mL蒸餾水，1.5 mL 3，5-二硝基水楊酸，在520 nm處測定溶液吸光度并計(jì)算還原糖含量。

1.4 方法學(xué)考察

1.4.1 總糖精密度試驗(yàn) 精確稱取白花曼陀羅種B樣品1.000 g 5份，按“1.3.2”的方法在520 nm處測定溶液吸光度值并計(jì)算總糖含量，3次重復(fù)，取平均值。

1.4.2 總糖穩(wěn)定性試驗(yàn) 精確稱取白花曼陀羅葉B樣品1.000 g，按“1.3.2”的方法，在15、30、45、60 min時(shí)分別在520 nm處測定溶液吸光度值，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。

1.4.3 還原糖精密度試驗(yàn) 精確稱取白花曼陀羅的花B樣品1.000 g 5份，按“1.3.3”的方法在520 nm處測定溶液吸光度并計(jì)算還原糖含量。3次重復(fù)，取平均值。

1.4.4 還原糖穩(wěn)定性試驗(yàn) 精確吸取白花曼陀羅的花C樣品溶液，按“1.3.3”的方法在15、30、45、60 min時(shí)分別在520 nm處測定溶液吸光度值，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）。3次重復(fù)，取平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

取9支25 mm×250 mm試管，按表1加試劑。將各管溶液搖勻，在沸水浴中加熱5 min，取出后立即在冷水中冷卻，再向各管加入21.5 mL蒸餾水，混勻，于520 mm處測定吸光度值，并以葡萄糖為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。得到回歸方程為y=0.146 2x+0.042，R2=0.998 9，見圖1。

2.2 總糖精密度試驗(yàn)結(jié)果

以白花曼陀羅種子B樣品為試驗(yàn)材料進(jìn)行總糖精密度試驗(yàn)，樣品為5份，白花曼陀羅種子總糖含量分別為25.873%、26.224%、26.512%、25.568%、25.981%，RSD為1.37%（<2%），表明總糖測定方法精密度良好。

2.3 總糖穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

采用白花曼陀羅葉B樣品進(jìn)行總糖穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果表明，在0、15、30、45、60 min測定得到的白花曼陀羅葉中總糖含量分別為26.759%、26.740%、26.521%、26.423%、26.011%，RSD為1.15%（<2%），說明總糖測定方法穩(wěn)定性良好。

從總糖精密度和穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果可以看出，用3，5-二硝基水楊酸法測定白花曼陀羅總糖含量，方法簡便、可靠，雜質(zhì)干擾少。

2.4 還原糖精密度試驗(yàn)結(jié)果

利用白花曼陀羅的花B樣品進(jìn)行還原糖精密度試驗(yàn)，結(jié)果5份樣品中還原糖含量分別為4.278%、4.269%、4.175%、4.186%、4.265%，RSD為1.17%（<2%），表明還原糖測定方法的精密度良好。

2.5 還原糖穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

以白花曼陀羅的花C樣品溶液進(jìn)行還原糖穩(wěn)定性試驗(yàn)，結(jié)果表明，在0、15、30、45、60 min測定樣品溶液中還原糖含量分別為5.372%、5.194%、5.106%、5.194%、5.283%，RSD為1.93%（<2%），說明測定還原糖的方法穩(wěn)定性良好。

從還原糖精密度和穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果可以看出，用3，5-二硝基水楊酸法測定白花曼陀羅的還原糖含量，方法可行。

2.6 糖類成分含量測定結(jié)果

樣品成分含量測定結(jié)果見表2。從表2可以看出，白花曼陀羅種子中總糖、還原糖含量均較高，分別達(dá)24%和4%以上；白花曼陀羅葉和花中總糖含量較低，只有10%左右，而還原糖含量與種子相差不大；在3種不同種植密度比較中，B組（行距×株距為60 cm×60 cm）種植密度的白花曼陀羅總糖含量普遍比其他兩種種植密度的總糖含量高。在測定白花曼陀羅種子還原糖含量時(shí)，B組也明顯高于其他兩組。因此，B組（行距×株距為60 cm×60 cm）種植密度對(duì)栽培白花曼陀羅得到較高的糖類成分效果最佳。

3 小結(jié)與討論

白花曼陀羅中總糖含量的比較結(jié)果為：種子>葉>花，白花曼陀羅種子中還原糖和總糖含量均較高，分別達(dá)4%和24%以上，白花曼陀羅葉和花中總糖含量均較低，只有10%左右，而還原糖含量與種子相差不大。B組（行距×株距為60 cm×60 cm）種植密度的白花曼陀羅總糖含量普遍高于其他兩種種植密度的總糖含量。白花曼陀羅種子還原糖含量測定中，B組種植密度也高于其他兩組。

本試驗(yàn)旨在研究不同種植密度對(duì)白花曼陀羅不同部位糖類成分的影響，結(jié)果表明種植密度對(duì)糖類成分含量有一定影響。為提高白花曼陀羅的藥用價(jià)值，應(yīng)重視種植密度對(duì)其成分的影響。本試驗(yàn)所得的糖類含量較低，可能是由于采收和保存過程中受到影響，也有可能是因?yàn)樘崛」に囋斐傻模虼嗽囼?yàn)提取方法還有待改進(jìn)。

參考文獻(xiàn)：

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