大斑芫菁揮發性成分的氣相色譜—質譜聯用分析

摘要：采用水蒸氣蒸餾法提取大斑芫菁（Mylabris phalerata Pallas）的揮發性成分，并采用氣相色譜-質譜聯用技術對其進行了分析鑒定，旨在為大斑芫菁的綜合利用提供理論依據。從大斑芫菁中共檢出86種揮發性成分，并鑒定出其中的41種， 以醇、醛、酮、酸類物質居多。其中相對百分含量較高的有苯乙醛（4.07%）、油酸（3.21%）、1，13-十四碳二烯（2.22%）、芳樟醇（1.70%）、香葉基丙酮（1.64%）。

關鍵詞：大斑芫菁（Mylabris phalerata Pallas）；揮發性成分；氣相色譜-質譜聯用

中圖分類號：O657.63；S433.5 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2013）13-3142-03

芫菁屬昆蟲綱鞘翅目芫菁科（Mylabris）昆蟲，中國有150余種，目前中藥中常用的斑蝥種類為大斑芫菁（Mylabris phalerata Pallas），或稱南方大斑蝥的干燥體以及黃黑小斑蝥（Mylabris cichorii Linnaeus）的干燥體。大斑芫菁主產長江流域及以南各省區，貴州省是大斑芫菁的主產區之一，性辛、熱；有劇毒；歸肝、胃、腎經；具有破結攻毒、除血積、利尿的功能[1]，是一種藥用價值極高的昆蟲，已經成為抗腫瘤的重要中藥材[2，3]。大斑芫菁體內具有多種抗癌有效物質，其分子量小，具揮發性，代表物質為斑蝥素（Cantharidin）及其衍生物[4，5]，可治療原發性肝癌、賁門癌、喉癌、胃癌、食道癌、消化道腫瘤等癥[6-8]。為了比較全面了解大斑芫菁中揮發性物質的成分組成，對貴州產大斑芫菁的揮發性物質進行了氣相色譜-質譜聯用（GC-MS）分析和鑒定，為更好地利用大斑芫菁這一特色藥用昆蟲提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料

大斑芫菁于2009年8月購自貴州省羅甸縣，經遵義醫學院李曉飛副教授鑒定為大斑芫菁。

1.2 儀器與試劑

6890-5973N型氣相色譜-質譜聯用儀（美國Agilent公司）；AL204型電子天平（萬分之一，梅特勒-托利多公司）；揮發油測定器；無水硫酸鈉、正己烷均為分析純。

1.3 方法

1.3.1 揮發油的提取 稱取100 g大斑芫菁干燥蟲體全身，粉碎，過60目篩。過篩后的樣品于500 mL圓底燒瓶中，加入400 mL 去離子水，接上揮發油測定器，將圓底燒瓶置于電加熱套中，參照2010版藥典（一部）附錄對揮發油進行提取，提取時間為3 h，為減少揮發性物質溶于水造成的損失，預先在測定器中加入5 mL正己烷， 以收集揮發性物質。提取后正己烷層呈淡橙色，具特殊氣味。經無水Na2SO4干燥后轉入具塞三角瓶中，4 ℃下保存待測。以0.45 μm微孔濾膜對樣品進行過濾，待測。

1.3.2 GC-MS 分析 氣相色譜條件：HP-5MS（5%苯取代甲基硅酮）色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；程序升溫，50 ℃保持5 min ， 以3 ℃/min升至150 ℃，以4 ℃/min升至230 ℃， 保持5 min；氣化室溫度260 ℃；載氣，高純He，流速1 mL/min；進樣量1 μL；分流比20∶1。質譜分析條件：離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃。電離方式：EI，電子能量70 eV；溶劑延遲4 min；質量掃描范圍30～500 amu。

對所得樣品的總離子流圖用峰面積歸一化法計算各組分的相對質量分數，對相對質量分數大于0.02%的揮發油成分進行積分并鑒定，對所含化學成分的質譜圖利用Wiley、NIST05兩種質譜數據庫進行計算機檢索比對， 并進行人工圖譜解析。

2 結果與分析

樣品經氣相色譜分離并經質譜掃描后，共檢出大斑蕪菁揮發性化合物86種，其中41種成分經過鑒定，其相對質量分數之和為22.52%。揮發油的總離子流圖見圖1，鑒定結果見表1。

由圖1和表1可知，大斑芫菁的揮發性成分組成非常豐富，41種化合物以醇、醛、酮、酸4類物質含量最多。其中有5種醇類物質、9種醛類物質、6種酮類物質、5種酸類物質。其他成分分別為2種醚類、3種烯類等。所鑒定成分的百分含量總和占可檢出成分的48.3%，鑒定種數占47.7%，仍有大量的微量成分僅僅通過質譜還無法鑒定。在所鑒定的成分中，含量較高的成分有苯乙醛（4.07%）、油酸（3.21%）、1，13-十四碳二烯（2.22%）、芳樟醇（1.70%）、香葉基丙酮（1.64%）。

3 小結與討論

一直以來，人們研究斑蝥時主要針對其包含的斑蝥素及其衍生物，認為斑蝥素是惟一的抗癌有效成分，而忽略了很多其他有用的物質。但從民間的應用中可以發現斑蝥中可利用的成分可能有多種，特別是所含的揮發性成分可能具有一定的效果。有人采用將斑蝥置于生雞蛋中并敷泥烤炙的方法，利用雞蛋吸附斑蝥的有效成分以治療早期肝癌，療效十分顯著。基于此，分析和鑒定斑蝥的揮發性成分就顯得十分重要。在下一步研究中，我們將考察從大斑芫菁中提取的揮發性物質是否具有抗癌活性，并尋找出相應的活性物質。

通過對大斑芫菁揮發性成分的分析鑒定及含量測定， 為綜合利用該藥用資源提供了科學依據。GC-MS聯用技術廣泛用于動、植物揮發油、精油及低極性化合物的分析，用該方法分析大斑芫菁的揮發性成分快速且全面，是分析大斑芫菁揮發性成分的有效手段。

參考文獻：

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