銅綠假單胞菌對糞腸球菌的體外抑制作用分析

【摘要】 目的 調查研究銅綠假單胞菌對糞腸球菌的體外抑制作用。方法 運用交叉條帶的實驗方式檢測銅綠假單胞菌對5株糞腸球菌的體外抑制活性。結果 銅綠假單胞菌對糞腸球菌的體外抑菌活性具有良好效果，實驗中有5株銅綠單胞菌對糞腸球菌具有一定程度的抗菌活性作用，其中1、5號株銅綠假單胞菌對糞球腸菌的抑制率已達到100%。結論 銅綠假單胞菌對實驗中的5株糞腸球菌具有良好的抑菌活性作用，對研究糞腸球菌的抗菌作用具有重要意義。

【關鍵詞】 銅綠假單胞菌；糞腸球菌；體外抑制作用

文章編號：1004-7484（2013）-12-7583-02

腸球菌（Enterococcus）普遍存在于自然界，一般棲居在各種溫血和冷血動物的腔腸，甚至昆蟲體內，也是健康人體的上呼吸道，口腔或腸道的常居菌。本菌可以引起心內膜炎，膽囊炎，腦膜炎，尿路感染及傷口感染等多種疾病。在人類糞便中的數量僅次于大腸菌群，每克成人的糞便中約含2×108個。糞腸球菌即為該屬中最為常見的代表種。

糞腸球菌（E.faecalis）又被稱之為糞鏈球菌，屬于人類機體內胃腸道以及上呼吸道中較為常見的菌群，該菌群廣泛分布在自然界，比如土壤、水以及植物等^[1]。根據調查研究得出，糞腸球菌已成為人類機體感染較為重要的病原菌，一般會在根管治療以后的內部形成生物膜，并產生一系列作用在根尖周組織中的毒力因子，也可以單獨或者在其他細菌的作用下形成新的根尖周圍變或者導致根尖周病變不能愈合^[2]。目前臨床中研究徹底消除糞腸球菌的藥物成為關注的焦點。我院在2010年1月至2011年10月隨機選取6株銅綠假單細胞菌，分別對臨床分離的5株糞腸球菌進行抗菌實驗，并取得了滿意的結果，現將調查結果報告如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料 隨機選取我院在2010年1月至2011年10月期間的6株銅綠假單胞菌，它們來源于臨床傷口分泌物以及痰標本的痰液。隨機選擇的5例糞腸球菌主要來自臨床患者尿液與血液等標本。所有的菌群均按照Bergey's Manual of Derminative bacteriol-ogy 進行有效鑒定。

1.2 試驗方法

1.2.1 培養基 由英國的OXOID公司所生產Mueller-Hinton瓊脂，其中批號為992952，失效的時間為2017年1月份。

1.2.2 菌液的配制 分別接種銅綠假單胞菌與糞腸球菌的各菌株于M-H瓊脂培養基之上，在35℃溫度下培養18h-24h，并將其菌落運用M-H肉湯配制成108cfu/ml的菌懸液，準備使用。隨后將其菌懸液接種在M-H瓊脂平板中央，呈現出直線劃線的接種，并在35℃的溫度下進行24h培養，運用無菌玻片將條帶上生成的菌落輕輕刮掉，并將平皿倒立放置，平皿蓋子內部放有一片浸泡過氯仿的5cm濾紙，放置在35℃的環境下15min。打開平皿并將濾紙片取走，等平皿內部的氯仿揮發結束以后，將糞腸球菌的菌懸液在原銅綠假單胞菌的條帶垂直交叉劃線中進行接種，并在35℃的環境下進行24h培養，觀察其結果。

1.3 觀察指標 在原銅綠假單胞菌的生長帶上，實驗中被檢測菌仍然在生長，若無抑菌帶出現時為耐藥（陰性），若出現6mm以及6mm以上抑菌帶時則為敏感（陽性）。

2 結 果

2.1 銅綠假單細胞對糞腸球菌體外抑制作用 本次實驗結果顯示銅綠假單細胞對糞腸球菌具有良好的抗菌活性，并且抑菌率為82%（試驗次數為100次，敏感次數為82），平均抑菌帶寬度為20.43mm，見表1。

2.2 銅綠假單細胞抗菌物質對糞腸球菌的抗菌狀況 本次實驗中選擇6株銅綠假單胞菌與5株糞腸球菌進行研究，實驗結果顯示銅綠假單胞菌對5株糞腸球菌皆具有較強的抑菌活性，其中1與5號的銅綠假單胞菌對糞腸球菌的抑菌率已達到了100%，并且菌群的抑菌平均帶寬為20.43mm。這證明了銅綠假單胞菌所產生的抗菌物質對糞腸球菌具有較強的抗菌活性。

3 討 論

銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginos，PAE） 屬于臨床醫院感染中較為重要的病原菌。近幾年來，隨著抗生素的廣泛使用，銅綠假單胞菌對于常見藥物的耐藥性逐漸嚴重，多重耐藥以及泛耐藥菌株不斷出現，帶給臨床治療帶來了較大困難。加強對銅綠假單胞菌耐藥性的監測并及時觀察該藥物耐藥性的發展趨勢，為臨床治療銅綠假單胞菌感染選擇正確抗菌藥物提供重要的依據。

銅綠假單胞菌不僅僅為人類機體內部的致病菌群，導致人類發生感染，從而引發人類進行感染，但該菌還可以產生藤黃綠膿菌素，既可以預防黃瓜、番茄等較多的根腐病，也不斷污染著血庫冰箱所存儲的血液^[3]。在調查中指出該菌群在自溶以后會放出毒素，該毒素中的磷脂成分會導致患者輸血以后發生休克。臨床中關于銅綠假單胞菌是否會對糞腸球菌產生較大的耐藥性與抗菌活力，尚未明確的報道^[4]。我院對2010年1月至2011年10月所選取的5例糞腸球菌，與6例銅綠假單純菌進行實驗，取得了良好的檢測結果。銅綠假單胞菌對糞腸球菌進行100次試驗次數，敏感次數則為82，對糞腸球菌的抑制作用達到了82%，并且抑菌率達到82%，對試驗中糞腸球菌具有較高的抑菌效果，其中1號與5號的抑菌率達到100%。本次調查研究中銅綠假單胞菌對糞腸球菌檢測的寬度為7.8mm-33.8mm，平均抑菌帶寬度為20.43mm。

綜上所述，銅綠假單胞菌對糞腸球菌具有較強的體外抑制作用，由于糞腸球菌比其他腸球菌對待抗菌藥物的耐藥性更強，因此本次實驗研究為糞腸球菌抗菌藥物開辟創新途徑，對臨床實驗研究腸球菌的抗菌效果具有重要的指導意義^[5]。

參考文獻

[1] 于靜.戴東曉.謝景朝.李軍如.陳惠珍.黃連等中藥水煎劑對糞腸球菌的體外抑制作用[J].河北醫藥，2012，09（10）：90-112.

[2] 秦金喜.李仲興.楊永昌.袁欣.柏秀菊.石忻羅.銅綠假單胞菌體外抑菌活性研究[J].中國微生態學雜志，2012，11（30）：45-68.

[3] 張新華.秦金喜.李仲興.銅綠假單胞菌對耐甲氧西林表皮葡萄球菌和糞腸球菌的體外抑菌作用研究[J].臨床薈萃，2012，04（05）：23-47.

[4] 張春平.喻華.劉華.龍騰鑲.銅綠假單胞菌感染分布及耐藥性動態變遷[J].中華醫院感染學雜志，2008，12（25）：78-91.

[5] 周小年.覃志偉.225株銅綠假單胞菌臨床分布及耐藥性分析[J].中國保健營養，2013，02（25）：25-78.