【摘要】 目的 研究中藥貝母的多樣性,考察其藥用功效。方法 本實驗主要分析平貝母和浙貝母兩種中藥貝母。首先使用超臨界流體萃取法,從兩種中藥貝母中提取相應(yīng)的實驗備品。再用高效液相色譜法,用甲基氰與濃度為0.1的磷酸溶液像混合,配制成流動相,進行程序洗脫;當(dāng)檢查的波長為250納米時,進行記錄;最后使用檢查中藥色譜指紋圖譜的計算機軟件對所記錄的圖譜進行評估。結(jié)果 對于檢測的兩種中藥貝母來說,平貝母和浙貝母有強烈的相似性。且平貝母和浙貝母中含有非共有峰。結(jié)論 從本次試驗的結(jié)果上來看,平貝母和浙貝母中含有非共有峰,這表明平貝母和浙貝母的化學(xué)成分具有多樣性。
【關(guān)鍵詞】 中藥;貝母;多樣性;研究;質(zhì)量
文章編號:1004-7484(2013)-12-7627-01
中藥貝母是一種多年生草本植物,醫(yī)學(xué)研究證實,中藥貝母的鱗莖具有很好的藥用性能,能夠清除肺熱,去除痰液,且能夠鎮(zhèn)咳。目前在我國重要貝母從產(chǎn)地和種類劃分主要分為以下五種:川貝母,浙貝母,平貝母,伊貝母,湖北貝母。貝母的種類眾多,而每種貝母的藥性不同,隨著醫(yī)療技術(shù)水平的高速發(fā)展,找尋一種有效途徑,將中藥貝母進行合理分類,從而保證用藥安全,已經(jīng)成為了醫(yī)學(xué)界急需解決的問題。本文主要分析平貝母和浙貝母兩種品種,采用超臨界流體萃取法融合指紋圖譜法對兩種貝母的多樣性進行探究,旨在研究中藥貝母的多樣性,考察其藥用功效。實驗效果很好,現(xiàn)將實驗結(jié)果陳列如下:
1 設(shè)備與藥材
1.1 實驗設(shè)備 STI5000高效液相色譜儀,安捷倫四元泵,自動進樣器,F(xiàn)lamcomat真空脫氣裝置,柱溫箱Model320,dad檢測器,CHI電化學(xué)工作站,超純凈水器,上海九頂分析天平,恒溫振蕩器,離心儀。
1.2 實驗藥材 甲基氰,純度極高的超純水,平貝母,浙貝母。
2 方 法
2.1 色譜條件 取色譜長度為5μ米的光柱;用甲基氰與濃度為0.1的磷酸溶液像混合,配制成流動相;程序洗脫時間為0-6min。當(dāng)波長長度為250納米時,進行記錄;萃取液的取樣量為50μL。
2.2 中藥萃取液的配備 取兩種貝母的粉末約200毫克,將其分別放置于容量為25毫升的量杯中,加入濃度為50%的乙醇,超聲提取30分鐘,再進行離心處理10分鐘,將溶液上清液取出待用。將體積為20ml,等量的CH2Cl2,上清液,C6H12混合,組成三項體,放置萃取。當(dāng)靜置時長為24小時后,取三項體的下層CH2Cl2溶液10毫升,去除殘渣,用濃度為50%,體積為1毫升的乙醇溶液混合,再將混合液用孔徑為0.45μm的濾網(wǎng)過濾,中藥萃取液配備完畢。
2.3 實驗過程
2.3.1 指紋圖譜 使用前文制備完成的中藥萃取液,持續(xù)進樣5次,整理樣品的高效液相色譜指紋圖譜,對于實驗的精密度而言,色譜峰間隔時間的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在1%之下,色譜峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差小于3%,這些標(biāo)準(zhǔn)都符合指紋圖譜法的相關(guān)要求。最后使用檢查中藥色譜指紋圖譜的計算機軟件對所記錄的圖譜進行評估,平貝母和浙貝母兩種中藥貝母成分的二維指紋圖譜如圖1所示。
2.3.2 指紋圖譜分析 從圖一中可以直觀的看到兩種貝母成分存在明顯的差異,其質(zhì)量信息也存在顯著差異。譬如色譜峰的數(shù)目,形狀以及強度等都不盡相同,色譜峰的最高峰和最低峰也不同。二維圖譜可以形象的顯示成分差異和質(zhì)量差異,完全能夠用于中藥貝母的種類鑒別。
2.3.3 相似度探究 使用中藥色譜指紋圖譜相似度判定軟件探究兩種中藥貝母的而為色譜指紋圖譜,結(jié)果統(tǒng)計如表1所示。
3 討 論
3.1 相似度探究的結(jié)論表明平貝母和浙貝母之間的相似度結(jié)果為0.576,這充分說明兩者間存在顯著差異。
3.2 實驗中采用的超臨界流體萃取法來對中藥貝母中弱型的化學(xué)成分進行提取,實驗中對萃取時間和溶劑的選擇上嚴格控制。萃取的結(jié)果顯示,CH2Cl2,C6H12非常適合用于提取溶液的重,輕兩項。此外通過對萃取時間的觀察,可知當(dāng)萃取時間為24小時時,測量結(jié)果最為準(zhǔn)確。
3.3 中藥貝母的種類繁多,而且中藥貝母的化學(xué)成分體系較為復(fù)雜,相似性也極其相近,要想建立中藥貝母的指紋圖譜用以鑒別貝母種類非常困難,中藥貝母的多樣性不易分辨,這些都給醫(yī)療界研究和開發(fā)貝母類藥物帶來了很大的難度。本次試驗通過分析平貝母和浙貝母兩種品種,采用超臨界流體萃取法融合指紋圖譜法對兩種貝母的多樣性進行探究,得到了可靠的探究結(jié)果,為中藥貝母多樣性的研究和質(zhì)量的考察都提供了可靠的依據(jù)。
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