青棗核果木枝葉乙酸乙酯段脂溶性成分GC-MS 分析

孫玉婉，蔡雯雯，應娉嬋，何沂飛，劉平懷

海南大學材料與化工學院，海口 570228

核果木屬(Drypetes)植物約有200 種，屬于大戟科(Euphorbiaceae)葉下珠亞科(Phyllanth oideae Ascherson)核果木族［Drypeteae (Pax et Hoffm.)Hurusawa］，廣泛分布于亞洲、美洲和非洲中西部等熱帶、亞熱帶地區。在非洲民間，核果木作為傳統藥材的來源，主要用于治療淋病、牙痛、痢疾、腫瘤、黑熱病等［1，2］，同時還具有抗氧化、抗衰老、抗炎等功效［3，4］。

青棗核果木［Drypetes cumingii (Baill.)Pax et Hoffm］主要分布于海南、廣東、廣西、云南等地。本文以青棗核果木為材料結合硅膠柱層析法對其枝葉的乙酸乙酯部位脂溶性提取物進行成分分離，利用GC-MS 技術進行分析與鑒定，通過其所得的質譜圖解析確定乙酸乙酯段提取物的各個化學成分，為之后的進一步研究與開發利用提供一定的科學根據。

1 實驗部分

1.1 實驗儀器與試劑

RE-52AA 旋轉蒸發器(上海亞榮生化儀器廠);GC7890A/MSD5975C 毛細管氣相色譜-質譜聯用儀(美國Agilent Technologies 公司);BT224S 電子天平(德國Sartorious 公司);KQ-250DE 型醫用數控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器公司);中藥粉碎機(上海淀久中藥機械制造有限公司);色譜硅膠(均為青島海洋化工廠產品)。

乙酸乙酯、乙醇、石油醚、正丁醇等(分析純，廣州化學試劑廠)。

1.2 原材料

2012年4 月，采自于海南省霸王嶺國家級自然保護區，經中國醫學科學院北京協和醫學院藥用植物研究所海南分所馮錦東研究員鑒定，并將其制成標本為青棗核果木枝葉，存放于海南優勢資源化工材料應用技術教育部重點實驗，采后自然曬干，貯存備用。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品制備

將青棗核果木枝葉自然風干，粉碎后稱量19 kg，用95%乙醇在室溫下浸泡提取3 次，合并提取液后減壓濃縮得到無醇味浸膏1248 g。將其分散于水中制成懸濁液，依次經石油醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇依次萃取后減壓濃縮得到石油醚墨綠色油狀萃取物130.9 g，乙酸乙酯萃取物177.0 g，正丁醇萃取物327.53 g。取乙酸乙酯萃取物進行硅膠柱層析，干法上樣，氯仿、氯仿-甲醇梯度洗脫，TLC 檢測合并濃縮相同流份，得到的成分中有兩個脂溶性成分為脂溶性提取物1 和脂溶性提取物2。

1.3.2 GC-MS 分析條件

氣相色譜條件:石英毛細管柱HP-FFAP(30 mm× 0.25 mm，0.2 μm)，程序升溫:從80 ℃開始，持續3 min 后，以6 ℃/min 升溫到150 ℃，再以80 ℃/min 升溫到250 ℃，保持5min，載氣為He，柱流量1.0 mL/min，進樣口溫度250 ℃，分流比為80 ∶1。質譜條件:EI 源，電離電壓:70 eV，離子源溫度230℃，掃描范圍10～550 aum，進樣量1.0 μL。

2 結果與討論

利用GC-MS 分析技術在上述實驗條件下進行操作，得到提取物I 與II 的GC-MS 總離子流圖，再對總離子流圖中的各峰通過質譜掃描后得質譜圖，經計算機用NIST98 標準圖庫檢索，人工譜圖解析，并查對有關質譜資料［5，6］，從圖譜的基峰、質荷比和相對豐度等方面進行直觀比較、分析和鑒定，確定了脂溶性提取物1 中15 種化學成分和提取物2 中的32 種化學成分，并利用面積歸一法確定各個成分的相對含量，其結果見下表1 和表2。

表1 青棗核果木枝葉乙酸乙酯提取物I 成分分析Table 1 Chemical constituents of ethyl acetate extract I of D.cumingii leaves and stems

由表1 可以看得出:提取物1 中分離鑒定所得的15 種化學成分占總峰面積的98.95%，其中主要成分有角鯊烯(30.34%)、油酸乙酯(16.58%)、棕櫚酸乙酯(16.27%)、9，12-十八碳二烯酸乙酯(16.08%)。

提取物1 中所鑒定成分多數為酯類化合物，占總峰面積61.54%;少數為脂肪烴類化合物2 種，占4.73%、酸類化合物2 種，占2.34%、以及僅有的一種萜類化合物—角鯊烯，占30.34%。

表2 青棗核果木枝葉乙酸乙酯提取物II 成分分析Table 2 Chemical constituents of ethyl acetate extract II of D.cumingii leaves and stems

由表2 可以看出:提取物2 經分離、鑒定得到了其中的32 個化學成分，占色譜總峰面積的76.22%，其主要成分有橙花叔醇(6.06%)、1，2-苯二羥酸-2-基己基酯(5.87%)、角鯊烯(5.77%)、4，8，12，16-四甲基十五碳-4-內酯(4.12%)、1，5-庚二烯，3，4-二甲基-(3.87%)、雌舞毒蛾引誘劑(3.71%)。

提取物2 的鑒定成分中含有萜類化合物6 種，占總峰面積19.72%;酯類化合物5 種，占16.58%;脂肪烴與芳香烴類化合物7 種，占14.18%;醇類化合物酸類物質7 種，占峰面積的10.74%;其余少數成分分別是酚類、酮類、酸類與酰胺類化合物。

3 結論

提取物1 與2 中共同含有成分較多的角鯊烯物質是種開鏈三萜類化合物，具有提高體內超氧化物歧化酶(SOD)活性，從而起到抗疲勞作用，同時還具有滲透、擴散、殺菌的能力，另外它還可以增強機體免疫能力、抗腫瘤、抗癌等多種生理功能［7，8］，是一種重要的生物活性物質。

其中提取物1 中主要成分是酯類物質，含量最高的油酸乙酯，可用于表面活性劑和其他有機化學品的制備，也可用作香料。提取物2 中成分種類多，其中萜類化合物含量最大，以橙花叔醇比重最多，其可作為配制玫瑰型、紫丁香型等香精的成分［9］，為化妝品和食品工業不可缺少的原料，因此對其研究具有重要意義。除此之外提取物2 中還含有一種生物信息素—雌舞毒蛾引誘劑，用于預測預報及捕殺成蟲［10］。

之前對青棗核果木枝葉石油醚部位脂溶性成分的分析也顯示含有大量的角鯊烯，并且同課題組已研究過海南核果木具有較強的抗氧活性［4］。因此初步表明青棗核果木枝葉乙酸乙酯部位提取物中富含多種重要功能性物質，對其在醫藥、食品、化妝品等領域上具有一定的研究價值。

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3 Walker AR，Sillans R，Trochain JL.Les Plantes utiles du Gabon Ed.Paris:Paul Lechevalier 12-Rue de Tounron，1961.165-166.

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