艾納香揮發油和左旋龍腦在不同葉型及不同部位的分布

夏稷子， 陳 貴， 安 軍， 趙 智

(貴州省黔南州食品藥品檢驗所，貴州 都勻558000)

艾納香為菊科艾納香屬植物艾納香Blumea balsamifera (L.)DC. 的新鮮或干燥地上部分［1］，是貴州省十大苗藥之一［2］，其新鮮葉經提取加工制成的結晶艾片是《中國藥典》2010 年版一部收載的品種。艾納香的主要成分為揮發油，而揮發油的主要成分則是左旋龍腦［3-5］。目前艾納香資源的利用仍然處于依靠傳統經驗的狀態，對不同葉型不同部位藥材，缺乏更為深入的系統研究［6］。艾納香按其葉型大小可分為大葉艾、小葉艾和馬耳艾，但尚未見有對艾納香3 種葉型及不同部位葉中左旋龍腦和揮發油量的比較檢測報道［7］，因此本研究結果將為艾納香藥材的質量控制與資源合理利用，提供新的依據。

1 實驗材料

1.1 儀器與試藥 島津-2014 氣相色譜儀(日本島津公司);島津氣相色譜工作站，AL204 型電子天平(Mettler Toledo);SK5200HP 型超聲波清洗儀(KUDOS);H-1650 型高速離心機(長沙湘儀離心機有限公司)。左旋龍腦對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號110881-200706)，水楊酸甲酯(分析純)，乙酸乙酯(分析純)。

1.2 供試樣品 艾納香樣品采集自貴州省羅甸縣，經貴陽中醫學院何順志教授鑒定，為菊科艾納香屬植物艾納香Blumea balsamifera (L)DC 的新鮮或干燥地上部分。樣品采集時間均為2013 年12 月上旬，受試樣品為陰干的葉。

2 方法與結果

2.1 左旋龍腦測定［8-9］

2.1.1 GC 色譜條件 PEG20M (10%)色譜填充柱(2 m×3 mm×2 mm);載氣為氮氣;燃氣為氫氣;FID 檢測器;柱溫150 ℃;檢測器溫度200 ℃。

2.1.2 對照品溶液制備 精密稱取左旋龍腦對照品適量，加內標溶液(水楊酸甲酯2.5 mg/mL)制成每1 mL 含0.4 mg 的對照品溶液。

2.1.3 供試品溶液的制備 稱取艾納香樣品2 g置錐形瓶中，加入內標溶液 (水楊酸甲酯2.5 mg/mL)10 mL，稱定質量，超聲提取30 min，放冷，用乙酸乙酯補足減失的質量，離心取上清液作為供試品溶液。取對照品溶液與供試品溶液各1 μL，注入氣相色譜儀測定。采用內標法，計算樣品中左旋龍腦含有量。艾納香不同葉型和不同部位樣品的測定結果見表1、表2，提示艾納香不同葉型間左旋龍腦的量沒有顯著性差異，而艾納香不同部位間中上部位葉左旋龍腦的量明顯高于下部葉。

表1 艾納香不同葉型中左旋龍腦量Tab.1 Einar centre-left spin borneol contents in different leaf shapes

表2 艾納香不同部位葉左旋龍腦量Tab.2 Einar sinistral borneol contents at different positions of the fragrance

2.2 揮發油測定［10］取艾納香樣品適量，稱定質量，照《中國藥典》2010 年版一部附錄X D 揮發油測定法項下測定［11］，艾納香不同葉型和不同部位葉樣品的揮發油測定結果見表3、表4，提示艾納香不同葉型間揮發油含有量沒有顯著性差異，而艾納香不同部位間中上部位葉揮發油含有量明顯高于下部葉。

表3 艾納香不同葉型揮發油含有量Tab.3 Einar incense volatile oil contents in different leaf shapes

表4 艾納香不同部位葉揮發油含有量Tab.4 Einar incense volatile oil contents at different positions of the fragrance

3 討論

3.1 本研究結果顯示，艾納香不同葉型中左旋龍腦含有量由高到低依次為馬耳艾、大葉艾、小葉艾。同一產地不同葉型艾納香中左旋龍腦含有量間的差值分別為0.1 ～0.6 mg/g，不同產地同一葉型艾納香，馬耳艾中左旋龍腦含有量最高與最低之間的差值為1.7 ～0.04 mg/g。大葉艾中左旋龍腦含有量最高與最低之間的差值為1.5 ～0.01 mg/g，小葉艾中左旋龍腦含有量最高與最低之間的差值為1.5 ～0.01 mg/g，說明同一葉型艾納香中左旋龍腦含有量差異較大，但3 種葉型間左旋龍腦量在統計學上并無顯著性差異。此外發現，馬耳艾與小葉艾揮發油含有量接近，而大葉艾揮發油含有量與前二者略有差異，但幾者之間在統計學上也無顯著性差異。這些結果是否與本實驗所采集的樣本數量較少有關，還需進一步實驗加以證明。值得特別指出的是，艾納香不同部位葉左旋龍腦和揮發油含有量均為中上部位葉高于下部葉。同一樣本莖不同部位葉左旋龍腦含有量最高與最低的差值為1.8 ～0.3 mg/g，揮發油含有量最高與最低的差值為

2.2 ～0.5 mL/100 g，表明不同產地上下不同部位莖葉艾納香中，揮發油和左旋龍腦的含有量都具有顯著性差異，即中上部位葉中揮發油和左旋龍腦的量均高于同一標本莖下部位葉。

3.2 艾納香含有的揮發油主要成分為左旋龍腦，并含少量桉油精、左旋樟腦、倍半萜及黃酮、香豆精、三萜化合物等［12-13］。本實驗結果印證了艾納香揮發油量與左旋龍腦量間存在的正相關性，即揮發油含有量高的樣本其左旋龍腦的含有量相對較高，揮發油含有量低的樣本其左旋龍腦的含有量也相對較低。實驗結果還顯示，艾納香樣品間左旋龍腦成分在揮發油中所占比例明顯不同，即不同產地、相同葉型、相同部位或相同產地、不同葉型、不同部位艾納香中，左旋龍腦含有量差異較大，這可能是因為生長環境如海拔、光照時間、營養、葉片大小、土壤、水分等不同而致揮發油各成分比例不同［14-15］。因此認為，在對艾納香質量進行評價時，應綜合考慮揮發油和左旋龍腦的含有量狀況。

3.3 本研究結果表明，莖葉部位不同是造成艾納香揮發油和左旋龍腦的含有量有顯著性差異的主要原因之一，雖然不同葉型艾納香葉的揮發油和左旋龍腦的量也具有差異，但差異并不十分顯著。以往研究中也曾發現，氣候地理環境的不同是造成艾納香中左旋龍腦含有量差異的原因之一［8］。因此，種植地理環境的選擇就顯得尤為重要，應首選馬耳艾葉型和中上部位葉等揮發油量和左旋龍腦量都高表達的產株和產地。由于馬耳艾葉片小產量低，種植和加工部門大多采用大葉艾這一高產量的葉型。但我們認為在選苗研究中，也應考慮對馬耳艾葉型和中上部位葉等高表達產株進行基因改造，以增大增多相應葉型和部位的葉片，提高艾納香藥材有效成分的產量。本實驗對艾納香不同葉型、不同部位葉中揮發油和左旋龍腦測定，將有利于篩選出揮發油和左旋龍腦的量都高的藥材葉型及部位，為艾納香GAP 種植基地篩選優良種源提供科學指導。

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