野生馬齒莧脂肪酸化學成分的分離與鑒定

趙心童 趙仁宏 王立祥 賀圣文 趙風源 侯蕾蕾

1.山東大學醫(yī)學院，山東濟南 250012；2.濰坊醫(yī)學院基礎(chǔ)醫(yī)學院，山東濰坊 261053；3.濰坊醫(yī)學院公共衛(wèi)生學院，山東濰坊 261053

野生馬齒莧是民間“清熱、解毒、散血、消腫”的傳統(tǒng)中藥，具有藥食兩用的作用，國內(nèi)外對馬齒莧有效成份進行的分析表明，野生馬齒莧含有大量對心臟病有防治效果的生物活性成份，具有調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、減少脂質(zhì)沉積，抗動脈粥樣硬化（AS）形成的新藥理作用。 但目前對馬齒莧脂肪酸有效成分進行提取分析，探討其有效成分影響AS 大鼠基因表達的分子機制未見報道。 為此，本課題擬對馬齒莧脂肪酸有效成分的種類和含量進行鑒定解析，以期為馬齒莧有效成分防治AS 的分子機制提供理論和實驗依據(jù)，進而為開發(fā)應(yīng)用打下良好基礎(chǔ)。

1 儀器與試藥

1.1 樣品

馬齒莧鮮品全草（莖、葉及種子），采集后涼至半干、烘干，粉碎成粉末（產(chǎn)地：濰坊），經(jīng)鑒定為馬齒莧科植物馬齒莧Portulace Oleracea L.。

1.2 儀器

Agilent 6890N-5973N 型氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國安捷倫公司）。條件：進樣口溫度280℃，HP-INNOWax（60 m×250 μm×0.25 μm）毛細管柱，柱流速5.0 mL/min，溫度變化100℃-10℃-280℃（15 min）。

2 方法與結(jié)果

2.1 馬齒莧有效成分的提取

取馬齒莧全草粉末置濾紙筒內(nèi)，加石油醚索氏提取12 h，至無色，回收石油醚，將油轉(zhuǎn)移至干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，于105℃干燥3 h，后稱重，計算含油量。

2.2 馬齒莧有效成分的鑒定分析

馬齒莧脂肪油皂化-甲酯化處理：取30 mg 馬齒莧提取脂肪油于離心管中，加入0.51 mol/L KOH 甲醇液，于70℃水浴中回流10 min，放冷，加入15%三氟化錋甲醇液2 mL，70℃水浴回流5 min，取出放冷，加入飽和氯化鈉2 mL，加入正乙烷5 mL，猛烈振搖，離心10 min，取上清液。離心機轉(zhuǎn)速為2000 r/min。應(yīng)用氣質(zhì)譜分析法鑒定分析馬齒莧脂肪酸的種類和含量。

2.3 馬齒莧脂肪酸氣質(zhì)譜解析結(jié)果

2.3.1 馬齒莧脂肪酸各相關(guān)主要成分離子流圖如下：依次分別為亞油酸、14-十八烯酸、α-亞麻酸、 油酸，見圖1～4。

2.3.2 馬齒莧脂肪酸氣質(zhì)譜解析結(jié)果見表1。結(jié)果顯示：馬齒莧全草含脂肪油4.04%，油中含亞油酸（22.57%）、ω-3 脂肪酸（ω-3FA）—α-亞麻酸（1.35%）、油酸（1.27%）、14-十八烯酸（24.37%）等不飽和脂肪酸共計49.57%。

圖1 亞油酸離子流圖

圖2 14-十八烯酸離子流圖

圖3 α-亞麻酸離子流圖

圖4 油酸離子流圖

表1 馬齒莧脂肪酸氣質(zhì)譜解析結(jié)果

3 討論

野生馬齒莧兼有藥品和食品雙重價值，國內(nèi)外對馬齒莧的有效成分進行的分析表明，野生馬齒莧含有大量對心臟病有防治效果的生物活性成分。本課題對馬齒莧鮮品全草（莖、葉及種子）脂肪油進行了提取，經(jīng)皂化-甲酯化處理，應(yīng)用氣相色譜-質(zhì)譜分析法鑒定分析馬齒莧脂肪酸有效成分的種類和含量[1-3]。結(jié)果顯示，馬齒莧脂肪油富含多不飽和脂肪酸，其有效成分亞油酸、ω-3 脂肪酸（ω-3FA）—α-亞麻酸（α-LNA）、油酸比較豐富，具有降血脂、抗動脈粥樣硬化、防治心血管疾病的作用，研究結(jié)果為馬齒莧有效成分防治動脈粥樣硬化的分子機制提供了理論和實驗依據(jù)，從而，為研制和開發(fā)新型抗動脈粥樣硬化、防治心血管疾病藥物打下基礎(chǔ)。

亞油酸、α-LNA 作為人體必需脂肪酸，是體內(nèi)各組織生物膜的結(jié)構(gòu)材料，也是合成人體一系列前列腺素的前體，它必須由體外攝取。 正常人從食物中攝取α-LNA 后、經(jīng)△6-脫氫酶、碳鏈延長酶等的作用，生成一系列代謝產(chǎn)物， 其中最重要的是二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA）。EPA 是體內(nèi)三烯前列腺素前體，DHA 是大腦、視網(wǎng)膜等神經(jīng)系統(tǒng)磷脂的主要成分。 α-LNA 具有降血脂、降血壓、抑制過敏反應(yīng)、抗血栓、抗癌等藥理作用[4-6]。

ω-3FA（α-LNA）只有在魚類脂肪中才有較高的含量，而在蔬菜類植物中不可能存在，但在馬齒莧中卻意外發(fā)現(xiàn)存在。曾有報道，馬齒莧富含亞麻酸，是不可多得的亞麻酸天然植物資源，并且也有相當數(shù)量的二十碳五烯酸（EPA）和二十二碳六烯酸（DHA），本研究檢測到α-亞麻酸（1.35%），其含量較低可能與地域種類、檢測方法有關(guān)，有待進一步全面研究[7-8]。近年來，以EPA 和DHA 為代表的ω-3FA 治療心血管病效果以被肯定，市場上出現(xiàn)了大量富含EPA、DHA 的魚油制品。自從國外發(fā)現(xiàn)馬齒莧等植物中含有α-LNA 后，又提倡由綠葉資源通過膳食攝取α-LNA。 目前美國和加拿大發(fā)現(xiàn)，每日從富含α-LNA 的植物油中攝取1.2～2.0 g α-LNA，對維持健康是足夠的。到目前為止，還未見到以馬齒莧為原料開發(fā)的有防治心血管病療效的制劑，表明在這方面尚有大量的工作要做。 而且富含亞麻酸的植物油與魚油相比，具有相對穩(wěn)定的優(yōu)點，不含對人體有害的膽固醇以及過量服用可引起中毒的VA 和VD，可以用做烹飪油，在長期持續(xù)的膳食補充計劃中比它魚油更為有利[9-10]。

馬齒莧在我國資源豐富，儲量大且無污染，即可自然生長又可人工栽培，成本低廉，隨著對它不斷深入的藥理研究及在食品、醫(yī)藥方面的廣泛應(yīng)用，馬齒莧的藥理活性和生物利用價值將更加顯示出來[11-12]。特別是隨著人們生活水平的提高，對自身的保健更加重視，而馬齒莧作為一種新型的含有各種營養(yǎng)成分的綠色食品，是人們的最佳選擇。 故它在藥品、食品、保健品、飼料、獸藥等方面具有廣闊的開發(fā)利用價值。

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