QuEChERS在食品中真菌毒素檢測的研究進展

陳建彪， 董麗娜，劉 嬌，路 磊，趙明明，丁 華，王小紅,4，胡定金，周有祥,*

（1.通標標準技術服務（上海）有限公司，上海 200233；2.華中農業大學食品科學技術學院，湖北 武漢 430070；3.湖北省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所，湖北 武漢 430064；4.環境 食品學教 育部重點實驗室，湖北 武漢 430070）

QuEChERS在食品中真菌毒素檢測的研究進展

陳建彪1， 董麗娜1，劉 嬌2，路 磊3，趙明明3，丁 華3，王小紅2,4，胡定金3，周有祥3,*

（1.通標標準技術服務（上海）有限公司，上海 200233；2.華中農業大學食品科學技術學院，湖北 武漢 430070；3.湖北省農業科學院農業質量標準與檢測技術研究所，湖北 武漢 430064；4.環境 食品學教 育部重點實驗室，湖北 武漢 430070）

真菌毒素是重要的食品安全危害因子，建立高通量真菌毒素分析方法將有效降低人群的真菌毒素暴露風險，而實現復雜基質中多種真菌毒素的聯合提取是建立這類分析技術的前提保證。QuEChERS是集快速（quick）、簡單（easy）、便宜（cheap）、有效（effective）、可靠（rugged）、安全（safe）于一體前處理技術的簡稱，本文通過介紹QuEChERS技術的原理和近年來該技術在真菌毒素分析領域的應用，針對真菌毒素的理化性質和樣品基質特點，探討了QuEChERS技術中不同提取液和凈化劑的優缺點和適用范圍，分析該技術在提取凈化過程中存在的問題，提出了改進思路，并展望今后QuEChERS技術在多真菌毒素聯合分析的發展趨勢。

QuEChERS；真菌毒素；食品；農產品

真菌毒素主要是一類由產毒絲狀真菌（通常稱作產毒真菌）產生的有毒次生代謝產物。目前，已發現了300～400種真菌毒素，主要來源于鐮刀菌屬（Fusarium），曲霉屬（Aspergillus）和青霉屬（Penicillium）的200多種產毒絲狀真菌[1-2]。在適宜條件下，產毒絲狀真菌極易在產前和產后侵染農作物，造成真菌毒素殘留，威脅人畜健康。為了最大限度減小人群的真菌毒素暴露風險，世界各國均建立了一系列真菌毒素限量和檢測標準，加強食品和飼料中真菌毒素殘留的監控力度。

早期真菌毒素的分析方法主要是針對是單一毒素檢測，如：薄層層析（thin layer chromatography，TLC）[3]，但這類方法通常是半定量方法，不具備高通量分析能力，難以滿足當前食品 分析的要求。而以酶聯免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA）為代表的免疫分析方法，其檢測效率高，但這類方法存在干擾因素多，重現性較差等問題[4-5]，因此多用于樣品快速檢測或初篩。隨著現代儀器分析技術的發展及推廣，真菌毒素高通量分析的儀器檢測方法在真菌毒素分析中的應用報道也越來越多，以氣相色譜-串聯質譜法（gas chromatography tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）[6]、液相色譜-串聯質譜法（liquid chromatography tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）[7]、毛細管電泳色譜法（capillary electrophoresis，CE）[8]和超高效液相-串聯質譜法（ultra performance liquid chromatography tandem mass spectrometry，UHPLC-MS/MS）[9]等為代表的現代儀器方法，由于重現性好，檢出限低，常作為真菌毒素的定量或仲裁方法。綜合上述真菌毒素儀器分析方法的特點，我們發現，現代儀器分析技術正朝著廣譜分析、自動分析、痕量分析、快速分析以及綠色分析的趨 勢發展[10-11]。

由于儀器分析方法靈敏度高，痕量干擾物質會嚴重影響最終分析結果。因此有效的提取凈化方法是實現現代分析的前提保證。目前應用于真菌毒素分析的提取凈化方法包括：固相萃?。╯olid-phase extraction）[12]、固相微萃?。╯olid-phase microextraction）[13]、超臨界流體萃?。╯upercritical fluid extraction）[14]、免疫親和萃?。╥mmunoaffinity extraction）[15]、快速溶劑萃取（accelerated solvent extraction）[16]和基質固相分散萃?。╩atrix solid-phase dispersion）[17]等，但上述方法多用于單一或者同類毒素的提取凈化，在多真菌毒素毒素分析方面報道較少。近年來，QuEChERS（quick, easy, cheap, effective, rugged and safe）技術作為一項新興的高效提取凈化技術，廣泛應用于農藥殘留的分析檢測中，其高效、簡便和綠色的技術理念正逐漸在獸藥殘留[18]、食品添加劑[19]、生物毒素[20]以及環境污染 物[21-22]等分析檢測領域得到應用。本文根據QuEChERS技術的特點，結合樣品基質特征和真菌毒素的理化性質，對QuEChERS技術在真菌毒 素分析中的應用做簡要綜述。

1 QuEChERS技術簡介

QuEChERS技術是由Anastassiades等[23]研究人員在基質固相分散萃取技術的基礎上，整合了提取、固相萃取等步驟，建立的集快速（quick）、簡單（easy）、便宜（cheap）、有效（effective）、可靠（rugged）、安全（safe）為一體的樣品提取凈化技術，即QuEChERS技術。一般而言，QuEChERS技術分為提取、鹽析和凈化3個步驟（圖1）。即先以有機溶劑（如：乙腈、丙酮和乙酸乙酯等）與水按照一定比例混合后萃取待測物，再經過鹽析劑（如：無水MgSO4、Na2SO4和NaCl等）鹽析分層，最后取目標提取液至裝有凈化劑（如：乙二胺-N-丙基硅烷、佛羅里硅土、石墨化炭黑和C18鍵合硅膠等）的聚四氟乙烯離心管中凈化，經振搖離心后，取上清液進行儀器分析[10]。

圖1 常見QuEChERS法的操作步驟Fig.1 Schematic procedure of the most commonly used QuEChERS

QuEChERS技術最初是作為高含水量樣品（＞75%，如水果和蔬菜等）中多農藥殘留的提取凈化方法[23]。隨后在低含水量（＜25%，如谷物）和油脂類樣品（如：肉、蛋和植物油等）的多農藥殘留分析中也得到了應用[24-25]。隨著人們對QuEChERS技術中提取液、鹽析劑以及凈化劑等相關內容研究的深入，適用于其他食品安全危害因子（如：食品添加劑、獸藥、真菌毒素以及多環芳烴等）的相關方法也不斷被開發和報道[18-19,22]。

2 QuEChERS方法在農產品中真菌毒素檢測的應用

大多數農產品營養成分豐富，在適宜條件下，極易受到產毒真菌的侵染，這使得相關消費群體（人和畜禽等）具有較高的真菌毒素暴露風險。特別需要指出的是，傳統的真菌毒素提取凈化方法，通常需要經過多次溶劑提取凈化，不僅存在較高的真菌毒素暴露風險，還需要使用大量的高毒試劑，這使得大多數操作人員對于分析真菌毒素具有較強的戒備心理。較之傳統的真菌毒素提取凈化方法，QuEChERS技術的整個分析體系具有以下顯著優勢：1）實驗設備簡單。整個QuEChERS處理僅需要離心管、振蕩器、離心機即可完成。2）試劑使用量少。在全部提取凈化步驟中，有機試劑使用量大約在5～25mL之間，廢棄液在15mL以內，對環境污染小。3）前處理步驟少。整個提取凈化操作是在重復振蕩—離心—再振蕩中完成，操作技術難度低，適宜推廣。4）處理時間短。全部提取凈化步驟可在30min內完成，適合批量分析。5）實現多組分提取凈化。通過設計提取液配方，選擇適宜鹽析劑和凈化劑，可實現多真菌毒素的聯合提取，提高分析效率。6）操作人員暴露風險低。QuEChERS技術的操作過程簡單，處理時間短，溶劑使用量少，可控性強。

基于上述優點，根據真菌毒素和樣品基質的理化特性，開發真菌毒素，尤其是多真菌毒素的QuEChERS技術正逐漸成為真菌毒素研究領域的熱點。

目前，QuEChERS技術已應用于真菌毒素分析，現已報道的毒素主要包括：15-乙酰脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（15-acetyldeoxynivalenol，15-AcDON）、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（deoxynivalenol，DON）、雪腐鐮刀菌烯醇（nivalenol，NIV）、T-2毒素（T-2 toxin，T-2）、HT-2毒素（HT-2 toxin）、黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2（aflatoxin B1、B2、G1、G2，AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）、赭曲霉毒素A （ochratoxin A，OTA）、橘霉素（citrinin，CIT）、伏馬菌素（fumonisin，FUN）、麥角克堿（ergocristine，ERG）、玉米赤霉烯酮（zearalenone，ZEN）、棒曲霉毒素（patulin，PAT）以及環匹阿尼酸（cyclopiazonic acid，CPA）等，具體見表1。

2.1 樣品基質和目標毒素

目前QuEChERS技術在真菌毒素檢測分析中的應用，主要是針對極易在生長、貯藏過程中發生真菌污染的高淀粉、高蛋白的樣品，如：玉米、小麥及其制品等。由于這些樣品基質中的淀粉和蛋白質等組分在提取和凈化過程中極易發生交聯形成網絡結構，使毒素難以從樣品中游離出來[11]，因此通常在分析這類樣品前，添加一定量的去離子水，充分浸潤樣品，以提高有機溶劑對非水溶性基質的滲透性和提取效率[40]。

真菌毒素是產毒真菌的次生代謝產物，其種類多，結構差異較大，即使是同類毒素，也有較多的衍生物。如何建立有效的QuEChERS分析技術是目前急需解決的問題之一?，F有報道表明，不管是提取同類別還是不同類別的真菌毒素，只要極性相似，QuEChERS技術都有較高的提取效率，例如：DON、T-2等A、B類單端孢霉烯族毒素，來源于同一種屬的產毒真菌，且都屬于極性毒素，針對其結構相近，極性相似的特點，Sospedra等[26]以QuEChERS技術提取凈化了面粉中的單端孢霉烯族毒素，而FUN也屬于極性毒素，Zachariasova等[30]根據其極性與單端孢霉烯族毒素極性相近，采用QuEChERS技術實現了單端孢霉烯族毒素和伏馬菌素的聯合分析。

2.2 提取液

從本質上說，QuEChERS技術是在液液分配（有機試劑與水）的基礎上采用了基質固相分散技術實現了樣品的高效提取和凈化。作為QuEChERS技術重要的組成部分，提取液的提取效率決定著最終分析結果的準確性。在傳統真菌毒素的檢測方法中，乙腈、丙酮、乙酸乙酯與三氯甲烷等通常具有較好的提取效率，但綜合各種試劑的理化性質和在QuEChERS中的提取效果，乙腈以其提取率高，適用范圍廣的特點，應用最多。這是因為乙腈為極性較強的低毒溶劑（極性5.8），具有優良的溶解性，根據“相似相溶”的原理，對大多數非極性和部分極性真菌毒素有較高的提取率，特別是在鹽析作用下，極易從水相中萃取極性較弱的毒素。丙酮極性（極性5.1）與乙腈相似，對AFB1和OTA提取效果較好，但該溶劑的鹽析效果較差，而且難以去除水溶性雜質干擾，一般不作為QuEChERS技術中的主要提取試劑。乙酸乙酯（極性4.4）極性低于乙腈和丙酮，水溶性差，提取單一強極性毒素（如：OTA和CIT）效果較好，可作為聯合提取多種真菌毒素的輔助試劑使用[10,26-27]。

表1 QuEChERS方法在真菌毒素檢測中的應用Table1 Application of QuEChERS in the analysis of mycotoxins

雖然單一乙腈作為提取液對多真菌毒素的聯合提取效果較好，但對pH值、極性范圍敏感的真菌毒素提取時，需在提取液中添加輔助試劑（乙酸、甲酸和甲醇等）以增強聯合提取的效果[26,28-29,34-39]。例如：在分析橘霉素時，由于CIT屬于兩性化合物，使用單一乙腈的效果并不理想，但調節提取液pH值至CIT的等電點后，可有效降低CIT的水溶性，回收率可從30%增至70%以上；相似的，FUN也屬于酸性毒素，在提取液中添加一定量的酸后，在玉米樣品中的回收率可達80%[29]。

2.3 鹽析劑

樣品經過提取后，提取液中仍然存在大量的共萃物，通過鹽析步驟，可以初步去除部分水溶性雜質。當提取液中添加了鹽析劑后，提取液中的有機相分子（如：乙腈）會由于離子強度的增加，斷開與水分子間的氫鍵，從水中鹽析出來。在QuEChERS技術中，常用鹽析劑包括：MgSO4、MgCl、NaNO3、NaSO4、NaCl和LiCl等。其中MgSO4和NaCl的鹽析效果最好[23]。MgSO4有強結合水的能力（20℃的水溶解度為337g/L），不但顯著減少混合提取液中的水含量，而且能飽和水溶液促使混合液分層。但添加過量MgSO4易形成結塊使提取液與樣品顆粒接觸不充分，而且會釋放過多的熱量引起過高的溫度，影響檢測結果的準確度。NaCl可以與MgSO4協同飽和水溶液，加速提取液分層。通過控制NaCl的添加量可以調節乙腈層中水含量，進而控制提取液中分析物和雜質在兩相中的分配。合理的MgSO4和NaCl使用量，不但有效促使提取液分層，而且可以控制共萃取物與分析物的分離。因此分析真菌毒素時，多數研究人員模擬果蔬中農殘分析的QuEChERS技術，采用4g MgSO4和1g NaCl的混合鹽促使提取液分層并獲得了理想的分層效果[28-33,37]。

2.4 凈化劑

當樣品提取液經鹽析分層后，少量的蛋白質、油脂、色素以及糖組分會不可避免地與真菌毒素共同萃取出來，嚴重干擾殘留的分析結果。在經典的QuEChERS技術中，通常選用乙二胺-N-丙基硅烷（primary secondary amine，PSA）、石墨化炭黑（graphitized carbon black，GCB）、C8、C18（或ODS）、氰丙基鍵合硅膠（cyanopropyl，—CN）、胺丙基鍵合硅膠（aminopropyl，—NH2）等凈化劑。這些凈化劑可通過極性相互作用，或者非極性相互作用使目標物和雜質相互分離。

PSA的結構上有兩個氨基，可與分子結構上含有羥基的極性物質發生氫鍵相互作用，吸附共萃取物中的極性有機酸、極性色素等雜質，在凈化非極性類真菌毒素（如：AFT）中的雜質效果較好。Trebstein等以PSA為凈化劑分析玉米和小麥中的AFT、DON和T2等多種真菌毒素，有效去除了樣品中的酸性雜質和極性色素[33]，但Desmarchelier等[29]認為PSA上的氨基容易與酸性毒素（FUN、CIT和OTA等）上的羧基發生反應，一般不適用于凈化這類毒素。

GCB具有陰離子交換作用的吸附劑，通過疏水相互作用和氫鍵相互作用吸附雜質，對具有平面分子結構的雜質（如：甾醇和葉綠素等）吸附作用顯著，而且對具有平面分子結構或不完全平面分子結構的真菌毒素也有較強的吸附作用，在分析飼料中的AFT、ZEN和雪腐鐮刀菌烯醇（nivalenol）時，GCB幾乎可以吸附全部具有平面結構的毒素[41]。

基于含有C18或者C8烷基鏈的凈化劑是目前廣泛使用的反相吸附材料，可通過非極性相互作用吸附非極性物質，可以有效去除凈化樣品中的淀粉、糖類和脂肪類物質。Cunha等[31]在分析谷物中的ZEN、FUN、NIV、DON和15-AcDON時，發現C18與MgSO4混合對提取液有顯著的 凈化作用。

另外，含有—CN和—NH2等活性基團的 凈化劑可通過氫鍵作用吸附極性物質（脂肪酸和有機酸等），在農藥殘留和獸藥殘留分析上有著廣泛應用[42]。雖然相關報道較少，但在我們的實驗中發現—NH2吸附材料強烈吸附飼料中的極性色素，凈化非極性毒素（如：AFT）的效果顯著。

樣品在經過QuEChERS技術處理后，最終的樣品液仍會存在一定量的共萃物干擾物，這些干擾物仍然會影響待測物的檢測信號，特別是在使用紫外或者熒光等光學檢測器時，干擾更為嚴重。因此大多報道通常是采用具有高選擇性的質譜檢測器，特別是串聯質譜檢測器來進行分析，以提高分析靈敏度和準確度。

綜上所述，QuEChERS技術在真菌毒素分析領域，特別是多真菌毒素分析檢測中體現出的優勢，使得該技術備受關注。通過對QuEChERS技術中的提取液、鹽析劑和凈化劑的系統研究，將是建立適宜不同樣品基質的更有效的QuEChERS技術的有力保證。

3 QuEChERS法應用于真菌毒素分析領域的展望

樣品前處理是分析檢測中“去蕪存菁”的關鍵步驟，直接關系到分析結果的準確性和可靠性。真菌毒素作為一個重要的食品安全危害因子，如何科學、準確、客觀評價農產品中毒素殘留水平，是當前真菌毒素分析檢測領域中的急需解決的問題。QuEChERS方法以提取凈化效率高、環境污染小、操作簡單快速以及操作風險低等優點，滿足了真菌毒素檢測分析的需求，但現有QuEChERS方法在以下幾點仍存在進一步改進的空間，以滿足真菌毒素，特別是多真菌毒素檢測的發展趨勢。

3.1 Q uEChERS提取液和鹽析劑的選擇

通過設計不同提取液配方來提高提取液從樣品基質中提取目標物的提取能力；通過設計不同提取液配方或者提取方法來實現不同極性毒素的聯合提取；通過選擇不同鹽析劑來降低雜質在目標提取液中的分配比例，減少共萃取雜質。

3.2 凈化劑材料的選擇

通過設計、選擇不同凈化劑來實現降低樣品基質雜質干擾，尤其找到適用于高脂肪、高蛋白和高淀粉的樣品基質的凈化劑；研究吸附劑的理化性質，通過添加輔助試劑，降低吸附劑對目標毒素的吸附，實現不同極性毒素的聯合凈化。

3.3 擴展QuEChERS技術的適用性

改進QuEChERS技術，使樣品經QuEChERS技術提取凈化后，適合紫外、熒光檢測器的分析方法；利用QuEChERS技術的先進理念，開發適用于其他真菌毒素分析技術，特別是快速分析技術，如適合ELISA的QuEChERS技術。

總之，QuEChERS技術是一個具有先進理念的前處理技術。建立提取范圍更廣，提取效率更高，操作更簡單，更環保的QuEChERS技術將是后續相關研究的重點。

[1] ZOLLNER P, MAYER-HELM B. Trace mycotoxin analysis in complex biological and food matrices by liquid chromatographyatmospheric pressure ionisation mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2006, 1136(2): 123-169.

[2] BERTHILLER F, SULYOK M, KRSKA R, et al. Chromatographic methods for the simultaneous determination of mycotoxins and their conjugates in cereals[J]. International Journal of Food Microbiology, 2007, 119(1/2): 33-37.

[3] ROBB J, NORVAL M. Comparison of cytotoxicity and thin-layer chromatography methods for detection of mycotoxins[J]. Applied and Environmental Microbiology, 1983, 46(4): 948-950.

[4] BHATTACHARYA D, BHATTACHARYA R, DHAR T K. A novel signal amplification technology for ELISA based on catalyzed reporter deposition. Demonstration of its applicability for measuring aflatoxin B1[J]. Journal of Immunological Methods, 1999, 230(1/2): 71-86.

[5] SCOTT P M, LAWRENCE J W, van WALBEEK W. Detection of mycotoxins by thin-layer chromatography: application to screening of fungal extracts[J]. Applied Microbiology, 1970, 20(5): 839-842.

[6] TANAKA T, YONEDA A, INOUE S, et al. Simultaneous determination of trichothecene mycotoxins and zearalenone in cereals by gas chromatography-mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2000, 882(1/2): 23-28.

[7] SULYOK M, BERTHILLER F, KRSKA R, et al. Development and validation of a liquid chromatography/tandem mass spectrometric method for the determination of 39 mycotoxins in wheat and maize[J]. Rapid Commun Mass Spectrom, 2006, 20(18): 2649-2659.

[8] PE?A R, ALCARAZ M C, ARCE L, et al. Screening of aflatoxins in feed samples using a flow system coupled to capillary electrophoresis[J]. Journal of Chromatography A, 2002, 967(2): 303-314.

[9] BELTR?N E, IB??EZ M, SANCHO J V, et al. Determination of mycotoxins in different food commodities by ultra-high-pressure liquid chromatography coupled to triple quadrupole mass spectrometry[J]. Rapid Commun Mass Spectrom, 2009, 23(12): 1801-1809.

[10] WILKOWSKA A, BIZIUK M. Determination of pesticide residues in food matrices using the QuEChERS methodology[J]. Food Chemistry, 2010, 125(3): 803-812.

[11] RIDGWAY K, LALLJIE S P, SMITH R M. Sample preparation techniques for the determination of trace residues and contaminants in foods[J]. Journal of Chromatography A, 2007, 1153(1/2): 36-53.

[12] VEGA M, MU?OZ K, SEPDLVEDA C, et al. Solid-phase extraction and HPLC determination of ochratoxin A in cereals products on chilean market[J]. Food Control, 2009, 20(7): 631-634.

[13] QUINTO M, SPADACCINO G, PALERMO C, et al. Determination of aflatoxins in cereal flours by solid-phase microextraction coupled with liquid chromatography and post-column photochemical derivatizationfluorescence detection[J]. Journal of Chromatography A, 2009, 1216(49): 8636-8641.

[14] ZOUGAGH M, R?OS A. Supercritical fluid extraction of macrocyclic lactone mycotoxins in maize flour samples for rapid amperometric screening and alternative liquid chromatographic method for confirmation[J]. Journal of Chromatograph y A, 2008, 1177(1): 50-57.

[15] SENYUVA H Z, GILBERT J. Immunoaffinity column clean-up techniques in food analysis: a review[J]. Journal of Chromatography B, 2010, 878(2): 115-132.

[16] JUAN C, GONZLEZ L, SORIANO M J, et al. Accelerated solvent extraction of ochratoxin a from rice samples[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2005, 53(24): 9348-9351.

[17] BOGIALLI S, di CORCIA A. Matrix solid-phase dispersion as a valuable tool for extracting contaminants from foodstuffs[J]. Journal of Biochemical and Biophysical Methods, 2007, 70(2): 163-179.

[18] STUBBINGS G, BIGWOOD T. The development and validation of a multiclass liquid chromatography tandem mass spectrometry (LCMS/MS) procedure for the determination of veterinary drug residues in animal tissue using a QuEChERS (Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged and Safe) approach[J]. Analytica Chimica Acta, 2009, 637(1/2): 68-78.

[19] MASTOVSKA K, LEHOTAY S J. Rapid sample preparation method for LC-MS/MS or GC-MS analysis of acrylamide in various food matrices[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2006, 54(19): 7001-7008.

[20] MOL H G, PLAZA-BOLA?OS P, ZOMER P, et al. Toward a generic extraction method for simultaneous determination of pesticides, mycotoxins, plant toxins, and veterinary drugs in feed and food matrixes[J]. Analytical Chemistry, 2008, 80(24): 9450-9459.

[21] PINTO C G, LAESPADA M E, MART?N S H, et al. Simplified QuEChERS approach for the extraction of chlorinated compounds from soil samples[J]. Talanta, 2010, 81(1/2): 385-391.

[22] RAMALHOSA M J, PA?GA P, MORAIS S, et al. Analysis of polycyclic aromatic hydrocarbons in fish: evaluation of a quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe extraction method[J]. Journal of Separation Science, 2009, 32(20): 3529-3538.

[23] ANASTASSIADES M, LEHOTAY S J, STAJNBAHER D, et al. Fast and easy multiresidue method employing acetonitrile extraction/ partitioning and “dispersive solid-phase extraction” for the determination of pesticide residues in produce[J]. Journal of AOAC International, 2003, 86(2): 412-431.

[24] LEHOTAY S J, MASTOVSKA K, YUN S J. Evaluation of two fast and easy methods for pesticide residue analysis in fatty food matrixes[J]. Journal of AOAC International, 2005, 88(2): 630-638.

[25] FERRER C, GóMEZ M J, GARC?A-REYES J F, et al. Determination of pesticide residues in olive oil and olives[J]. TrAC Trends in Analytical Chemistry, 2007, 26(3): 239-251.

[26] SOSPEDRA I, BLESA J, SORIANO J M, et al. Use of the modified quick easy cheap effective rugged and safe sample preparation approach for the simultaneous analysis of type A- and B-trichothecenes in wheat flour[J]. Journal of Chromatography A, 2010, 1217(9): 1437-1440.

[27] MELANIE B, CHRISTOPH W, MONIKA W, et al. A versatile method for quantification of aflatoxins and ochratoxin A in dried figs[J]. Journal of Planar Chromatography - Modern TLC, 2009, 23(3): 193-197.

[28] RASMUSSEN R R, STORM I M, RASMUSSEN P H, et al. Multimycotoxin analysis of maize silage by LC-MS/MS[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2010, 397(2): 765-776.

[29] DESMARCHELIER A, OBERSON J M, TELLA P, et al. Development and comparison of two multiresidue methods for the analysis of 17 mycotoxins in cereals by liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometry[J]. Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2010, 58(13): 7510-7519.

[30] ZACHARIASOVA M, LACINA O, MALACHOVA A, et al. Novel approaches in analysis of Fusarium mycotoxins in cereals employing ultra performance liquid chromatography coupled with high resolution mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta, 2010, 662(1): 51-61.

[31] CUNHA S C, FERNANDES J O. Development and validation of a method based on a QuEChERS procedure and heart-cutting GC-MS for determination of five mycotoxins in cereal products[J]. Journal of Separation Science, 2010, 33(4/5): 600-609.

[32] VACLAVIK L, ZACHARIASOVA M, HRBEK V, et al. Analysis of multiple mycotoxins in cereals under ambient conditions using direct analysis in real time (DART) ionization coupled to high resolution mass spectrometry[J]. Talanta, 2010, 82(5): 1950-1957.

[33] TREBSTEIN A, LAUBER U, HUMPF H U. Analysis of fusarium toxins via HPLC-MS/MS multimethods: matrix effects and stategies for compensation[J]. Mycotoxin Research, 2009, 25(4): 201-213.

[34] FRENICH A G, ROMERO-GONZ?LEZ R, GóMEZ-PéREZ M L, et al. Multi-mycotoxin analysis in eggs using a QuEChERS-based extraction procedure and ultra-high-pressure liquid chromatography coupled to triple quadrupole mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218(28): 4349-4356.

[35] AGUILERA-LUIZ M M, PLAZA-BOLA?OS P, ROMEROGONZ?LEZ R, et al. Comparison of the efficiency of different extraction methods for the simultaneous determination of mycotoxins and pesticides in milk samples by ultra high-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2011, 399(8): 2863-2875.

[36] ROMERO-GONZ?LEZ R, GARRIDO FRENICH A, MART?NEZ VIDAL J L, et al. Simultaneous determination of pesticides, biopesticides and mycotoxins in organic products applying a quick, easy, cheap, effective, rugged and safe extraction procedure and ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218(11): 1477-1485.

[37] RODR?GUEZ-CARRASCO Y, BERRADA H, FONT G, et al. Multi-mycotoxin analysis in wheat semolina using an acetonitrilebased extraction procedure and gas chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1270(1): 28-40.

[38] ZHANG Jinming, WU Yinliang, LU Yaobin. Simultaneous determination of carbamate insecticides and mycotoxins in cereals by reversed phase liquid chromatography tandem mass spectrometry using a quick, easy, cheap, effective, rugged and safe extraction procedure[J]. Journal of Chromatography B, 2013, 915-916: 13-20.

[39] RUBERT J, FAPOHUNDA S O, SOLER C. A survey of mycotoxins in random street-vended snacks from Lagos, Nigeria, using QuEChERS-HPLC-MS/MS[J]. Food Control, 2013, 32(2): 673-677.

[40] HINOJO M J, MEDINA A, VALLE-ALGARRA F M, et al. Fumonisin pro duction in rice cultures of Fusarium verticillioides under different incubation conditions using an optimized analytical method[J]. Food Microbiology, 2006, 23(2): 119-127.

[41] GONG Xiaoming, WANG Hongbing, ZHANG Yibing, et al. Determination of 15 mycotoxins in foods and feeds using high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry with gel permeation chromatography combined QuEChERS purification[J]. Journal of Chromatography and Separation Techniques, 2012, 3(2): 2157-7064.

[42] BARKER S A. Matrix solid-phase dispersion[J]. Journal of Chromatography A, 2000, 885(1/2): 115-127.

Advances in Application of QuEChERS for Mycotoxin Analysis in Foods

CHEN Jian-biao1, DONG Li-na1, LIU Jiao2, LU Lei3, ZHAO Ming-ming3, DING Hua3, WANG Xiao-hong2,4, HU Ding-jin3, ZHOU You-xiang3,*
(1. SGS-CSTC Standards Technical Services (Shanghai) Co. Ltd., Shanghai 200233, China; 2. College of Food Science and Technology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070, China; 3. Institut e of Agricultural Quality Standard s and Testing Technology Research, Hubei Academy of Agricultural Sciences, Wuhan 430064, China; 4. Key Laboratory of Environment Correlative Dietology, Ministry of Education, Wuhan 430070, China)

Mycotoxins are a group of important risk factors of food safety. Simultaneous extraction of mycotoxins from complex sample matrices is a prerequisite to establish a high-throughput analytical method which in turn will provide useful test data for reducing the human health risks posed by mycotoxin exposure. QuEChERS, an acronym for Quick, Easy, Cheap, Effective, Rugged, and Safe, is a commonly used sample preparation techni que. In this paper, the principle of QuEChERS technique and its applications in mycotoxin analysis are reviewed. The advantages and disadvantages of different extraction solvents and sorbents in QuEChERS are discussed on the basis of the matrix effects and the chemical and physical characteristics of mycotoxins. Finally, some improvements and future trends in the application of QuEChERS technique for mycotoxin analysis are proposed.

QuEChERS; mycotoxins; food; agricultural products

O652.6

A

1002-6630（2014）11-0286-06

10.7506/spkx1002-6630-201411057

2013-05-18

國家自然科學基金面上項目（31271876）；中央高校基本科研業務費專項資金項目（2013PY103）；湖北省公益性專項基金項目（2013BBB12）；湖北省農業科學院青年科學基金項目（2011NKYJJ22）；湖北省農業科 技創新中心基金項目（2012-620-001-03）

陳建彪（1983—），男，碩士，主要從事食品分析研究。E-mail：chenbiao416@126.com

*通信作者：周有祥（1979—），男，副研究員，博士，主要從事農產品風險評估研究。E-mail：zhouyouxiang@gmail.com