基于“溫補脾陽”功效的附子“效—毒—證”關聯研究

欒永福孫 蓉

（1山東省中醫藥研究院，濟南，250014；2天津中醫藥大學，天津，300073）

基于“溫補脾陽”功效的附子“效—毒—證”關聯研究

欒永福1，2孫 蓉1

（1山東省中醫藥研究院，濟南，250014；2天津中醫藥大學，天津，300073）

目的：分別研究附子水提物預防或治療給藥對脾腎陽虛證大鼠發揮溫補脾陽功效時的藥效及其伴隨毒副作用。方法：按15%大黃粉懸液每天給藥劑量為8.9 g·kg-1·d-1，連續給藥9 d，且附加冰水游泳致力竭的方法，制備大鼠脾腎陽虛證模型。預防實驗組給藥與造模同時進行，治療實驗組造模成功后給藥，兩個實驗藥物組均給藥9 d。實驗期間進行證候積分和體重稱量，并檢測血中TSH、IgG、C3等藥效指標和LDH、CTn-I等心毒性指標的水平。結果：附子水提物能改善脾腎陽虛證大鼠的證候積分，增大脾體比值、腎體比值、腎上腺體比值和胸腺體比值，同時能升高血清中TSH、IgG、C3水平，且升高血LDH、CTn-I的水平，降低心體比值。結論：附子水提物對大黃致脾腎陽虛證大鼠具有一定的預防和治療作用，同時均伴有一定的心臟毒性作用。

附子；脾腎陽虛；功效；毒性

附子為毛茛科植物烏頭Aconitum carmichaelliDebx.的子根的加工品，習稱“泥附子”[1]。其性辛、甘，大熱；有毒。歸心、腎、脾經。具有回陽救逆，補火助陽，散寒止痛的功效。用于亡陽虛脫，肢冷脈微，心陽不足，胸痹心痛，虛寒吐瀉，脫腹冷痛，腎陽虛衰，陽痿宮冷，陰寒水腫，陽虛外感，寒濕痹痛。附子是一味臨床常用中藥，然而其固有毒性影響了該藥的進一步開發應用。其毒性物質基礎主要是雙酯型二萜類生物堿，主要為烏頭堿、新烏頭堿、次烏頭堿等烏頭屬類生物堿。

“是藥三分毒”，中藥毒性是“藥物”的一種基本屬性和客觀表現，中藥毒性與功效和證候密切相關，是在中醫辨證用藥和中藥發揮功效的過程中被逐漸認知和發現的，因此，中藥毒性應當放在功效（適應證）和中醫的“證候”中間進行綜合評價和認知，不能孤立地就毒性論毒性。

附子作為有毒中藥在不同證候模型上體現的功效與毒性有一定的差異性，因此附子的功效與毒性應當放在證候的背景下進行合理評價和科學認知。只有在其主治證候的基礎上進行功效與毒性研究，才符合中醫藥的研究特點，才能科學合理地進行有毒中藥的毒性-功效-證候關聯性評價。脾腎陽虛證是指脾腎陽氣虛衰、陰寒內生所表現的虛寒證候，臨床表現為畏寒喜溫、形寒肢冷、乏力、消瘦、便溏及腹瀉等[2]，為附子的主治證候之一。鑒于此，本實驗制備了脾腎陽虛證大鼠模型，并對附子水提物對脾腎陽虛證大鼠的功效與毒性進行了觀察和評價，將附子的功效與毒性放在證候的基礎上綜合評價，平衡利弊，以期為附子在臨床實踐中可以更加安全、更加合理、更具療效的應用提供實驗依據，進而合理闡釋中醫理論中“藥以治病，因毒為能”的合理性與科學性。

1 實驗材料

1.1 實驗藥物 附子（Aconitum carmichaeliDebx.），購自北京同仁堂飲片有限責任公司，批號：201232732 -S。經山東省中醫藥研究院林慧彬研究員鑒定為毛茛科植物烏頭的子根，按2010年版《中華人民共和國藥典》（以下簡稱《中國藥典》）附子項下檢查，符合各項規定。取附子藥材1000 g用10倍量水浸泡，加熱回流提取2次，每次1.5 h，16層紗布過濾，取藥液濃縮至含生藥量1.2 g·mL-1，批號：20130419。實驗前分別用蒸餾水稀釋至1.080 g·m L-1、0.540 g·m L-1、0.270 g·mL-1、0.191 g·mL-1、0.135 g·m L-1、0.096 g·mL-1、0.068 g·mL-1，備用。

附子理中丸（北京同仁堂科技發展股份有限公司制藥廠），由附子（制）100 g、黨參200 g、白術（炒）150 g、干姜100 g、甘草100 g制成，產品批號：12011329。附子理中丸具有溫中健脾之功效，用于脾胃虛寒，脘腹冷痛，嘔吐泄瀉，手足不溫。故用其作為大黃所致脾腎陽虛證的陽性藥。實驗前用蒸餾水制成0.243 g· mL-1水懸液，備用。

大黃（山東百味堂中藥飲片有限公司），批號：121101。經山東省中醫藥研究院林慧彬研究員鑒定為藥用大黃Rheum officinaleBaill.的干燥根及根莖，且符合各項標準，可用于實驗研究。實驗前用蒸餾水制成15%大黃粉懸液，備用。

1.2 實驗動物 Wistar大鼠，雄性，體重140～200 g，共100只，購自山東省魯抗醫藥股份有限公司，動物合格證號：SCXK（魯）20130001。

1.3 儀器與試劑 YP20001電子天平（上海上天精密儀器有限公司）；AL104電子天平（梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司）；KDM型調溫電熱套，購于山東鄄城華魯電熱儀器有限公司；DZKM-S-6電熱恒溫水浴鍋（北京市永光明醫療儀器廠）。UV-2102 PC型紫外可見分光光度儀（中美合資尤尼柯有限公司），常規病理檢測儀器等。

TSH（促甲狀腺素）（201307）、IgG（免疫球蛋白）（201307）、C3（C3補體）（201307）、LDH（乳酸脫氫酶）（20130722）、CTn-I（心肌肌鈣蛋白）（201307）試劑盒均購自由南京建成生物工程研究所。

1.4 劑量設置依據 按照2010版《中國藥典》規定，附子人臨床日用量為3～15 g，按最大劑量換算至大鼠則為1.35 g·kg-1，所以設置相當于人日用量的1、2、4、8倍劑量組，于1、2倍劑量之間設置1個劑量組，于1倍劑量之下設置2個劑量組。因此本實驗設置7個劑量組：10.80、5.40、2.70、1.91、1.35、0.96、0.68 g· kg-1。

附子理中丸，人日用量3粒，每粒9 g，所以人日用量為27 g／d，換算至大鼠則為2.43 g·kg-1·d-1。因此本實驗將其濃度配置為0.243 g·mL-1，按10 mL· kg-1灌胃給藥。

2 實驗方法

2.1 脾腎陽虛證大鼠模型的制備 大鼠每天上午灌胃15%大黃粉懸液，用藥量為8.9 g·kg-1·d-1，連服9 d，下午冰水游泳致力竭（力竭標準為全身下沉至沒頸，不能堅持游泳）。有萎靡、倦臥、毛枯槁、畏寒、消瘦、四肢不收、便溏脫肛、納呆、活動頻度下降、肛門紅腫等表現者為造模成功[3]。

2.2 實驗分組與給藥

2.2.1 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠的效毒關聯評價 取大鼠100只，雌性各半，按體重分為正常對照組、脾腎陽虛證模型組、附子水提物10.80、5.40、2.70、1.91、1.35、0.96、0.68 g·kg-1劑量組和中藥陽性藥組。

對照組每天按10 mL·kg-1灌胃蒸餾水；模型組每天進行造模；附子各劑量組每天造模后按10mL·kg-1分別灌胃10.80、5.40、2.70、1.91、1.35、0.96、0.68 g ·kg-1生藥量的附子水提物；中藥陽性藥組每天造模后按10 mL·kg-1灌胃2.43 g·kg-1的附子理中丸水懸液。

2.2.2 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠的效毒關聯評價 取成模大鼠90只，雌雄各半，按體重分為脾腎陽虛證模型組、附子水提物10.80、5.40、2.70、1.91、1.35、0.96、0.68 g·kg-1劑量組和中藥陽性藥組，另取10只雌雄各半正常大鼠作為對照組。

對照組和模型組每天按10 m L／kg灌胃蒸餾水；附子各劑量組每天按10 mL·kg-1分別灌胃10.80、5.40、2.70、1.91、1.35、0.96、0.68 g·kg-1生藥量的附子水提物；中藥陽性藥組每天按10 mL·kg-1灌胃2.43 g·kg-1的附子理中丸水懸液。

2.3 觀察與記錄 每天稱量體重并進行證候積分，積分標準[4]如表1。

表1 脾腎陽虛證大鼠證候積分表

2.4 標本采集與檢測 末次給藥24 h后，大鼠摘眼球法取血后脫頸椎處死，取心、肝、脾、腎、腦、腎上腺、胸腺稱重，然后用將血漿進行3500 r／min離心10 min，取上清液檢測TSH、IgG、C3、LDH、CTn-I的含量。

2.5 數據的統計與處理 數據用（ˉx±s）表示，采用SPSS 13.0統計軟件對各組數據進行統計處理和組間比較，P＜0.05為數據統計有統計學意義。

3 實驗結果

3.1 對體重變化的影響

3.1.1 預防實驗 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠體重的影響，詳見表2。

表2 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠體重的影響（±s，n＝10）

表2 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠體重的影響（±s，n＝10）

注：與模型組相比，*表示P＜0.05，**表示P＜0.01，***表示P＜0.001。（下同）

組附子理中丸組劑量（g·kg-1）——組別對照組模型組附子1組附子2組附子3組附子4組附子5組附子6組附子7 10.80 5.40 2.70 1.91 1.35 0.96 0.68 2.43 d0 208.0±11.8 206.3±14.4205.0±11.9 203.9±9.8 203.0±8.4 202.9±8.3 202.9±8.0 202.8±7.7 202.5±7.2 202.6±7.1 d1 213.5±17.1 209.7±14.6211.6±12.1 209.4±9.1 208.3±9.1 208.6±8.4 208.6±7.3 209.0±7.7 208.6±7.8 207.6±7.5 d2 220.7±17.0 212.7±11.3217.6±12.0 214.8±8.9 214.4±9.8 213.9±8.8 214.7±6.4 215.0±7.0 214.8±8.2 213.4±6.9 d3 227.8±16.9 218.7±10.0220.4±10.2 221.0±8.0 220.1±10.1 218.6±8.8 220.6±6.2 220.9±6.2 221.0±7.3 223.2±6.2 d4 235.3±16.3 223.7±10.0226.3±9.9 226.9±7.8 226.5±10.1 223.6±9.7 226.3±5.5 226.5±6.6 226.3±7.5 232.6±5.3*d5 243.0±17.0*228.3±9.8 232.9±9.7 233.3±8.0 232.9±10.2 229.4±10.0 231.9±5.2 232.8±6.3 232.2±7.7 239.1±4.9**d6 250.8±17.2**231.2±6.0 238.2±9.6 239.8±7.7*239.2±11.4 235.5±10.2 238.4±6.3*238.9±6.5*237.5±7.6 248.9±7.3**d7 256.7±16.8*235.8±6.2 244.6±9.6*246.2±7.7**246.2±11.4*247.4±5.8***247.9±4.2***247.4±4.4***247.0±4.9***253.9±4.5***d8 264.9±15.0***240.1±6.8 252.7±6.6***253.2±6.0***254.1±9.4**255.2±5.0***254.8±3.1***253.4±4.7***252.8±3.6***259.8±4.5***d9 271.5±15.5***244.0±7.0 255.5±8.8**256.4±8.1**258.0±8.9**258.3±6.3***257.1±4.2***257.0±3.5***256.2±5.1***268.7±10.3***

由表2可知，與正常組相比，脾腎陽虛模型組大鼠體重增長明顯緩慢；預防給藥附子水提物后，大鼠體重增長加快，在一定的范圍內隨著劑量的增大體重增長幅度升高。

3.1.2 治療實驗 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠體重的影響，詳見表3。由表3可知，與正常組相比，脾腎陽虛模型組大鼠體重增長明顯緩慢；治療給藥附子水提物后，大鼠體重增長加快，在一定的范圍內隨著劑量的增大體重增長幅度升高。

表3 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠體重的影響（±s，n＝10）

表3 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠體重的影響（±s，n＝10）

組附子理中丸組劑量（g·kg-1）——組別對照組模型組附子1組附子2組附子3組附子4組附子5組附子6組附子7 10.80 5.40 2.70 1.91 1.35 0.96 0.68 2.43 d0 174.3±11.8 174.4±11.7174.5±11.7 174.4±11.7 174.4±11.5 174.9±11.5 175.0±11.4 174.9±11.4 174.9±11.4 174.9±11.4 d1 180.1±12.7 178.8±11.7180.3±11.8 179.5±12.2 181.0±11.5 180.6±12.2 181.0±12.4 182.2±11.6 182.1±12.0 180.9±11.8 d2 185.8±13.4 183.9±12.0185.6±12.2 184.7±12.3 186.2±11.8 184.9±11.9 185.4±12.4 185.2±12.2 187.2±12.6 185.8±11.6 d3 192.0±14.3 188.7±12.2190.7±12.1 190.4±12.1 190.5±12.4 189.8±13.3 191.3±12.3 187.2±13.4 192.1±12.6 190.8±11.8 d4 197.5±14.0 193.0±12.7193.7±12.8 192.7±12.4 193.5±13.0 193.7±13.5 194.3±12.4 191.7±12.7 194.8±12.8 193.6±12.0 d5 202.2±14.8 194.2±13.5196.7±13.1 194.8±12.1 195.5±13.1 196.8±12.7 195.1±12.9 194.3±12.2 197.8±12.8 197.6±13.0 d6 206.8±16.6 198.0±13.4199.8±12.8 197.2±12.3 198.9±12.1 199.9±13.0 197.1±12.7 197.2±11.9 199.2±13.3 199.1±13.3 d7 211.6±15.7 201.4±12.7203.4±13.3 201.7±12.8 202.2±12.8 203.6±13.1 199.6±12.7 200.7±12.3 202.0±13.5 202.8±13.9 d8 216.1±16.6 203.2±12.2205.5±14.0 204.2±13.1 204.3±13.2 205.7±12.6 201.4±12.7 204.3±12.6 205.9±13.5 204.5±13.8 d9 219.8±17.2 205.7±12.5209.2±14.4 207.6±13.6 206.2±13.1 207.5±13.0 204.5±13.1 207.7±12.7 208.8±13.8 207.5±14.1 d10 225.2±17.6*210.4±13.5210.7±14.6 210.0±13.6 209.7±13.0 211.4±14.3 207.5±12.2 210.7±13.4 212.4±14.6 214.1±14.2 d11 233.0±16.7**212.6±14.4215.8±14.9 214.4±13.8 215.6±13.1 214.8±14.4 213.0±12.2 213.0±12.5 213.4±11.0 218.9±14.8 d12 239.4±16.7**214.2±15.5222.5±15.5 220.5±13.5 220.6±13.4 220.6±14.4 220.5±9.1 219.6±14.1 219.4±11.8 222.8±15.2 d13 246.0±16.3***216.9±14.8227.4±15.8 225.7±11.8 225.4±11.2 225.4±14.9 224.8±9.7 224.7±12.7 224.3±12.9 231.5±16.4 d14 252.1±16.6***221.2±15.3234.9±16.0 233.9±9.32*233.6±10.9 234.5±10.7*231.0±8.2 230.4±12.9 230.4±13.7 239.6±16.5*d15 258.0±17.6***226.0±13.2240.1±16.3*240.3±8.0**241.0±7.8**242.0±8.5**242.1±4.8**240.9±8.0**241.0±10.0*246.6±15.4**d16 264.4±17.4***228.2±15.4245.5±18.0*245.3±10.5**246.8±8.2**252.4±7.0***250.0±3.3***248.9±5.5***248.9±7.7**251.1±14.9**d17 272.3±17.9***230.8±15.1250.9±19.0*251.1±15.5**253.4±15.1**259.1±9.0***257.0±6.4***255.2±8.5***254.8±17.3**259.2±15.7***d18 280.5±18.4***234.9±15.1258.9±14.6**261.1±12.7***264.7±11.7***267.0±8.5***267.4±14.2***267.0±15.5***267.4±17.6***271.0±12.0***

3.2 改善脾腎陽虛證候藥效ED50值

3.2.1 預防實驗 附子水提物對脾腎陽虛模型大鼠的預防作用藥效ED50計算數據見表4（證候積分小于3為有效），附子水提物預防給藥對脾腎陽虛模型大鼠證候積分的影響見圖1。

表4 附子水提物對脾腎陽虛模型大鼠的預防作用藥效ED50計算數據表

由Bliss法計算得回歸方程y＝4.8830+ 4.1912Log（D），半數有效量ED50＝1.0664 g·kg-1，ED5095%的可信限為0.7740～1.3406 g·kg-1，ED5＝0.4320 g·kg-1，ED95＝2.6326 g·kg-1。

圖1 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠證候積分的影響

由圖1可知，預防給藥附子水提物后，脾腎陽虛大鼠證候積分明顯減小，且隨著劑量的增大，效果越顯著。

3.2.2 治療實驗 附子水提物對脾腎陽虛模型大鼠的預防作用藥效ED50計算數據表見表5（證候積分小于3為有效），附子水提物對預防給藥對脾腎陽虛模型大鼠證候積分的影響見圖2。

由Bliss法計算得回歸方程y＝4.9146+ 3.8587Log（D），半數有效量ED50＝1.0523 g·kg-1，ED5095%的可信限＝0.7306～1.3416 g·kg-1，ED5＝0.3943 g·kg-1，ED95＝2.8081 g·kg-1。

表5 附子水提物對脾腎陽虛模型大鼠的治療作用藥效ED50計算數據表

圖2 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠證候積分的影響

由圖2可知，治療給藥附子水提物后，脾腎陽虛證大鼠證候積分明顯降低，且隨著劑量的增大，效果更加顯著。

3.3 對脾腎陽虛證大鼠藥效生化指標的影響 附子水提物對預防給藥和治療給藥對脾腎陽虛模型大鼠血

TSH、IgG、C3指標的影響分別見表6和表7。

表6 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠血清TSH、IgG、C3的影響（±s，n＝10）

表6 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛證大鼠血清TSH、IgG、C3的影響（±s，n＝10）

TSH IgG C3對照組28.2±3.5***12.5±1.3***486.5±20.8組別***模型組18.4±2.2 9.3±1.0 398.8±10.6附子10.8 g·kg-1組25.0±2.5***11.3±1.1***457.9±11.9***附子5.4 g·kg-1組24.1±2.4***11.2±0.9***449.9±9.3***附子2.7 g·kg-1組22.9±1.4***11.0±1.4**441.4±5.9***附子1.91 g·kg-1組22.4±1.0***10.9±1.6*429.3±9.9***附子1.35 g·kg-1組21.3±0.9**10.4±0.8*416.8±20.6*附子0.96 g·kg-1組20.4±0.7*10.4±0.9*412.2±15.9*附子0.68 g·kg-1組19.5±1.0 9.5±1.0 401.3±28.9附子理中丸組26.9±1.8***12.0±1.5***469.0±13.0***

表7 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠血清TSH、IgG、C3的影響（±s，n＝10）

表7 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛證大鼠血清TSH、IgG、C3的影響（±s，n＝10）

TSH IgG C3對照組28.6±3.3***12.7±1.3***490.8±24.1組別***模型組18.8±2.2 9.4±1.0 403.1±9.3附子10.8 g·kg-1組25.5±2.4***11.5±1.1***462.5±12.0***附子5.4 g·kg-1組24.6±2.4***11.4±0.9***454.4±9.5***附子2.7 g·kg-1組23.3±1.2***11.2±1.4**445.7±6.0***附子1.91 g·kg-1組22.8±1.0***11.1±1.6*433.4±10.1***附子1.35 g·kg-1組21.7±0.9**10.6±0.9*420.6±21.0*附子0.96 g·kg-1組20.8±0.7***10.6±0.9*415.9±16.2*附子0.68 g·kg-1組19.9±1.0 9.7±1.0 404.8±29.4附子理中丸組27.4±1.8***12.2±1.5***473.2±14.2***

由表6可知，預防給藥附子水提物后，各組脾腎陽虛大鼠TSH、IgG和C3水平顯著升高，且隨著劑量的增大，其效果越顯著。

由表7可知，治療給藥附子后，各組脾腎陽虛證大鼠TSH、IgG和C3水平顯著升高，且隨著劑量的增大，其效果越顯著。

3.4 對臟體比值的影響

3.4.1 預防實驗 附子預防給藥對脾腎陽虛證大鼠臟體比值的影響見表8、表9。

由表8可知，與模型組相比，預防給藥后，附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠心體比值降低，但只有附子1組有統計學意義；附子各劑量組均未引起脾腎陽虛證大鼠肝體比值和腦體比值的顯著變化。

表8 附子預防給藥對脾腎陽虛證大鼠心、肝和腦體比值（g／100 g）的影響（±s，n＝10）

表8 附子預防給藥對脾腎陽虛證大鼠心、肝和腦體比值（g／100 g）的影響（±s，n＝10）

腦體比值對照組組別心體比值 肝體比值0.411±0.017 4.013±0.136 0.558±0.018模型組0.400±0.017 4.025±0.244 0.542±0.019附子10.8 g·kg-1組0.360±0.027**4.036±0.168 0.549±0.018附子5.4 g·kg-1組0.386±0.021 4.073±0.118 0.549±0.018附子2.7 g·kg-1組0.389±0.020 4.030±0.151 0.548±0.018附子1.91 g·kg-1組0.398±0.024 4.036±0.199 0.546±0.023附子1.35 g·kg-1組0.399±0.022 4.007±0.302 0.548±0.022附子0.96 g·kg-1組0.400±0.031 4.015±0.137 0.544±0.019附子0.68 g·kg-1組0.403±0.016 4.022±0.148 0.547±0.019附子理中丸組0.410±0.016 4.030±0.162 0.553±0.021

表9 附子預防給藥對脾腎陽虛證大鼠脾、腎、腎上腺和胸腺體比值（g／100 g）的影響（±s，n＝10）

表9 附子預防給藥對脾腎陽虛證大鼠脾、腎、腎上腺和胸腺體比值（g／100 g）的影響（±s，n＝10）

組別脾體比值 腎體比值 腎上腺體比值 胸腺體比值對照組0.321±0.017***0.714±0.023***0.019±0.001***0.191±0.002***模型組0.223±0.009 0.637±0.026 0.015±0.000 0.158±0.004附子10.8 g·kg-1組0.289±0.032***0.694±0.043**0.018±0.001***0.190±0.005***附子5.4 g·kg-1組0.266±0.011***0.689±0.028***0.018±0.000***0.189±0.005***附子2.7 g·kg-1組0.252±0.020***0.681±0.037**0.018±0.000***0.186±0.006***附子1.91 g·kg-1組0.243±0.010***0.672±0.035*0.018±0.000***0.187±0.005***附子1.35 g·kg-1組0.240±0.017**0.679±0.045*0.018±0.001***0.180±0.006***附子0.96 g·kg-1組0.238±0.006***0.675±0.044*0.018±0.000***0.179±0.007***附子0.68 g·kg-1組0.235±0.003***0.672±0.030*0.017±0.001***0.177±0.006***附子理中丸組0.314±0.028***0.687±0.022***0.019±0.001***0.189±0.005***

表10 附子治療給藥對脾腎陽虛證大鼠心、肝和腦體比值（g／100g）的影響（±s，n＝10）

表10 附子治療給藥對脾腎陽虛證大鼠心、肝和腦體比值（g／100g）的影響（±s，n＝10）

組別心體比值肝體比值腦體比值對照組0.426±0.013 4.038±0.235 0.531±0.014模型組0.428±0.024 4.068±0.100 0.533±0.025附子10.8 g·kg-1組0.378±0.017***4.057±0.236 0.532±0.019附子5.4 g·kg-1組0.381±0.017***4.083±0.276 0.543±0.028附子2.7 g·kg-1組0.382±0.005***4.087±0.094 0.535±0.021附子1.91 g·kg-1組0.383±0.025***4.073±0.203 0.524±0.023附子1.35 g·kg-1組0.393±0.022**4.066±0.190 0.527±0.030附子0.96 g·kg-1組0.398±0.0235*4.061±0.199 0.523±0.023附子0.68 g·kg-1組0.401±0.023*4.056±0.139 0.524±0.021附子理中丸組0.424±0.017 4.015±0.091 0.536±0.020

由表9可知，與模型組相比，預防給藥后，附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠脾體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠腎體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠腎上腺體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠胸腺體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著。

3.4.2 治療實驗 附子治療給藥對脾腎陽虛證大鼠臟體比值的影響見表10、表11。

表11 附子治療給藥對脾腎陽虛證大鼠脾、腎、腎上腺和胸腺體比值（g／100g）的影響（±s，n＝10）

表11 附子治療給藥對脾腎陽虛證大鼠脾、腎、腎上腺和胸腺體比值（g／100g）的影響（±s，n＝10）

組別脾體比值腎體比值腎上腺體比值胸腺體比值對照組0.329±0.007***0.749±0.012***0.019±0.001***0.191±0.008***模型組0.281±0.025 0.711±0.008 0.017±0.001 0.163±0.006附子10.8 g·kg-1組0.311±0.019**0.732±0.010***0.018±0.001*0.184±0.009***附子5.4 g·kg-1組0.304±0.015*0.727±0.018*0.018±0.001*0.181±0.009***附子2.7 g·kg-1組0.300±0.005*0.724±0.014*0.018±0.001 0.180±0.008***附子1.91 g·kg-1組0.297±0.008 0.722±0.006**0.018±0.001*0.179±0.005***附子1.35 g·kg-1組0.290±0.006 0.722±0.008**0.018±0.001*0.178±0.007***附子0.96 g·kg-1組0.286±0.0034 0.716±0.011 0.018±0.000*0.177±0.004***附子0.68 g·kg-1組0.284±0.009 0.712±0.026 0.018±0.001*0.173±0.008**附子理中丸組0.323±0.009***0.743±0.012***0.018±0.001*0.188±0.009***

由表10可知，與模型組相比，治療給藥后，附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠心體比值顯著性降低，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均未引起脾腎陽虛證大鼠肝體比值和腦體比值的顯著變化。

由表11可知，與模型組相比，治療給藥后，附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠脾體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠腎體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠腎上腺體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著；附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠胸腺體比值顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著。

3.5 對藥效伴隨毒性指標LDH、CTN-I的影響

3.5.1 預防實驗 附子水提物預防給藥對脾腎陽虛大鼠血生化指標LDH、CTN-I的影響見表12。

表12 附子水提物預防脾腎陽虛實驗對大鼠LDH、CTN-I的影響（±s，n＝10）

表12 附子水提物預防脾腎陽虛實驗對大鼠LDH、CTN-I的影響（±s，n＝10）

組別LDH（U·L-1）CTN-I（pg·mL-1）對照組521.6±29.8 272.1±24.6模型組518.5±60.7 285.3±25.1附子10.8 g·kg-1組679.2±69.1***378.1±32.2***附子5.4 g·kg-1組634.1±74.6**375.0±39.7***附子2.7 g·kg-1組607.3±73.0**338.3±27.4***附子1.91 g·kg-1組589.7±73.62*333.0±31.8**附子1.35 g·kg-1組569.3±40.4*317.9±29.8*附子0.96 g·kg-1組526.0±36.9 309.4±14.8*附子0.68 g·kg-1組519.9±80.1 280.3±43.2附子理中丸組523.5±102.7 284.3±69.8

由表12可知，預防給藥后，附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠血LDH、CTN-I顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著。

表13 附子水提物治療脾腎陽虛實驗對大鼠LDH、CTN-I的影響（±s，n＝10）

表13 附子水提物治療脾腎陽虛實驗對大鼠LDH、CTN-I的影響（±s，n＝10）

組別LDH（U·L-1）CTN-I（pg·m L-1）對照組526.4±30.3 276.1±24.8模型組523.9±61.5 289.4±25.3附子10.8 g·kg-1組686.0±69.8***383.0±32.5***附子5.4 g·kg-1組640.4±75.3**380.0±40.1***附子2.7 g·kg-1組613.5±73.7**342.9±27.6***附子1.91 g·kg-1組595.9±74.5*337.5±32.2**附子1.35 g·kg-1組574.9±41.0*322.3±30.2*附子0.96 g·kg-1組531.3±37.3 313.8±15.0*附子0.68 g·kg-1組525.0±80.9 284.3±43.7附子理中丸組528.5±103.6 288.2±70.4

3.5.2 治療實驗 附子水提物治療給藥對脾腎陽虛大鼠血生化指標LDH、CTN-I的影響見表13。

由表13可知，治療給藥后，附子各劑量組均可引起脾腎陽虛大鼠血LDH、CTN-I顯著性升高，且隨著劑量的增大，其作用越顯著。

4 結論與討論

本實驗研究發現預防給藥和治療給藥附子水提物后，脾腎陽虛證大鼠的體重增長狀況較模型組顯著加快，癥狀亦得到顯著改善，其脾體比值、腎體比值、腎上腺體比值和胸腺體比值均有所升高，同時血清TSH、IgG和C3的水平亦有所升高，且均呈現一定的劑量依賴性。體重增長加快說明模型組大鼠脾臟的運化水谷功能得到改善，IgG和C3的水平升高則從免疫力方面反映了脾陽虛癥狀的改善，脾體比值的升高和證候積分的降低則進一步說明了模型大鼠的脾陽虛證得到一定的改善；同理，模型大鼠TSH水平的升高提示其甲狀腺功能得到恢復，其腎臟和腎上腺的重量指數的升高亦說明其性腺軸和腎上腺軸水平得到改善，證候積分的降低同樣說明模型大鼠的腎陽虛證得到緩解[5-7]。但是，比較預防給藥和治療給藥的藥效，二者的半數有效量相接近，但預防給藥的ED95則小于治療給藥，說明附子水提物能對大黃致脾腎陽虛證大鼠的預防藥效強于治療藥效。LDH和CTN-I是心臟受到損傷的指標，附子水提物能顯著升高血中LDH和CTN-I的水平，并降低大鼠心體比值，且存在一定的劑量依賴性，說明其發揮藥效的同時伴有一定的心臟毒性，這與附子的臨床不良反應報道相符合[8-9]。綜上所述，附子水提物具有一定溫補脾陽的功效，且預防給藥效果較治療給藥顯著，這可能與藥物發揮藥效時機體的狀態有一定的關系。同時附子水提物對脾腎陽虛大鼠具有一定的心臟毒性，但預防給藥與治療給藥尚未發現統計學意義。

附子上助心陽、中溫脾陽、下補腎陽，為“回陽救逆第一品藥”。由于附子具有回陽救逆、補火助陽之功，故若服用過量或陰虛陽亢者若服用，則會造成陽氣過盛或亡陰證。鑒于此，“辨證論治”思想顯得尤為可貴，“辯證”是為了取得更好的療效，同時也是為了避免毒副作用?！氨孀C論治”也是確保臨床用藥“安全有效”的基本保障，強調的認識中藥時不能孤立地去研究藥物本身的毒性，而是要著眼于藥物與機體的相互關系?！饵S帝內經》“有故無殞”思想為我們提供了相關的理論依據。

“有故無殞，亦無殞也”強調的即為辨證施治：“有是故用是藥”即“有是證用是藥”，實為對中藥藥性與毒性的認識，強調的是中藥“毒-效-證”之間的密切關系，對臨床合理用藥具有一定的指導作用?！叭藚⑷藷o過，大黃救人無功”則是割裂了“毒-效-證”之間的關系，忽略辨證而孤立地評價藥物。附子在不同證候模型上體現的功效與毒性有一定的差異，附子毒性的研究不能離開機體病“證”去孤立地研究藥物的毒性，而應該充分考慮藥物和機體之間的關系，因此附子的功效與毒性應當以中醫理論為指導的前提下放在證候的背景下進行合理評價和科學認知，正確理解毒性、功效和證候及三者之間的關系，合理辨證用藥才能達到減毒增效的效果。

本實驗只考察了附子水提物對脾腎陽虛證大鼠的功效以及心臟毒性作用，其毒性作用機制、作用特點以及附子其他組分的相關作用則尚需進一步研究。

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（2014-01-06收稿 責任編輯：洪志強）

Efficacy-Toxicity-Syndrome Relevancy of Fuzi regarding Its Effect of Warming and Tonifying Spleen Yang

Luan Yongfu1，2，Sun Rong1
（1 Shandong Research Academy of TCM，Shandong Jinan 250014，China；2 Tianjin University of Traditional Chinese Medicine，Tianjin 300073，China）

Objective：To investigate efficacy and toxicity of Fuzi water extract for control and treatment of yang deficiency of spleen and kidney in rats.Methods：Establish rat model of syndrome of yang deficiency of spleen and kidney by administering15%rhubarb powder suspension to rat for 9 days，8.9g·kg-1·d-1everyday and then making it swim in cold water until stressed out.The prevention group was establishing the syndrome model and simultaneously treated with Fuzi.The treatment group was treated after the disease model was established successfully.Treatment duration was 9 days.Syndrome scores and weight were collected，and determined content level of TSH，IgG and cardiac toxicity index C3，LDH，CTn-I.Results：Fuzi water extract could improve the rat model of yang deficiency of spleen and kidney，increase spleen weight，kidney weight，adrenal gland weight and thymus weight to body weight，increase the level of serum TSH，IgG，C3 and LDH，CTn-I，and decrease heart to body weight ratio.Conclusion：Fuzi water extract has preventing and curing effect on syndrome of yang deficiency of spleen and kidney and has certain cardiac toxicity.

Fuzi；Yang deficiency of Spleen and Kidney；Efficacy；Toxicity

R285.5

A

10.3969／j.issn.1673-7202.2014.02.008

國家重點基礎研究發展計劃（973計劃）中醫基礎理論專項資助項目課題2（編號：2009CB522802）

欒永福，男，在讀碩士研究生，中藥藥理學，E-mail：luanyongfu668＠126.com

孫蓉，女，研究員，博士生導師。濟南市燕子山西路7號，250014，電話：（0531）82949843，E-mail：sunrong107＠163.com