前列地爾對兔內皮細胞缺氧復氧損傷后抗栓功能的影響

鄒維生

前列地爾對兔內皮細胞缺氧復氧損傷后抗栓功能的影響

鄒維生

目的探討前列地爾(PGE1)對兔內皮細胞缺氧復氧損傷模型的抗栓功能影響。方法對體外培養、并建立兔內皮細胞缺氧復氧損傷的模型進行分組：模型組、低濃度PGE1組、中濃度PGE1組、高濃度PGE1組、正常組。對以上各組培養上清液中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、細胞內血管假性血友病因子(vWF)的含量或表達等進行測量。結果與正常組比較, 模型組NO含量、SOD活性、vWF表達均有所下降, MDA含量增加, 且差異具有統計學意義(P＜0.05)；而低、中、高濃度PGE1組與模型組比較, 其NO含量、SOD活性、vWF表達均有所增加或增強, MDA含量降低, 且差異具有統計學意義(P＜0.05)。結論PGE1對機體缺氧復氧損傷之后的血管內皮細胞抗栓功能具有積極的保護作用。

前列地爾；內皮細胞；模型；缺氧復氧；抗栓功能

前列地爾(PGE1)具有廣泛的藥理性活作用, 對某些神經-體液因子的表達有積極的調節作用, 從而間接地具有保護內皮的作用［1］。本文通過對體外培養、并建立兔內皮細胞缺氧復氧損傷的模型進行分組研究, 以探討PGE1對內皮細胞抗栓功能的保護作用。現將結果報告如下。

1 材料

1. 1實驗動物 1周齡試驗用大白兔。

1. 2藥品及試劑 前列地爾注射液、膠原酶、胰蛋白酶、SOD、NO試驗劑盒、RPMⅠ164培養液、兔抗人Factor Ⅷ抗體等。

2 實驗方法

2. 1兔內皮細胞培養 無菌環境中, 取急死試驗用兔主動脈, 將其主動脈外膜去除, 并用PBS清洗3次之后加入0.1%Ⅱ型膠原酶；并于37℃條件下, 消化40 min；離心10 min之后棄除上清液；加入RPMⅠ164培養液混勻沉淀細胞。置于37℃條件、5% CO2培養箱中培養, 待用。

2. 2建立缺氧復氧模型 配制模擬缺氧和復氧溶液。將缺氧溶液替換正常培養液3 h, 以達缺氧目的；再將復氧溶液替換缺氧溶液2 h, 達到復氧效果［2］。

2. 3分組實驗 正常組：正常細胞培養；模型組：缺氧復氧操作損傷模型；低濃度組：0.05 μg/ml+缺氧復氧損傷；中濃度組：0.20 μg/ml+缺氧復氧損傷；高濃度組：0.40 μg/ml +缺氧復氧損傷；同時, 將前列地爾加入缺氧復氧液中, 并逐漸調整至以上終濃度。

2. 4統計學方法 本文采用SPSS16.0對文中所有相關數據進行統計分析, 計數資料采用χ2檢驗, P＜0.05表示差異具有統計學意義。

3 結果

與正常組比較, 模型組NO含量、SOD活性、vWF表達均有所下降, MDA含量增加, 且差異具有統計學意義(P＜0.05)；而低、中、高濃度PGE1組與模型組比較, 其NO含量、SOD活性、vWF表達均有所增加或增強, MDA含量降低, 且差異具有統計學意義(P＜0.05)。

4 討論

內皮細胞及其合成物質具有對抗和促進血栓形成的雙重功能。則可以通過對內皮細胞分泌物活性物質來進一步判斷內皮細胞的抗栓功能。國內外諸多文獻均指明：引發內皮細胞結構損傷以及功能障礙主要是由于氧化操作引起的脂質過氧化化產物MDA, 并由MDA的變化進一步判斷內皮細胞損傷的大概原因。與此同時, 作為機體重要的抗氧化酶SOD的活性變化也同樣可以對機體內部抗氧化損傷能力的加以具體反映［3］。

本文通過比較正常組和模型組SOD和MDA水平發現,模型組SOD活動降低明顯, 而MDA水平升高明顯, 從而證明缺氧復氧曾對細胞造成了較為嚴重的氧化損傷。本文又通過將三組不同PGE1濃度組與模型組比較, 其中, SOD活性均升高明顯；而MDA水平均低于模型組。因此, 該對比實驗也說明了PGE1可有效提高內皮細胞清除氧自由基的能力, 從而使緩角、降低內皮細胞脂質過氧化損傷程度, 起到了積極的保護作用。同時, 內皮細胞分泌的重要抗栓因子——NO, 也是反映內皮細胞功能的指標之一。而在文中的實驗結果中, 則可以看出, 與正常組比較, 模型組NO含量下降明顯；而低、中、高濃度PGE1組與模型組比較, 其NO含量均有所增加, 且差異明顯。從而也證明了PGE1可通過積極活化NO, 使其濃度升高, 可有效對抗血栓形成。vWF作為外源性凝血系統的啟動因子, 具有促進血小板聚焦和黏附作用, 也是內皮細胞抗栓功能的重要標志物。本文模型組與正常組比較, vWF表達均有所下降；而低、中、高濃度PGE1組與模型組比較, vWF表達均有所增加；這也明說了vWF具有保護內皮細胞抗栓功能的作用。

因此, PGE1對機體缺氧復氧損傷之后的血管內皮細胞抗栓功能具有積極的保護作用。

［1］ 王少綱.前列地爾脂微球載體治療急性腦梗死臨床療效觀察.中國實用神經疾病雜志, 2010, 13(20):21-22.

［2］ 關欣, 李應東.細胞缺氧復氧模型建立方法的研究進展.醫學綜述, 2008, 14(18):2737-2739.

［3］ Fang W, LT H, Zhou L. Protective effects of prostanglandin E1 on human umbilical vein endothelial cell in jury induced by hydrogen peroxide.Acta Phamacol Sin, 2010, 31(4):485-492.

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