雞冠花的化學成分研究

張洪財，張婷婷，杜 冰，陳大忠*，李智剛

(1.黑龍江中醫藥大學中醫藥研究院，黑龍江哈爾濱 150040;2.牡丹江醫學院紅旗醫院普外科，黑龍江牡丹江 157011)

雞冠花Celosia cristata L.又名雞髻花、老來紅、雞公花，為莧科Amaranthaceae青葙屬一年生草本，原產于美洲熱帶、印度和非洲［1］。現我國已有大面積的種植［2］。雞冠花花序入藥首載于《滇南本草》，味甘，性涼，入肝、大腸經，具有收斂止血，止帶止痢之功效［3］。其活性成分主要有黃酮類、皂苷等化合物［4-5］，具有調節免疫、促進骨骼發育、抗陰道毛滴蟲、止血、抗衰老及保肝等作用［6-10］。有關雞冠花化學成分研究的報道較少，有文獻報道雞冠花種子中分離得到三萜皂苷類成分［5-6］。

為明確雞冠花的藥用價值，進一步弄清該植物的生理活性部位及其活性成分物質基礎，對雞冠花花序的化學成分進行研究，以期為雞冠花的開發利用提供科學依據。

1 材料和方法

1.1 材料 雞冠花采摘自黑龍江中醫藥大學藥用植物園，并經黑龍江中醫藥大學藥學院生藥學教研室孫慧峰教授鑒定為莧科青葙屬植物雞冠花Celosia cristata L.。標本(20110912)保存于黑龍江中醫藥大學中醫藥研究院。

1.2 儀器 Bruker-400超導核磁共振光譜儀(美國Bruker公司)，Agilent 1100制備型HPLC(美國Agilent公司，G1361A型泵，G1315B型UV-vis檢測器)，Agilent 1100 Series LC ChemStation工作站，C18反相色譜柱(ZORBAX SB-C18，9.4 mm×25 cm，5μm);FTIR7600型傅立葉紅外光譜儀(天津天光光學儀器有限公司);柱色譜用硅膠(青島海洋化工廠，140～200、200～300目);薄層色譜用硅膠板(Silica gel60 F254)和TLC Silica gel60 Rp-18 F254s(Rp-18)為德國Merck公司產品;柱色譜用反相ODS(ODS-AM)為日本YMC公司產品;甲醇、乙醇、石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇等試劑均為分析純。

2 提取和分離

雞冠花花序10 kg，剪成小塊，以60%乙醇室溫浸泡后加熱回流提取3次，每次3 h。合并提取液，減壓回收溶劑后用蒸餾水混懸，依次用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯和正丁醇萃取至無色，各萃取液分別回收溶劑。

正丁醇部位(230 g)以適量的水溶解，AB-8大孔樹脂吸附，依次用水、30%乙醇、50%乙醇和95%乙醇梯度洗脫，得到的各洗脫液分別減壓濃縮干燥。得30%乙醇部分37.5 g。

雞冠花正丁醇提取部位的30%乙醇部分(37.5 g)經硅膠柱層析，二氯甲烷-甲醇(20∶1～1∶1)梯度洗脫，得到6個組份(F1～F6)。F2部分(1.2 g)經ODS硅膠柱層析分離，得到化合物3(4.7 mg)。F3部分(1.5 g)經正相硅膠柱層析，結合甲醇重結晶得到化合物2(4.3 mg)。F4(6.8 g)部分經ODS柱層析結合HPLC(制備型)分離得到化合物1(5.0 mg)、化合物4(8 mg)。F5(8.7 g)經ODS柱層析和HPLC(制備型)分離得到化合物5(12 mg)、化合物6(85.0 mg)、化合物7(7.2 mg)。

3 結構鑒定

化合物1:白色無定形粉末，易溶于甲醇。HR-ESI-MS m/z 461.1589［M+H］+，分子式C20H28O12，計算不飽和度為7。1H-NMR(CD3OD)δ:6.22(1H，d，J=2.3 Hz，H-3)，6.16(1H，d，J=2.3 Hz，H-5)，5.44(1H，d，J=1.5 Hz，H-1″)，5.05(1H，d，J=7.3 Hz，H-1')，4.04(2H，d，J=9.5 Hz，H-4″)，3.92(1H，d，J=1.5 Hz，H-2″)，3.90(3H，s，6-OCH3)，3.79(2H，d，J=9.5 Hz，H-4″)，3.61(2H，dd，J=14.0，6.0 Hz，H-6')，3.50(2H，s，H-5″)，2.58(3H，s，-CH3)。13C-NMR(CD3OD)δ:204.9(C=O)，167.7(C-2)，165.4(C-4)，164.7(C-6)，107.8(C-1)，97.7(C-3)，92.8(C-5)，56.4(6-OCH3)，33.2(8-CH3)，100.1(C-1')，78.1(C-2')，78.4(C-3')，71.4(C-4')，78.5(C-5')，62.5(C-6')，110.1(C-1″)，78.5(C-2″)，80.8(C-3″)，75.5(C-4″)，66.0(C-5″)。以上數據與文獻［11］報道的數據一致，故鑒定為4-O-β-D-芹糖-(1→2)-β-D-葡萄糖-2-羥基-6 甲氧基苯乙酮 ［4-O-β-D-apifuranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranosyl-2-hydroxy-6-methoxy-acetophenone］。

化合物2:無色顆粒狀結晶，易溶于甲醇。HR-ESI-MS m/z 327.1009［M+H］+，分子式C15H18O8，計算不飽和度為7。1H-NMR(CD3OD)δ:7.63(1H，d，J=15.9 Hz，H-7)，7.39(2H，d，J=8.6 Hz，H-2，6)，6.72(2H，d，J=8.6 Hz，H-3，5)，6.27(1H，d，J=15.9 Hz，H-8)，5.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-1')，3.75(1H，dd，J=11.9 Hz，1.6 Hz，H-6'a)，3.59(1H，dd，J=12.04.5 Hz，H-6'b)。13C-NMR(400 MHz，CD3OD)δ:167.7(C=O)，161.6(C-4)，148.0(C-7)，131.4(C-2，6)，127.0(C-1)，116.9(C-3，5)，114.5(C-8)，95.8(C-1')，78.8(C-3')，78.0(C-5')，74.1(C-2')，71.1(C-4')，62.4(C-6')。以上數據與文獻［12］報道基本一致，故鑒定為對羥基苯丙烯酸葡萄糖酯(p-coumaric acid glucoside)。

化合物3:白色針狀結晶，易溶于甲醇。HRESI-MS m/z 373.1426［M+H］+，分子式 C17H24O9，計算不飽和度為6。1H-NMR(CD3OD)δ:6.75(2H，m，H-3，5)，6.50(1H，d，J=15.8 Hz，H-7)，6.33(1H，dt，J=15.8，5.6 Hz，H-8)，4.22(2H，dd，J=1.4，5.6 Hz，H-8)，3.85(6H，s，OCH3-2，6)，3.78(1H，dd，J=12.0，2.4 Hz，H-6'a)，3.67(1H，dd，J=12.0，5.2 Hz，H-6'b)。13C-NMR(CD3OD)δ:154.4(C-2，6)，135.9(C-1)，135.3(C-4)，131.3(C-8)，130.0(C-7)，105.4(C-3，5)，105.3(C-1')，78.4(C-3')，77.8(C-5')，75.7(C-2')，71.3(C-4')，64.4(C-9)，63.6(C-6')，57.0(2×-OCH3)，以上數據與文獻［13］報道的紫丁香苷(syringin)的數據一致。

化合物4:無色粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMS m/z 443.1847［M+H］+，分子式 C21H30O10，計算不飽和度為 7。1H-NMR(CD3OD)δ:7.07(1H，d，J=8.2 Hz，H-6)，6.82(1H，d，J=1.8 Hz，H-3)，6.74(1H，dd，J=8.2，1.8 Hz，H-5)，5.96(1H，ddt，J=16.9，10，2.0 Hz，H-8)，5.08(1H，dd，J=16.9，2.0 Hz，H-9b)，5.04(1H，dd，J=10，2.0 Hz，H-9a)，4.96(2H，dd，J=2.4，9.4 Hz，H-7)，4.95(1H，d，J=2.4 Hz，H-1″)，4.79(1H，d，J=7.2 Hz，H-1')，3.99(1H，dd，J=1.5，11.0 Hz，H-6')，3.73(1H，d，J=9.6 Hz，H-4″a)，3.94(1H，d，J=9.6 Hz，H-4″b)，3.88(1H，d，J=2.4 Hz，H-2″)，3.84(3H，s， OCH3)， 3.56(2H， s， H-5″)。13C-NMR(CD3OD)δ:150.8(C-2)，146.3(C-1)，139.0(C-8)，136.5(C-4)，122.2(C-5)，118.4(C-3)，115.9(C-9)，114.1(C-6)，111.0(C-1″)，103.1(C-1')，80.5(C-3″)，78.0(C-3')，77.8(C-5')，77.0(C-2″)，75.0(C-4″)，74.9(C-2')，71.6(C-4')，68.7(C-6')，65.6(C-5″)，56.7(OCH3-2)，40.8(C-7)。以上數據與文獻［14］報道的數據一致，故鑒定為丁香酚-O-β-芹糖-(1→6)-O-β-葡萄糖苷 ［eugenyl-O-β-apiofuranosyl-(1→6)-O-βglucopyranoside］。

化合物5:無定形粉末，易溶于甲醇。HR-ESIMS m/z 231.1062 ［M+H］+，分子式C13H14N2O2，計算不飽和度為 8。1H-NMR(CD3OD)δ:1.73(3H，d，J=6.7 Hz，H-10)，3.01(1H，dd，J=16.0，12.0 Hz，H-4a)，3.43(1H，dd，J=16.0，5 Hz，H-4b)，3.95(1H，dd，J=12.0，5 Hz，H-3)，4.69(1H，q，J=6.6 Hz，H-1)，7.03(1H，t，J=7.4 Hz，H-6)，7.13(1H，t，J=7.4 Hz，H-7)，7.33(1H，d，J=7.8 Hz，H-8)，7.47(1H，d，J=7.8 Hz，H-5)。13C-NMR(CD3OD)δ:51.1(C-1)，59.8(C-3)，24.4(C-4)，107.9(C-4a)，127.5(C-4b)，119.2(C-5)，120.5(C-6)，123.3(C-7)，112.3(C-8)，138.6(C-8a)，131.4(C-9a)，17.2(C-10)，173.7(C-11)。以上數據與文獻［15］報道的基本一致，故鑒定為(1S，3S)-1-甲基-1，2，3，4-四氫化-β-咔啉-3-甲酸 ［(1S，3S)-1-Methyl-1，2，3，4-tetrahydro-β-carboline-3-carboxylic acid］。

化合物6:黃色晶體，易溶于甲醇、二甲基亞砜。HR-ESI-MS m/z 757.2121［M+H］+，分子式C33H40O20，計算不飽和度為14。1H-NMR(DMSO-d6)δ:8.03(2H，d，J=8.8 Hz，H-2'，6')，6.89(2H，d，J=8.8 Hz，H-3'，5')，6.40(1H，brs，H-8)，6.18(1H，brs，H-6)，5.65(1H，d，J=7.0 Hz，H-1″)，4.28(1H，d，J=7.8 Hz，H-1?)，3.69(2H，dd，J=9.4，2.7 Hz，H-6?)，3.58(2H，t，J=11.6 Hz，H-6″)，0.85(3H，d，J=6.1 Hz，H-6″″)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:177.1(C-4)，165.3(C-7)，161.1(C-5)，159.9(C-4')，156.4(C-2)，156.0(C-9)，132.5(C-3)，130.7(C-2'，6')，120.8(C-1')，115.1(C-3'，5')，104.9(C-1?)，103.5(C-10)，100.5(C-1″″)，99.0(C-6)，98.1(C-1″)，93.8(C-8)，83.0(C-2″)，77.4(C-5″)，77.1(C-3?)，76.9(C-3″)，76.5(C-5?)，74.4(C-2?)，72.4(C-4″″)，70.4(C-2″″)，70.1(C-3″″)，69.7(C-4″)，66.7(C-4?)，63.0(C-5″″)，62.7(C-6?)，60.9(C-6″)，17(C-6″″)。以上數據與文獻［16］報道的基本一致，故鑒定為山柰酚-3-O-α-L-鼠里糖-(1→6)-β-D-葡萄糖-(1→2)-β-D-葡萄糖苷 ［kaempferol 3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranosyl-(1→2)-β-D-glucopyranoside］。

化合物7:黃色晶體，易溶于甲醇、二甲基亞砜。HR-ESI-MS m/z 771.2277［M+H］+，分子式C34H42O20，計算不飽和度為14。1H-NMR(DMSO-d6)δ:7.94(1H，d，J=2.0 Hz，H-2')，7.49(1H，dd，J=8.4，2.0 Hz，H-6')，6.91(1H，d，J=8.4 Hz，H-5')，6.41(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.18(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.75(2H，d，J=7.4 Hz，H-1″，H-1″″)，4.24(1H，d，J=7.0 Hz，H-1?)，3.86(3H，s，OCH3)，3.58(1H，m，H-6″a，)，3.55(1H，m，H-6″b)，3.39(1H，m，H-6?)，0.74(3H，d，J=6.2 Hz，H-6″″)。13C-NMR(DMSO-d6)δ:177.1(C-4)，164.8(C-7)，161.1(C-5)，149.3(C-4')，146.8(C-3')，132.4(C-3)，121.4(C-6')，120.4(C-1')，115.2(C-5')，113.4(C-2')，105.0(C-10)，103.7(C-1?)，100.7(C-1″″)，98.9(C-6)，98.1(C-1″)，93.8(C-8)，78.0(C-2″)，77.4(C-5″″)，76.9(C-5?)，76.8(C-3?)，76.5(C-5″)，69.9(C-4?)，69.7(C-4″″)，76.9(C-3″″)，66.6(C-4″)，62.7(C-6″″)，60.9(C-6?)，60.4(C-6″)，55.6(OCH3)。以上數據與文獻［17］報道的基本一致，故鑒定為異鼠李素-3-O-(2-O-β-D-葡萄糖)-β-D-半乳糖-7-O-β-D-葡萄糖苷 ［isorhamnetin 3-O-(2-O-β-D-glucopyranosyl)-β-D-galactopyranoside-7-O-β-D-glucopyra noside］。

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