3種血清學檢測方法在梅毒各期應用的特點分析

劉 鵬

（焦作市第二人民醫院檢驗科，河南 焦作 454100）

3種血清學檢測方法在梅毒各期應用的特點分析

劉 鵬

（焦作市第二人民醫院檢驗科，河南 焦作 454100）

目的 研究分析3種檢測方法在梅毒各期應用的特點。方法 采用TP-ELISA（梅毒螺旋體酶聯免疫吸附法）、TRUST（甲苯胺紅不加熱血清凝集實驗）和TPPA（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗）檢測368例各期梅毒患者的血清。結果 其中69例一期梅毒患者中：TPELISA方法陽性率96%，TRUST陽性率83%，TPPA陽性率91%；156例二期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率94%，TPPA陽性率98%；63例三期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率20%，TPPA陽性率100%。結論 在梅毒各期血清學檢測中，應該同時檢測特異性抗體（TP-ELISA）和非特異性抗體（TRUST），并用TPPA做確診實驗。

梅毒；梅毒螺旋體酶聯免疫吸附法；甲苯胺紅不加熱血清凝集實驗；梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗；梅毒各期

梅毒的發病機制主要是由梅毒螺旋體侵犯組織器官后而引起的一種慢性的、系統性的性傳播傳染病，患者在受到梅毒螺旋體感染后，體內血清中可產生梅毒非特異性抗體和梅毒螺旋體抗原的特異抗體。隨著社會的發展和環境的改變，梅毒的感染者持續增多。而針對梅毒的檢測也成為各個醫院檢驗科的重要項目。目前，我院檢驗科對于梅毒檢測的常用方法主要是：TP-ELISA（梅毒螺旋體酶聯免疫吸附法）、TRUST（甲苯胺紅不加熱血清凝集實驗）和TPPA（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗）。3種檢測方法在臨床應用上都有其不同的價值，而在梅毒各期的檢測中有其相關性，也有其特殊性。對于檢測方法的合理選用和避免臨床誤診、漏診非常重要的。為此，我院對2013年1月至2014年3月間住院和門診368例各期梅毒患者的血清使用TPELISA、TRUST和TPPA進行了分析。現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：收集我院2013年1月至2014年3月間住院以及門診梅毒患者288例，經院皮膚性病科診斷確定：一期梅毒患者69例，二期梅毒患者156例，三期梅毒患者63例。

1.2 方法：采集梅毒患者血清3 mL離心分離后保存使用。使用TPELISA（上海科華）、TRUST（北京萬泰）和TPPA（日本富士瑞）試劑，嚴格按照試劑說明書操作。

2 結 果

使用TP-ELISA、TRUST和TPPA三種實驗方法檢測288例梅毒患者。其中69例一期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性66例，TRUST陽性57例，TPPA陽性63例；156例二期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性156例，TRUST陽性147例，TPPA陽性153例；63例三期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性63例，TRUST陽性13例，TPPA陽性63例。

3 討 論

梅毒是性傳染疾病，是由于梅毒螺旋體感染人體后所產生的，人體感染梅毒螺旋體后可以產生特異性抗螺旋體抗體和非特異性抗類脂質抗體[1]。目前，臨床上把梅毒患者按照病程通常劃分為三期：一期梅毒。即硬下疳，潛伏期2～4周，外生殖器部位發生暗紅色硬腫塊、淺潰瘍，有軟骨樣硬度，周圍淋巴結腫大；二期梅毒為梅毒的泛發期，自硬下疳消失至二期梅毒疹出現前的時期。二期梅毒一般發生在硬下疳消退后3～4周，相當于感染后9～12周。二期梅毒是梅毒螺旋體經淋巴結進入血行引起全身廣泛性損害。除引起皮膚損害外，尚可侵犯內臟及神經系統；三期梅毒，發生在感染后2～3年乃至10年，皮膚為樹膠樣腫，還可涉及骨、關節、心、血管，表現為主動脈炎、主動脈瓣閉鎖不全和主動脈瘤等，侵及神經為脊髓癆，全身麻痹（麻痹性癡呆）。先天梅毒有早期先天梅毒，相當于后天二期，但較重。晚期先天梅毒與后天相似，但很少發生心、血管及神經病變。主要為實質性角膜炎、神經性耳聾、哈欽森氏齒（上門齒中央切痕，下小上大，寬厚相等）、佩刀形脛骨等。

人體在被梅毒感染后，在長期病程中， 由于機體的抵抗力和反應性的改變，癥狀時而顯發，時而隱伏[2]。皮膚損害在梅毒活動期中癥狀十分明顯，再結合血清學測定，對于臨床診斷有很大作用。而在梅毒潛伏期中，臨床診斷往往是依靠血清學的檢測。在梅毒各期的檢測中，特異性抗體和非特異性抗體都有重要的意義。在本次試驗中，TPELISA和TPPA都屬于特異性抗體檢測，TRUST是非特異性抗體檢測。

本次試驗使用3種方法檢測288例梅毒患者的標本，其中69例一期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率96%，TRUST陽性率83%，TPPA陽性率91%；156例二期梅毒患者中：TP-ELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率94%，TPPA陽性率98%；63例三期梅毒患者中：TPELISA方法陽性率100%，TRUST陽性率20%，TPPA陽性率100%。

TP-ELISA法是針對對梅毒患者體內梅毒螺旋體抗體的特異性試驗，在實驗室應用中對各期梅毒患者均有比較高的敏感性和特異性。由于患者被梅毒螺旋體抗體感染后，即使經抗梅毒治療后，此抗體仍然會被檢出，甚至機體會終身攜帶。所以，很多處于潛伏期無癥狀的患者，TRUST無法檢出，TP-ELISA法卻可以檢出。因此，很多醫院將此方法作為入院患者的梅毒檢測的首選檢測方法。且方法操作簡便，適用于實驗室大批量標本檢測及全自動酶免疫系統的開展。另外，TPELISA法再與TPPA確證實驗方法相比較，靈敏度與特異性上均無顯著差異性。而與TRUST法相比較，則靈敏度要明顯高于。在對I期梅毒和治療后的梅毒患者檢測中，TP-ELISA法均有顯著的檢出率，在避免梅毒血液傳播風險上有重要意義。因此，無論是在梅毒患者篩選，還是梅毒分期檢測中，TP-ELISA法均是實驗室必備的檢測方法。

TRUST法為梅毒非特異性抗體試驗，梅毒非特異性并非梅毒螺旋體所直接產生的抗體，而是人體組織在被梅毒螺旋體所破壞的過程中，間接引起而產生的具有抗體性質的反應素，梅毒非特異性抗體并非終身攜帶的。患者被梅毒螺旋體感染后，硬下疳出現2～4周后，非特異性抗體才能被檢出。所以，非特異性抗體出現要晚于特異性抗體。在梅毒各期，三期梅毒和治療后梅毒患者中，非特異性抗體陰性率較高。本次試驗中，三期梅毒患者的TRUST陽性率只有20%。而一期梅毒陽性率83%，二期梅毒陽性率94%，符合有關報道[3]。另外，由于一些病癥可能導致TRUST假陽性。所以，患者TRUST單獨陽性不一定是被梅毒螺旋體所感染，需要與其他檢測方法相結合才能判定。

TPPA法（梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗），TPPA是在凝膠顆粒上包被經過純化處理的梅毒特異性抗原。在實驗過程中，標本血清中的抗體與凝膠顆粒上的特異性抗原發生特異性反應時，凝膠顆粒就會出現凝集現象。而且抗體的濃度與其成正相關。由于此抗體在血清中長期存在，不易轉陰，也不會隨著病程變化及治療效果而改變，可終身保留。因此特異性強、敏感性高是TPPA最重要的特點，目前國內各實驗室將TPPA法作為梅毒確證實驗。但是由于該方法操作繁瑣，試劑多為進口，價格昂貴，結果判斷需要進行系列稀釋，因此難以自動化、批量化，無法應用于大批標本的檢測。

通過此次試驗表明，少數一期梅毒患者由于感染梅毒螺旋體的時間較短，抗體還沒產生或產生抗體的濃度較低。在進行血清學檢查時，可能會為陰性。另外，在實驗中，梅毒非特異性抗體在二期的陽性率明顯要高于一期，而三期的陽性率最低。原因可能是和梅毒各期活動水平差異有關。而在梅毒各期中無論是使用TP-ELISA法或是TRUST法檢測，均會受到患者體內一些疾病干擾因素而導致假陽性。因此最好使用TPPA法做進一步確診。

綜上所述，通過此次實驗分析表明，在梅毒血清學檢測中，應該同時檢測特異性抗體（TP-ELISA）和非特異性抗體（TRUST），并用TPPA做確診實驗。才能避免誤診和漏診，為臨床診斷和治療提供及時、可靠地依據。

[1] 陳剛.梅毒血清學試驗中特異性抗體與非特異性抗體檢測的臨床應用[J].臨床和實驗醫學雜志,2008,7(2):59-63.

[2] 宋芳吉.性病圍譜[M].沈陽:遼寧科學技術出版社,1989.

[3] 郭秀筠,鄭治修,謝文峰,等.酶聯免疫吸附法檢測梅毒特異性球蛋白C[J].中華醫學檢驗雜志,1999,22(3):178.

R759.1

B

1671-8194（2014）36-0165-02

10.15912/j.cnki.gocm.2014.36.127