CYP3A5*3多態性與髓系白血病風險關系的Meta分析

劉洪超 馬利敏 周 茹 阮林海

髓系白血病(myeloid leukemia，ML)是以髓系造血細胞異常增殖、分化障礙、凋亡受阻為特征的惡性克隆性疾病，是成人白血病中最常見的類型，其普遍存在獲得性遺傳學改變，在臨床及遺傳學上均表現高度異質性［1］。白血病的病因及發病機制至今尚未完全清楚，目前認為其發生是外界環境因素與內在遺傳因素相互作用的結果。研究發現部分患者在分子遺傳學水平存在異質性，包括基因突變、基因表達譜異常、DNA甲基化等，存在一定的遺傳易感性，而機體內代謝酶系統的差異則是影響白血病易感性的重要基礎之一［2，3］。

細胞色素P450酶系(cytochrome P450，CYPs)是自然界中含量最豐富、分布最廣泛、底物譜最廣的代謝酶系統。CYPs中含量最豐富的是CYP3A亞家族，參與約60%的處方藥、環境前致癌物、類固醇激素等的代謝。它主要包括4種成員:CYP3A4、CYP3A5、CYP3A7和CYP3A43，它們串聯排列于染色體7q22．1上約231kb的基因座內［4］。CYP3A5基因在10% ～97%的人群中表達，其表達及活性存在廣泛的個體間、種族間差異，被認為是個體間CYP3A代謝活性差異的最主要因素［5～7］，而 CYP3A5活性的差異主要是由單核苷酸多態性(single nucleotide polymorphism，SNP)所致，其中位于第3號內含子的6986密碼子 A＞G(CYP3A5*3)是決定人群CYP3A5表達與活性的最主要因素，CYP3A5*3突變引起mRNA剪接發生改變，終止密碼子提前，蛋白質截短，導致CYP3A5酶活性降低或缺乏［7～9］。國內外已有較多探索CYP3A5*3多態性與髓系白血病發生風險關系的研究，但各研究結果存在一定爭議。本研究采用Meta分析定量綜合評估CYP3A5*3多態性與髓系白血病易感性的關系，為髓系白血病的早期診斷提供循證醫學依據。

資料與方法

1．檢索文獻:全面檢索PubMed、中國生物醫學文獻數據庫(CBM)、中文期刊全文數據庫(CNKI)和萬方數據庫，獲取探索CYP3A5*3多態性與髓系白血病發生風險關系的文獻。檢索使用的中文關鍵詞包括:CYP3A5基因，基因多態性，白血病;英文檢索詞包括:Cytochrome P4503A5 or CYP3A5，polymorphism or variant，myeloid or myelogenous，leukemia。檢索時間截止2013年9月20日，檢索語種不限。各納入文獻有用的參考文獻亦作為本研究入選文獻。病例報道、評論、綜述、系統評價類文獻不作為納入文獻。

2．文獻納入標準:納入Meta分析的文獻均符合以下標準:①原始資料為已公開發表的文獻;②病例—對照研究方法;③病例組診斷明確，符合ML診斷標準;④病例組和對照組各基因型例數表達明確。兩位研究者獨立評價納入文獻質量，并提取文獻基本資料，包括第一作者、出版年份、基因分型方法、樣本量、病例組與對照組各基因型分布情況。如有爭議則共同復查原文后協商決定。

3．統計學方法:本研究以CYP3A5*1/*1基因型頻率為參考，以病例組和對照組CYP3A5*3基因型分布的OR值為效應指標，對各納入研究的原始數據進行合并分析。Q檢驗評估納入研究間的異質性，檢驗水準α=0．05，如各研究間無顯著異質性(P＞0．05)則采用固定效應模型;如存在顯著異質性(P＜0．05)則采用隨機效應模型合并數據。漏斗圖評估發表性偏倚。應用RevMan 5．2軟件進行上述統計分析。

結 果

1．納入文獻的基本情況:經過文獻檢索和嚴格篩選，最終共納入5個病例對照研究，包括ML患者929例，對照1080例。5個研究均以亞洲人群為研究對象，均采用 PCR-RFLP 基因分型方法［10～14］。Rao等［13］和 Sailaja 等［14］研究中對照組 CYP3A5*3 基因型分布不符合Hardy-Weinberg平衡。各納入文獻基本特征和原始數據見表1。

表1 納入Meta分析文獻的基本特征

2．CYP3A5*1/*3基因型與ML關系:異質性檢驗結果P＜0．0001，表明納入研究間存在顯著異質性，采用隨機效應模型合并數據，合并OR及95%CI為1．45(0．91 ～ 2．32)。Z=1．54，P=0．120，表明CYP3A5*1/*3基因型與ML發生無關(圖1)。

圖1 CYP3A5*1/*3基因型與ML關系分析

3．CYP3A5*3/*3基因型與ML關系:異質性檢驗結果P＜0．00001，說明納入研究間存在顯著異質性，采用隨機效應模型合并數據，合并OR及95%CI為1．60(0．89 ～ 2．85)，Z=1．58，P=0．11，表明CYP3A5*3/*3基因型與ML發生無關(圖2)。

4．CYP3A5(*1/*3+*3/*3)基因型與 ML關系:異質性檢驗結果P＜0．00001，采用隨機效應模型合并數據，合并 OR及 95%CI為 2．69(0．86～8．38)，Z=1．71，P=0．09，表明 CYP3A5(*1/*3+*3/*3)基因型與ML發生無關(圖3)。

圖3 CYP3A5(*1/*3+*3/*3)基因型與ML關系分析

5．發表性偏倚與敏感度分析:RevMan5．2軟件分析漏斗圖中各點分布基本對稱，表明不存在顯著發表性偏倚(漏斗圖結果未示)。在敏感度分析過程，通過刪除 Rao等［13］和 Sailaja等［14］研究，依據異質性檢驗結果重新合并分析，結果顯示與刪除之前一致，說明目前所得結果是穩定的(敏感度分析結果未示)。

討 論

CYP3A亞家族是機體內底物譜最廣、含量最多的Ⅰ相代謝酶，亦是藥物代謝反應中最主要的限速酶。CYP3A5是CYP3A亞家族中主要的肝外分布形式，如在腸壁、腎、前列腺和肺組織中表達。CYP3A5基因位于人類第 7號染色體 q21．1，基因全長31．8kb，含有13個外顯子，編碼蛋白含502個氨基酸［4］。CYP3A5基因的表達與活性具有高度多態性，存在廣泛的個體及種族間差異，提示CYP3A5基因的遺傳變化可能是CYP3A介導的藥物代謝及反應中出現個人、種族間差異最重要原因。CYP3A5*3多態性是指在第3號內含子6986位點出現A＞G突變，從而出現1個隱含的受體剪接位點，該位點促使基因內假外顯子序列插入成熟mRNA，隨后外顯子缺失和(或)其他基因內序列插入，這些異常剪接導致終止密碼子提前出現［8］。變異型CYP3A5*3 mRNA不穩定而迅速降解，CYP3A5酶活性降低或缺乏，因此CYP3A5*3多態性可能與人類腫瘤的發生相關。

國內外已有較多探索CYP3A5*3多態性與髓系白血病發生風險關系的研究，但各研究結果存在一定差異。Meta分析通過增大樣本含量，提高了檢驗效能和效應量估計精度，定量綜合不一致的研究結果，得出更全面、更可靠的結論。本研究最終共納入5篇文獻包括ML患者929例，對照1080例。異質性檢驗結果表明納入研究間存在顯著異質性，采用隨機效應模型合并數據。目前的 Meta分析結果顯示，CYP3A5 基因*1/*3、*3/*3、(*1/*3+*3/*3)的合并 OR 及 95%CI分別為 1．45(0．91 ～2．32)、1．60(0．89 ～2．85)和2．69(0．86 ～8．38)，對應 P 值分別為0．12、0．11 和 0．09，表明 CYP3A5*3 多態性與髓系白血病發生風險無顯著關聯。

總之，本研究表明CYP3A5*3多態性與髓系白血病發生風險無相關性，且漏斗圖未檢測出顯著性發表性偏倚，敏感度分析結果說明目前的結論是可靠的。需要指出的是，本研究納入文獻較少，在Meta分析過程中可能存在混雜因素等，會在一定程度上影響Meta分析結果。因此將來需要開展大樣本量、多中心、設計良好的臨床研究，及時全面收集最新研究資料，定期更新系統評價。

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