HPLC法測定芩斛利咽合劑中芍藥苷的含量

陳 靜

（河南省商丘市第一人民醫院藥劑科，商丘476000）

HPLC法測定芩斛利咽合劑中芍藥苷的含量

陳 靜

（河南省商丘市第一人民醫院藥劑科，商丘476000）

目的 建立HPLC法測定芩斛利咽合劑中芍藥苷含量的方法。方法 采用Eclipse XDB-C18色譜柱，乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86）為流動相；流速1.0ml·min-1；檢測波長230nm。結果 芍藥苷在0.5165～2.066μg范圍內線性關系良好（r＝0.9995），平均回收率為97.98%，RSD＝1.01%（n＝6）。結論 本方法操作簡便，專屬性強，結果準確，可用于芩斛利咽合劑的質量控制。

芍藥苷；高效液相色譜法；含量測定

芩斛利咽合劑是由黃芩、石斛、赤芍、木蝴蝶、麥冬、地黃等藥材加工制成的醫院制劑，具有清熱解毒，化痰利咽之功效，主治急慢性咽炎。［1］現行質量標準中未收載含量測定項目，不能有效的控制藥品質量。赤芍為方中主藥，芍藥苷是赤芍的主要有效成分［2］，本文以芍藥苷為指標成分，建立了芩斛利咽合劑中芍藥苷的高效液相測定法，為該制劑的質量控制提供了客觀的含量評價方法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 Agilent 1260型高效液相色譜儀，AUW-220D電子分析天平，5210DT超聲處理器。

1.2 試藥 芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110736-200934）；乙腈為色譜純，水為重蒸餾水，其余試劑為分析純。芩斛利咽合劑（由柘城縣人民醫院提供，批號：130219、130416、130711）。

2 方法與結果

2.1 色譜條件 色譜柱：Eclipse XDB-C18色譜柱（4.6 ×150mm）。

流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液（14：86）為流動相［3］；流速1.0ml·min-1；檢測波長230nm；進樣量20μl；理論板數應不低于2000。

2.2 線性關系考察 取芍藥苷對照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻。按照“2.1”項色譜條件，分別進樣5、8、10、12、15、20μl，記錄芍藥苷峰面積值，以峰面積積分值（Y）對對照品濃度（X）進行線性回歸，得回歸方程：Y＝285.34X＋106.33r＝0.9995。結果表明，芍藥苷對照品濃度在0.5165～2.066μg范圍內與峰面積值呈良好的線性關系。

2.3 對照品溶液的制備 取芍藥苷對照品約10mg，精密稱定，置100ml棕色量瓶中，加甲醇適量，振搖使完全溶解后，稀釋至刻度，搖勻，作為對照品儲備液。精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

2.4 供試品溶液及陰性對照溶液的制備 精密量取本品約2ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇35ml，超聲處理30分鐘，放冷，加稀乙醇至刻度，搖勻，濾過，取續濾液，作為供試品溶液。另取缺赤芍的其他味藥按處方工藝制成陰性制劑，按上述方法制備陰性對照溶液。

2.5 干擾試驗 取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各20μl，按照“2.1”項色譜條件，分別進樣測定，記錄色譜圖，結果見圖1。

圖1 高效液相色譜圖1、芍藥苷

2.6 精密度試驗 取同一對照品溶液，重復進樣5次，每次10μl，記錄峰面積，RSD＝0.89%（n＝5），表明精密度良好。

2.7 穩定性試驗 取同一對照品溶液，分別在0、1、2、3、4、5、6h進樣測定，RSD＝0.95%，供試品溶液在6小時內峰面積基本穩定。

2.8 加樣回收率試驗 精密量取6份已知含量為1.163mg／ml的樣品1.0ml，置50ml量瓶中，分別精密加入濃度為0.1163mg／ml對照品溶液10ml，按照“2.4”項下供試品溶液制備方法制備溶液，按照“2.1”項色譜條件，分別測定，結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果（mg，%）

2.8 樣品測定 取3批樣品，按“2.4”項下方法制備供試液，各進樣10μl，按外標法計算芍藥苷的含量，結果見表2。

表2 3批樣品中芍藥苷的含量（mg／ml）

3 討論

采用高效液相色譜法測定芍藥苷的含量報道很多［3-4］，但供試品溶液的提取方法比較繁瑣，本方法采用超聲提取，操作簡便，具有較強的專屬性，回收率好，能夠更有效的控制該制劑的質量。

［1］河南省食品藥品監督管理局．河南省醫療機構制劑標準［S］．批件號：2004Z00585．

［2］國家藥典委員會．中國藥典2010年版．一部［S］．北京：化學工業出版社，2010：147-148．

［3］馬琳，李勇軍，何迅．高效液相色譜法測定辛芍注射液中芍藥苷含量［J］．中國藥業．2008．17（11）：22-23．

［4］羅艷，劉皈陽，馬建麗，等．高效液相色譜法測定養血醒腦口服液中芍藥苷的含量［J］．中國藥物與臨床．2012，12（8）：1054-1055．

HPLC Determination of Paeoniforin in Qinhuliy an Liquid

Chenjing
（Pharmacy department，Shangqiu city the first people's hospital，Shangqiu，476000，China）

Objective To establish a HPLC method to determination of paeoniforin in Qinhuliyan Liquid．Methods The chromatographic system consisted of C18 column，using acetonitrile－0.1%phosphate solution（14：86）as mobile phase．The content was detected at a waveleng of 230nm，the flow rate was 1.0ml·min-1．Results The paeoniforin have a good tincar rolatim in the range of 0.5165－2.066μg（r＝0．9995），the average recovery was 97.98%and RSD＝1.01%（n＝6）．Conolusion The established method is accuracy，sensitive and simple．It can be used for quality control of Qinhuliyan Liquid．

Paeoniforin；HPLC；Determination

10.3969／j.issn.1672-2779.2014.05.100

1672-2779（2014）-05-0158-02

楊 杰 本文校對：劉曉云

2013-11-11）