結核蛋白芯片對肺結核及肺外結核的診斷價值

吳友根,劉紅兵，楊興萍，王軍，羅菊華

(攀枝花市第六人民醫院，四川攀枝花617023)

結核蛋白芯片對肺結核及肺外結核的診斷價值

吳友根,劉紅兵，楊興萍，王軍，羅菊華

(攀枝花市第六人民醫院，四川攀枝花617023)

目的探討結核蛋白芯片檢測對診斷肺結核及肺外結核的價值。方法使用蛋白芯片系統檢測血清結核抗體的病例共4765例,其中肺結核334例,肺外結核83例,肺結核并肺外結核69例，非結核病4279例。我們采用的蛋白芯片包含了結核分枝桿菌(MTB)中5種成分，即ESAT-6、CFP10、LAM、38KD和16KD。結果334例肺結核中227例結核抗體陽性,83例肺外結核中50例陽性,69例肺結核并肺外結核中51例陽性，4279例非結核病797例陽性,結核蛋白芯片檢測肺結核的陽性率為67.96%,肺外結核的陽性率為60.24%,肺結核并肺外結核的陽性率為73.91%，非結核病的陽性率為18.62%。結論結核蛋白芯片是對肺結核及肺外結核的輔助診斷有重要價值。但在淋巴結結核、結核性胸膜炎中陽性率偏低,敏感性稍差。

結核蛋白芯片；肺結核；肺外結核；診斷價值

結核分枝桿菌不僅可引起肺結核，而且可引起肺外多種器官的感染。結核病是MTB感染引起的一種感染性疾病。全球已有1/3的人口，即約20億結核感染者[1]。在我國一些地區結核病已在感染性長期發熱的病因中上升至首位，其中肺外結核遠較肺內結核為多[2]。采用蛋白芯片技術檢測患者抗體的MTB中5種成分，為早期分泌性低分子量6KD抗原靶(ESAT-6)、培養濾液蛋白10 (CFP10)、脂阿拉伯甘露聚糖抗原(LAM)、結核分枝桿菌復合群特異蛋白(38KD、16KD)。2009年12月至2014年4月，利用該技術進行了臨床試驗，現將試驗報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 標本來源(1)結核組:選取我院感染科臨床表現、細菌學、影像學或抗結核治療有效而明確診斷的結核患者486例；其中肺結核334例；肺外結核83例(結核性胸膜炎29、淋巴結結核18例，骨結核19例，泌尿系結核8例，其他9例)；肺結核并肺外結核69例(含結核性胸膜炎46、淋巴結結核4例，骨結核7例，其他12例)。男320例，女166例，年齡1～84歲,平均年齡48歲。(2)非結核疾病組:選取我院非結核患者4279例(且以出院診斷為準),男2539例，女1740例，年齡1月～94歲,平均年齡57歲。結核病患者中59例痰涂片查見抗酸桿菌，33例病理符合結核診斷。均抽取空腹血液5ml。所有研究對象均無HIV感染、妊娠、使用免疫抑制劑或增強劑。5種MTB復合群特異性的抗原來檢測待檢血清中的抗體,如果任一抗體檢測陽性,結果可判定為陽性,5種抗體檢測均為陰性,結果可判定為陰性。

1.1.2 儀器及試劑西安聯爾科技有限公司的配套儀器及相應試劑盒。

1.2 檢測方法嚴格依照配套說明書進行操作，結果由儀器自動判讀。

1.3 統計學分析采用SPSSl0.0軟件進行統計學處理。結核與非結核組患者的陽性率比較采用χ2檢驗，P<0.05差異有統計學意義。

2 結果

4765例血清標本MTB-IgG抗體的敏感性為67.49%(328/486),特異性為81.38%(3482/4279)。詳見表1、表2。

表1 結核蛋白芯片法檢測結核病人和對照組的結果

表2 83例單純肺外結核抗體蛋白芯片法結果

3 討論

輔助結核病診斷的蛋白芯片是近年來蛋白質組學研究中興起的一種新方法，此技術是一高特異性、高通量、高靈敏度且微型化的蛋白質分析技術，朱同華[3]報告該方法診斷結核病的特異性96．5%，靈敏度為83.0%，因此，可用于結核病的快速診斷，特別是肺外結核及菌陰肺結核病的快速診斷，該技術為臨床診斷結核病起到了積極的作用。本研究淋巴結結核(均為手術病理診斷)、結核性胸膜炎抗體陽性率過低具體原因理論上不好解釋，可能是結核性胸膜炎等肺外結核并不都是由MTB感染所致的疾病，可能也包含部分非結核分枝桿菌(NTM)肺外疾病。李寧等[4]對283株分枝桿菌的菌型鑒定結果顯示，MTB占152株，NTM占131株，NTM占46.3%，應該引起同行重視[4]。雖然目前診斷技術日益提高肺外結核在FUO病因診斷中仍是個難點，有文獻報告[5]FUO的肺外結核大多數是依靠診斷性抗結核治療確診，因此開展結核病診斷研究很有意義。如果將蛋白芯片抗體與張周云等[6]利用基因工程方法檢測患者血清中結核抗原相結合，筆者推測抗體與抗原聯合檢測，相互印證，更有利于結核病的診斷。本研究敏感性為67.49%,特異性為81.38%，P<0.01說明與對照組有顯著性差異，值得臨床推廣應用。

[1]葛均波,徐永健,梅長林,等.內科學[M].第8版.北京:人民衛生出版社,2013:61.

[2]陳灝珠,廖履坦,楊秉輝,等.實用內科學[M].第12版.北京:人民衛生出版社,2005:782-786.

[3]朱同華.血清結核抗體蛋白芯片檢測與痰抗酸染色實驗室分析[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(5):492-496.

[4]李寧,伍嚴安,胡辛蘭,等.結核分枝桿菌的實驗室檢測方法學評價及耐藥情況分析[J].實驗與檢驗醫學,2013,31(3):214-216.

[5]石秋萍,王超,徐定華,等.不明原因發熱372例臨床分析[J].中華內科雜志,2014,53(4):298-302.

[6]張周云,熊國亮.探討ELISA法檢測血清結核桿菌抗原對肺結核病的診斷價值[J].實驗與檢驗醫學,2010,28(6):537-538.

Clinical value of tuberculosis protein chip in diagnosis of pulmonary and extra pulmonary tuberculosis

WU Yougen,LIU Hongbing,YANG Xingping,et al.The Sixth People's Hospital of Panzhihua,Sichuan Panzhihua 617023，China

Objective To explore the diagnosis value of tuberculosis protein chip for pulmonary and extra pulmonary tuberculosis(TB).Methods The serum tuberculosis antibodies were detected by using protein chip system in 4765 cases,including 334 cases of pulmonary tuberculosis,83 cases of extra pulmonary tuberculosis,69 cases of pulmonary tuberculosis and extra pulmonary tuberculosis,4279 cases of non tuberculosis.The protein chip we used contain 5 components of Mycobacterium tuberculosis,namely ESAT-6、CFP10、LAM、38KD and 16KD.ResultsThe TB antibody was detected positive in 227 of 334 pulmonary TB cases，positive in 50 of 83 extra pulmonary TB cases,positive in 51 of 69 pulmonary TB and extra pulmonary TB cases,and positive in 797 of 4279 non-TB cases.The positive rate of detection of tuberculosis antibody using tuberculosis protein chip in pulmonary tuberculosis group was 67.96%.The positive rate in extra pulmonary tuberculosis group was 60.24%.The positive rate in pulmonary and extra pulmonary group was 73.91%.The positive rate in non-TB group was 18.62%.Conclusion The TB protein chip is a fast,easy and effective method for diagnosing the pulmonary TB and extra pulmonary TB with good specificity,but it is less sensitive in the diagnosis of lymphoid tuberculosis and tuberculous pleurisy.

Tuberculosis protein chip；Pulmonary tuberculosis；Extra pulmonary tuberculosis；Diagnostic value

R378.91+1

A

1674-1129(2014)05-0503-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.004

2014-04-14；

2014-07-07)

攀枝花市應用技術研究與開發項目(編號：2013CYS-16-10)

吳友根，1967年生，男，本科，主任醫師，主要從事傳染病臨床診治與醫療質量。