迪瑞尿液檢驗工作站和顯微鏡鏡檢對尿中紅細胞、白細胞檢測結果的對比分析

張磊

(濉溪縣醫院檢驗科，安徽濉溪235100)

迪瑞尿液檢驗工作站和顯微鏡鏡檢對尿中紅細胞、白細胞檢測結果的對比分析

張磊

(濉溪縣醫院檢驗科，安徽濉溪235100)

目的探討迪瑞尿液檢驗工作站(由H-800全自動尿液分析儀和FUS-200全自動尿有形成分分析儀組成)、涂片顯微鏡檢測尿紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)結果的對比性分析。方法隨機選取我院479例住院患者尿液標本，分別用H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀、涂片顯微鏡檢測尿紅細胞(RBC)、白細胞(WBC)，對比性分析兩個參數結果。結果三種方法對尿液中的RBC、WBC檢出率較一致。(1)H-800全自動尿液分析儀：RBC敏感性為93.3%，特異性為95.5%，假陰性率6.7%、假陽性率4.5%、符合率94.2%；WBC敏感性為77.5%，特異性為99.3%，假陰性率22.5%、假陽性率0.7%、符合率97.5%。(2)用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢對比：RBC敏感性為80.0%，特異性為99.3%，假陰性率20.0%、假陽性率0.7%、符合率96.2%；WBC敏感性為95.0%，特異性為99.1%，假陰性率5%、假陽性率0.9%、符合率98.8%；H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀對RBC、WBC檢查結果對比分析P＜0.05，表示兩種檢測方法差異有統計學意義。由H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀組合而成的尿液檢驗工作站對尿中紅細胞和白細胞的檢出率，可達93.7%、96.7%。結論H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀兩種儀器操作簡便、快速、檢測項目多,重復性好；對于尿液中紅細胞、白細胞檢測，尿液檢驗工作站做篩檢實驗須結合尿沉渣顯微鏡檢查結果進行綜合判斷。臨床應根據患者的病因和癥狀，采用多種方法有機結合進行診斷，以提高檢測的準確率，避免漏檢和貽誤，為臨床提供可靠的檢測結果。

尿液檢驗工作站；顯微鏡鏡檢；紅細胞；白細胞

尿液分析是為泌尿系統疾病及其它系統相關疾病提供重要診斷依據的常規檢測項目，目前最常用的方法是干化學法和人工光學顯微鏡檢查，本院在2012年新添置了由迪瑞H-800全自動尿液分析儀和迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀組成的尿液檢驗工作站。H-800全自動尿液分析儀是利用干化學法的原理來檢測尿液的，具有操作簡便、快速、但檢測結果受到諸多干擾因素的影響，易產生假陰性和假陽性結果，只能作為過篩實驗[1]。尿有形成分檢查方法中也存在某些難以避免的干擾因素。光學顯微鏡鏡檢雖操作復雜費時，但對于檢測尿液中的有形成分具有很大的臨床意義，可以作為尿液有形成分檢查的金標準[2]。本文用三種檢測方法同時檢測479例尿液中的紅細胞、白細胞，并對結果進行對比性分析，以了解單一分析儀及組合狀態下對尿中紅細胞、白細胞檢測性能，現報告如下。

1 材料與方法

1.1 標本來源隨機選取的479例尿液標本均為安徽省濉溪縣醫院2013年7月至2013年12月住院的患者，其中男性202例，女性277例，患者年齡1～97歲，平均年齡55.1歲，尿液標本均是用潔凈一次性尿杯留取中段尿，1h內完成檢測。

1.2 儀器與試劑長春迪瑞H-800全自動尿液分析儀及該機專用11項測試帶。按要求進行室內質控和加樣測試，操作步驟嚴格按照說明要求進行；(1)長春迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀及其配套試劑；(2)奧林巴斯CH30光學顯微鏡；玻片；所用的試劑條均為原裝配套產品。

1.3 檢測方法用一次性潔凈尿杯收集患者中段尿液10ml左右，用尿液檢驗工作站對尿液進行自動進樣分析，完成以后的尿液于離心管中1500r/ min離心5min，棄去上清液留取0.2ml左右沉渣，然后吸取一滴于玻片上做顯微鏡鏡檢，觀察10個高倍鏡視野，計算出鏡下細胞的平均數。所有的操作步驟都遵循《全國臨床檢驗操作規程》第3版。

1.4 臨床評價標準和評價指標用奧林巴斯CH30光學顯微鏡檢測結果作為臨床評價標準，分別與尿液流水線的FUS-200和H-800兩種檢測方法進行比較，H-800全自動尿液分析儀結果參考值：隱血(BLD)陰性，白細胞(LEU)陰性；尿沉渣顯微鏡計數參考區間遵循《全國臨床檢驗操作規程》第3版[3]，RBC：0～3/HP,WBC：0～5/HP；FUS-200全自動尿有形成分分析儀的參考區間遵循廠家規定：RBC：0～17/μl，WBC：0～28/μl，超出規定范圍則視為陽性。

1.5 統計學處理數據采用SPSS19.0統計軟件做統計學分析，進行配對χ2檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義；運用Kappa檢驗判斷結果的符合率一致性分析。

2 結果

通過用H-800全自動尿液分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀以及顯微鏡檢查三種方法對479例尿液進行檢驗，本文以光學顯微鏡鏡檢法作為參考對照標準。

2.1 H-800全自動尿液分析儀與顯微鏡鏡檢對比見表1、表2。

表1 H-800全自動尿液分析儀與顯微鏡鏡檢RBC結果對比

表2 H-800全自動尿液分析儀與顯微鏡鏡檢WBC結果對比

2.2 用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢對比見表3、表4。

2.3 H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀對RBC WBC結果對比分析見表5、表6。

3 討論

在本結果中發現，H-800全自動尿液分析儀檢測具有使用方便、所需尿量少、重復性好、準確性好、便于實現自動化測定等優點，擴大了尿液檢查的內涵，極大的提高了工作效率。但是由于該儀器采用干化學方法，尿液成分復雜，項目繁多，其檢測原理各不相同，所以影響因素很多，易出現假陰性和假陽性結果[4]；FUS-200全自動尿有形成分分析儀其主要特點是采用高速頻閃光源和高速顯微攝像技術的光學系統，每個檢測標本利用流式細胞儀技術在鞘流液的包裹下進入流動池內，其厚度和位置正好符合顯微鏡的焦距范圍內，標本以平坦對的層流形式流經物鏡鏡頭前面，根據鞘流原理，任何粒子通過時都會以最大的面積直接對準鏡頭的觀測，每個顯微鏡視野被高速頻閃光源(40次/s)瞬間拍攝，由CCD相機拍攝820副含有有形成分的圖像，再由計算機進行圖像分析等技術，對尿中有形成分的大小、對比度、形狀、質地特征進行提取，運用形態識別軟件進行有形成分的分類和定量報告。每種成分均可在顯示屏上顯示其形態，并可任意選取可疑的成分進行人工智能識別技術復核，是一種全新的分析技術。FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢測時尿液無需離心，可以實現尿液分析的全自動化和標準化，具有高效、簡便快速、無攜帶污染和結果較為準確的性能。對陰性樣本過篩結果可靠，但是在陽性樣本有形成分識別上有一定的差異。當尿液樣本中含有真菌、結晶時，FUS-200全自動尿有形成分分析儀有可能誤判為紅細胞，而有些脫落的上皮細胞誤判為白細胞等都會使結果出現假陽性的結果。而H-800全自動尿液分析儀檢測結果均為陰性，此時就需要經過光學顯微鏡鏡檢復查，得出準確結果。

表3 用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢RBC結果對比

表4 用FUS-200全自動尿有形成分分析儀與顯微鏡鏡檢WBC結果對比

表5 H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢測RBC

表6 H-800全自動尿液分析儀與FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢測WBC

合理建立尿有形成分顯微鏡復檢的規則，規范化與標準化尿液檢查工作[5]。(1)H-800與FUS-200的檢測結果有較高的符合一致性(RBC:93.7%; WBC:96.7%)。如果均為陰性時不需要復檢；如果均為陽性并且陽性量級相當時，不需要復檢[6]。(2) FUS-200檢查RBC陽性而H-800檢查為陰性時，大多數情況是尿液中存在不同數量體積較小的結晶、真菌、細菌所致，對結果產生干擾[7]。(3)H-800檢查RBC為不同程度的陽性而FUS-200檢查為陰性的，原因：①可能尿液中存在類過氧化酶的物質，其具有與血紅蛋白相同的氧化色原的作用，而造成潛血實驗假陽性，②也可能有技術操作人員能力有限，誤判所致；③進行FUS-200檢測時，由于留取尿液樣本量過少的，為了滿足儀器的需要，就需要對樣本進行生理鹽水稀釋，從而導致尿有形成分分析時單位體積內RBC數量較少，結果出現假陰性，樣本需要復檢鑒別。

尿液紅細胞檢查結果中，479例樣本5例樣本H-800陰性而鏡檢陽性可能由于尿中含有過氧化物酶樣的物質，從而產生假陰性。有報道指出尿液中若存在高濃度的維生素C、青霉素、亞硝酸鹽或其他還原物質也可導致干化學法檢測紅細胞結果呈現假陰性[8]。H-800全自動尿液分析儀(干化學試法)的原理，其檢測隱血的原理是根據血紅蛋白的亞鐵血紅素具有過氧化物酶樣活性，可催化分解氧化物，釋放新生態氧，使鄰聯甲苯胺氧化呈色，其色澤的深淺與尿液中血紅蛋白或紅細胞量呈正比。在FUS-200的RBC檢測中，479例樣本中18例與顯微鏡鏡檢不符，不符合率3.8%。由于顯微鏡鏡檢只能檢測出完整紅細胞，離心對尿液有形成分的影響很大，讓紅細胞的數量減少，從而出現假陰性結果。而FUS-200檢測不需要離心可直接檢測樣本，這就可能是其紅細胞檢出率接近于甚至好于顯微鏡鏡檢的原因。在本文中三種方法對RBC檢測結果同時是陽性和陰性的為92.3%(442/ 479)，符合一致性較高。

對于白細胞檢測而言，H-800全自動尿液分析儀(干化學法)的原理是基于中性粒細胞胞質內含有的酯酶作用于帶膜塊中的吲哚酚酯，使吲哚酚酯釋放吲哚酚，后者與重氮鹽反應產生紫色，以其顏色深淺換算成白細胞數。本本文中H-800檢測WBC的假陰性率22.5%，其主要原因可能與干化學法測定白細胞原理有關。此外，尿中H-800陽性而顯微鏡鏡檢陰性，可能是由于尿液滲透壓、酸堿度、藥物(頭孢拉定和慶大霉素)及離心等因素所導致。H-800檢測WBC假陰性率為0.7%，可能是尿液在膀胱中貯存時間過長或者離心過快等原因導致白細胞破壞，酯酶釋放入尿中所致。FUS-200檢測WBC陽性，而H-800檢測陰性時，大部分是由于尿液中WBC是以單核細胞和淋巴細胞為主，而干化學是針對中性粒細胞的酯酶反應，從而呈現假陰性結果[9]。H-800檢測WBC為不同程度陽性，FUS-200檢測為陰性的例數，可能是WBC破碎所致，需要復檢鑒別。另外，FUS-200全自動尿有形成分分析儀檢出的4例假陽性標本經人工審核及鏡檢發現，小圓上皮細胞和移行上皮細胞體積膨大變性在光學顯微鏡下WBC的形態特點非常相近且容易誤判，特別是女性患者白帶增多，冬季鹽類結晶析出等原因使結果呈現出假陽性[10]。本研究中三種方法對WBC檢測結果同時是陽性和陰性的為96.5%(462/479)，符合一致性較高。

綜上所述，尿液分析對于泌尿系統疾病的診斷、鑒別、治療和預后有重要的臨床意義和參考價值。H-800尿干化學分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀、以及顯微鏡鏡檢檢測RBC和WBC受到諸多干擾因素的影響使結果呈現假陽性或假陰性結果。通過本結果分析證實，三種檢測方法有各自的優缺點，H-800操作簡便、快速、但檢測結果受到諸多干擾因素的影響，易產生假陰性和假陽性結果，只能作為過篩實驗。FUS-200全自動尿有形成分分析儀具有檢測速度快，操作簡單，批量進樣以及圖像傳出真實等優點，與光學顯微鏡鏡檢結果具有很高的符合率和良好的一致性，對尿液中的紅細胞和白細胞識別具有高特異性和高靈敏度，報告結果規范，有很大的臨床實用價值。光學顯微鏡鏡檢時需要尿液少，是一種操作簡單、檢出率和精確度高的方法，但是顯微鏡法在用于大群疾病篩查時操作比較復雜，工作效率低，需要投入大量的人力，并且離心尿液對尿有形成分產生影響，檢測結果也受技術人員主觀因素和技術水平影響較大。因此，要加強尿液分析檢測的規范化和標準化，必須把H-800尿干化學分析儀、FUS-200全自動尿有形成分分析儀以及顯微鏡鏡檢三者結合起來，相互補充，只有這樣才能提高尿液檢測的準確性和可靠性，為臨床提供準確的參考、診斷和治療依據。

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R446.12+1

A

1674-1129(2014)05-0552-004

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.023

2014-03-07；

2014-07-14)