高效液相色譜法測定鹽酸法舒地爾的含量

樊春艷，張 沂，劉秀芳，楊崢維

鹽酸法舒地爾作為一種新型、高效的血管擴張藥，具有抑制平滑肌收縮最終階段的肌球蛋白輕鏈磷酸化，使血管擴張。臨床上用于改善和預防蛛網膜下腔出血術后的腦血管痙攣及引起的腦缺血癥狀。筆者采用高效液相色譜法(high performance liquid chromatography，HPLC)測定鹽酸法舒地爾含量，結果表明HPLC法方法簡單，專屬性強、靈敏度高。

1 材料與方法

1.1 儀器與試藥 高效液相色譜儀及檢測器為美國LAB ALLIANCE，色譜工作站ANASTAR。鹽酸法舒地爾(批號 20081001、20081002、20081003，自制)，鹽酸法舒地爾對照品(批號080920自行精制)。

1.2 色譜條件 色譜柱:phecda C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)，以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸調節pH值至7.0)-甲醇(50∶50)為流動相;檢測波長275 nm，流速1.0 ml/min，進樣量20 μl，柱溫25℃;理論板數按鹽酸法舒地爾峰計算應不低于6 600。

1.3 溶液的制備 (1)對照品溶液配制:稱取鹽酸法舒地爾對照品30.0 mg，置100 ml量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻。再精密量取25 ml置50 ml量瓶中，加流動相至刻度搖勻，作為對照品溶液。(2)供試品溶液配制:稱取鹽酸法舒地爾樣品29.3 mg，置100 ml量瓶中，加流動相溶解配成稀釋至刻度，搖勻。再精密量取25 ml置50 ml量瓶中，加流動相至刻度搖勻，作為供試品溶液。

1.4 方法 采用HPLC法(中國藥典)測定［1］。

1.4.1 線性關系考察 精密稱取法舒地爾對照品60.5 mg，置 100 ml量瓶中，加流動相溶解配成0.605 g/L的溶液，再精密量取2、4、6、8、10 ml，分別置25 ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，得到系列濃度樣品，分別量取20 μl，注入高效液相色譜儀，得到各濃度的峰面積，以峰面積(A)為縱坐標、樣品濃度(C)為橫坐標做回歸計算。

1.4.2 重復性試驗 取線性范圍內的一種濃度(145.2 mg/L)，連續進樣5次，測定5次的峰面積。

1.4.3 重現性試驗 精密量取同一樣品 (批號081001)6份，按“供試品溶液配制”方法制成供試品溶液，按上述色譜條件分別測定其含量。

1.4.4 溶液穩定性 取“線性試驗”項下的樣品(濃度為145.2 mg/L)，分別在0、4、8、12、24 h測定1次，共測定5次。

1.4.5 回收率試驗 按規格2 ml:30 mg鹽酸法舒地爾注射液的處方，稱取鹽酸法舒地爾(100.03%)低、中、高量樣品各3份，分別置100 ml量瓶中，加入對應的輔料，再加水至刻度，搖勻，配制成9份樣品。分別量取樣品5 ml，置50 ml量瓶中，加流動相至刻度，搖勻，制成低(120%)、中(150%)、高(180%)3種濃度樣品各3份，作為供試品溶液，另精密稱取鹽酸法舒地爾對照品適量(100.03%)，加流動相稀釋制成約150 mg/L的溶液作為對照品溶液，取供試品和對照品溶液分別注入液相色譜儀，按外標法以峰面積計算回收率。

2 結果

2.1 色譜圖 鹽酸法舒地爾對照品、供試品溶液和空白樣品色譜見圖1。

圖1 法舒地爾對照品、供試品和空白樣品溶液色譜圖

2.2 線性關系 回歸計算得標準曲線方程為A=1 604.619+15 608.345C(r=0.999 4，n=5)。

2.3 重復性試驗 計算其相對標準偏差為0.71%。

2.4 重現性試驗 平均含量為99.8%，RSD為0.75%。

2.5 溶液穩定性 RSD為0.72%。

2.6 回收率試驗 按外標法以峰面積計算回收率，測得低、中、高濃度鹽酸法舒地爾的平均回收率為99.4%，RSD為0.47%。

2.7 含量測定 按HPLC法測定，結果見表1。

表1 鹽酸法舒地爾含量HPLC法測定結果

3 討論

3.1 流動相的選擇合理 用phecda C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色譜柱，柱溫25℃。以1.0%三乙胺水溶液(用磷酸調節pH值至7.0)與甲醇比例50∶50為流動相，所得峰形對稱，保留時間滿意，主峰與溶劑峰以及雜質峰分離完全。

3.2 現行鹽酸法舒地爾標準采用國家食品藥品監督管理局新藥轉正標準［2］采用高氯酸滴定法測定其含量，專屬性差，且醋酸汞試液污染環境［3］。HPLC法在專屬性、靈敏性等方面也優于高氯酸滴定法［3］，可以作為鹽酸法舒地爾的含量測定方法。

［1］國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版［S］.北京:中國醫藥科技出版社，2010:附錄29.

［2］郭旭光，郭興輝.HPLC法測定鹽酸法舒地爾的含量及有關物質［J］.中國藥事，2012，26(12):1380-1383.

［3］李金濤，干偉，鄧媛媛，等.HPLC法測定鹽酸法舒地爾的含量［J］.中國藥師，2010，13(11):1609-1611.

(本文編輯:甘輝亮)