固相萃取—氣相色譜法檢測三七中有機磷農藥殘留

譚福能，何媛媛

（1. 文山學院 化學與工程學院，云南 文山 663000；2. 文山市農業(yè)環(huán)境保護監(jiān)測站，云南 文山 663000）

固相萃取—氣相色譜法檢測三七中有機磷農藥殘留

譚福能1，何媛媛2

（1. 文山學院 化學與工程學院，云南 文山 663000；2. 文山市農業(yè)環(huán)境保護監(jiān)測站，云南 文山 663000）

文章采用固相萃取—氣相色譜的方法檢測三七樣品中的有機磷類農藥殘留。采用超聲法提取，并用弗羅里硅土固相萃取柱凈化，用氮磷檢測器進行檢測，最后用外標法定量。5種有機磷殺蟲劑的回收率范圍為73.66%～112.22%，相對標準偏差（RSD）范圍為2. 94%～4.31%，在5個三七樣品中檢出了樂果和敵敵畏，沒有檢測到甲胺磷、對硫磷、辛硫磷。該方法快速、準確，可用于三七中有機磷農藥殘留的分析。

三七；固相萃取；氣相色譜；有機磷農藥殘留

三七（Panax notoginseng）為五加科人參屬植物，與人參同科同屬，三七作為云南特有的名貴中藥材，以其活血化瘀、消腫定痛的功效為世人所公認[1-2]。近 30年來，國內外專家學者對三七進行了廣泛深入的藥化、藥理研究和臨床實驗。研究表明，三七對防治心腦血管疾病有顯著作用，尤其是在降血脂、降血糖、降血稠、降血壓、抗炎癥、抗疲勞和提高機體免疫力等方面療效顯著，而且安全無毒，從而給三七的開發(fā)應用展示出新的廣闊天地[3-5]。但目前對三七的研究尚處在起步階段，尤其是對三七安全性評價的研究處于滯后狀態(tài)。三七作為藥品，安全衛(wèi)生狀況不僅關系到消費者的身體健康，也直接影響著三七的出口及長遠發(fā)展。

由于三七抗蟲抗病性差，在種植過程中需大量使用各類農藥。有機磷農藥因其高效性和廣泛性而成為當今世界上生產(chǎn)和使用最多的農藥之一，也是目前三七的主要殺蟲劑[6-8]。但因其毒性強，在三七中的殘留易引起中毒，因此，加強對有機磷農藥殘留檢測，意義重大。

目前，有機磷農藥殘留的檢測技術手段主要是GC、HPLC、GC-MS和HPLC-MS[9-13]。近年來隨著現(xiàn)代分析儀器檢測功能和萃取技術的不斷發(fā)展，高效、快捷、準確成為農藥殘留檢測技術發(fā)展的趨勢。目前農殘檢測大多是針對于食品，而對于名貴中藥材三七的農殘檢測成了空白。本文采用固相萃取—氣相色譜法檢測了三七中的5種有機磷農藥殘留。

1 材料與方法

1.1 實驗儀器

GC-2010 氣相色譜儀（日本島津公司），配氮磷檢測器（NPD），弗羅里硅土固相萃取柱（北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司），固相萃取儀（上海濟成分析儀器公司），超聲波清洗儀（深圳旭日達公司），旋轉蒸發(fā)儀（上海予華公司），電子天平（科恩公司）。

1.2 實驗試劑

丙酮、乙酸乙酯（分析純，國藥集團上海試劑廠）；乙睛、正己烷（色譜純，TEDIA公司）；樂果（dimethoate）、甲胺磷、辛硫磷、對硫磷、敵敵畏（sigma公司，純度≥99.99%）；三七（文山市三七交易市場購買）。

1.3 實驗方法

1.3.1 試樣的制備

取有代表性樣品三七400 g，用粉碎機粉碎，混勻，裝入潔凈干燥過的容器中備用。

1.3.2 提取

稱取2.5 g三七粉末，置于燒杯中，用50 mL乙腈浸泡24 h，放入超聲清洗儀器中處理30 min，靜置2 h使其溶液分層，取上層液放入離心管中，高速離心分離10 min，過濾，濾渣再用乙腈提取，重復上述步驟，最后將提取液混合。

1.3.3 凈化

將上述濾液倒入旋轉蒸發(fā)儀中，濃縮后再滴入3 mL丙酮，備用。

采用弗羅里硅土固相萃取柱進行凈化，用4 mL乙酸乙酯預淋洗萃取柱，并重復一次，流出液棄掉，然后將上述凈化液全部傾入柱中，再用1 mL的乙酸乙酯和1 mL正己烷的混合液洗脫，收集全部洗脫液，于45 ℃下置于旋轉蒸發(fā)儀中進行濃縮，最后用丙酮定容至3 mL，待測。

1.3.4 測定

1.3.4.1 氣相色譜條件

離開時候，收銀臺前，靜秋為蕭健介紹了楚墨。“我的大學同學，楚墨。”她這樣對蕭健說。蕭健伸出手，笑著眼，楚墨卻感覺后脊生風。

色譜柱：AT農殘色譜柱，規(guī)格：30 m×0.53 mm× 1 μm；色譜柱溫度：60 ℃恒溫1 min，以20 ℃/min升溫至140 ℃，恒溫1 min，以5 ℃/min升溫至160℃，恒溫1 min，繼續(xù)以10 ℃/min 升溫至240 ℃然后恒溫6 min；NPD溫度：260 ℃；進樣口溫度：250 ℃；載氣：N2，流速：12 mL/min；H2，流速：30 mL/min；空氣，流速：80 mL/min。

1.3.4.2 色譜分析

取1.0 μL待測液注入氣相色譜儀，以峰面積定量，保留時間定性。

1.3.5 結果計算

有機磷農藥殘留量以質量體積分數(shù)ω（mg/L）表示，按公式ω=V1AiV3ρ/V2Asim計算。式中：ρ為有機磷農藥標液的質量濃度（μg/L）；V1為用來提取農殘全部溶劑的體積（L）；V2用于結果分析的提取液的體積（L）；V3為樣品溶液定容體積（L）；Ai為樣品溶液中被測組分i的峰面積；Asi為標樣中被測組分i的峰面積；m為被測樣品的質量（μg）[14]。

2 結果與分析

2.1 線形范圍和檢出限

表1 5種有機磷農藥的線性方程、線性相關系數(shù)、線性范圍和檢測限

圖1 添加5種有機磷農藥標準品的三七樣品氣相色譜圖

2.2 方法的精密度和回收率

測定方法的精密度以整個過程的添加回收率來評價。分別在1 g 的三七處理試樣中精確添加0.3 μg/g、0.5 μg/g、1 μg/g 的混合標準溶液，每個添加濃度做三次重復實驗[16]，按上述檢測方法，測得的平均回收率在73.66%～112.22%之間，回收率和相對標準偏差（RSD）結果見表2。

表2 5種有機磷農藥的加標回收率和相對標準偏差

2.3 三七樣品中有機磷農藥殘留的測定

按上述實驗方法對5個三七樣品中的有機磷農藥殘留進行檢測，每個樣品做3個重復，取平均值，由結果可知，在其中2個樣中檢出樂果和敵敵畏，平均含量分別為1.9 μg/L（敵敵畏）和2.1 μg/L（樂果），三七樣品中敵敵畏和樂果的檢出率分別為40%和20%，甲胺磷、對硫磷、辛硫磷在5個樣中均未檢出。

3 結論

本研究采用固相萃取—氣相色譜法來檢測三七中有機磷五種農藥殘留，通過超聲提取和固相萃取凈化之后進入色譜柱，最后使用氮磷檢測器進行檢測，經(jīng)過定量計算后得到三七中有機磷農殘含量。

對于檢測結果， 雖然現(xiàn)階段尚無三七有機磷農殘檢測的國家標準，但參考其他中藥材的農殘檢測國家標準，5個樣品中檢測到的有機磷農藥殘留量均低于國家限量標準，而因為其高毒性而限制使用的有機磷農藥甲胺磷[17]則未檢出。

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Detecting Organophosphorus Pesticides Residue in Panax Notoginseng with Solid Phase Extraction and Gas Chromatography

TAN Fu-neng1, HE Yuan-yuan2
(1. College of Chemistry and Engineering, Wenshan University, Wenshan 663000, China; 2. Agricultural Environment Protection and Monitoring Station, Wenshan 663000, China)

The paper detects organophosphorus pesticide residue in Panax notoginseng using solid-phase extraction and gas chromatography methods. Panax notoginseng samples are extracted with ultrasonic method, purified with Florida silica solid-phase extraction column, detected with nitrogen-phosphorus detector and quantified with external standard method. The recovery range of five kinds of organophosphorus pesticide is 73.66%～112.22% with relative standard deviation of 2.94%～4.31%. Dimethoate and DDVP are detected, but methamidophos, parathion and phoxim are not detected in five samples. This method is fast and accurate and can be used in the analysis of organophosphorus pesticide residue in Panax notoginseng.

Panax notoginseng; solid-phase extraction; gas chromatography; organophosphorus pesticide residue

S567.236

A

1674-9200（2014）06-0001-03

（責任編輯 張鐵）

2014-06-12

云南省科技廳應用基礎研究青年項目“新型殼聚糖衍生物智能凝膠的制備技術研究”（2012FD058）。

譚福能（1985-），男，云南文山人，文山學院化學與工程學院助教，碩士，主要從事天然高分子化學研究。