S100A4及CEACAM-1蛋白與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

孫永敏

鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（核醫(yī)學(xué)科），河南鄭州450032

S100A4及CEACAM-1蛋白與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性分析

孫永敏

鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院（核醫(yī)學(xué)科），河南鄭州450032

目的對S100A4及CEACAM-1蛋白與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性予以探討。方法收集該院2013年3月—2013年10月收治的甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者102例，對其相關(guān)的臨床病理因素進(jìn)行簡單分析，并應(yīng)用免疫組織化學(xué)Histofine Simple Stain MAX及EnVision兩步法對癌組織中的p27kip1、cyclin D1、CEACAM-1、S100A4蛋白的表達(dá)予以檢測，應(yīng)用單因素及多因素分析CEACAM-1、S100A4蛋白與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果CEACAM-1、S100A4蛋白在甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本中的檢測陽性率分別為51.0%、79.4%，通過實(shí)施單因素分析，發(fā)現(xiàn)年齡為45歲的患者、腫物直徑為1cm的淋巴結(jié)的CEACAM-1的陰性表達(dá)與S100A4的陽性表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，p27kip1及cyclinD1的陽性表達(dá)、侵及甲狀腺包膜外、多灶、伴發(fā)橋本甲狀腺炎、組織學(xué)亞型、腫物包膜完整、纖維化、性別等與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)，通過進(jìn)一步的多因素研究發(fā)現(xiàn)，年齡為45歲的患者、腫物直徑為1cm的淋巴結(jié)的CEACAM-1的陰性表達(dá)與S100A4的陽性表達(dá)是甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素。結(jié)論CEACAM-1的陰性表達(dá)及S100A4的陽性表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移相關(guān)，可以將其作為甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測因素。

S100A4蛋白；CEACAM-1蛋白；甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)；轉(zhuǎn)移相關(guān)性

甲狀腺癌是常見的一種內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，近年來其發(fā)病率不斷上升，其中絕大部分的癌來源是濾泡上皮細(xì)胞，其中最為常見的一種類型就是甲狀腺乳頭狀癌，并且其頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率非常的高，該文就主要對CEACAM-1與S100A4蛋白與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性進(jìn)行簡單分析。收集該院2013年3月—2013年10月收治的甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者102例，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

該次研究中隨機(jī)選取該院收治的甲狀腺乳頭狀癌手術(shù)切除標(biāo)本102例，一般情況，在開展甲狀腺乳頭狀癌切除手術(shù)之前或者是手術(shù)過程中，需要對患者的病情予以明確的診斷，在其基礎(chǔ)上，為患者實(shí)施頸部淋巴結(jié)掃描、甲狀腺的近全切或者是全切手術(shù)，其掃描范圍需要包含單側(cè)的改良頸清或者是中央淋巴結(jié)，因此在該次研究中，在研究人員的篩選工作中，需要能夠滿足以下的基本條件：①對患者的甲狀腺乳頭狀癌予以明確的診斷；②為甲狀腺的近全切標(biāo)本或者是甲狀腺的全切標(biāo)本，清掃范圍最少應(yīng)該包含單側(cè)的改良頸清或者是整個(gè)中央組淋巴結(jié)；③為了對淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的假陰性率予以有效的控制，并減少其發(fā)生率，無轉(zhuǎn)移組中所包含的淋巴結(jié)個(gè)數(shù)應(yīng)該＞6個(gè)，轉(zhuǎn)移組依據(jù)AJCC分歧中PN的條件，選擇性頸清中所包含的淋巴結(jié)個(gè)數(shù)至少應(yīng)該為6個(gè)，在改良根治頸清中所包含的淋巴結(jié)的個(gè)數(shù)至少應(yīng)該為10個(gè)[1]。

1.2 組織學(xué)評估

該次研究中的送檢標(biāo)本應(yīng)該放置于中性福爾馬林溶液（濃度10%，中國上海，YM-S1581）中予以處理，主要的處理方法包括：固定處理、脫水處理、石蠟包埋以及切片處理，以上處理完成之后，在HE染色鏡下對其予以觀察，所有標(biāo)本都應(yīng)該確診為甲狀腺乳頭狀癌，應(yīng)用基于特征形態(tài)學(xué)表現(xiàn)的診斷標(biāo)準(zhǔn)，出現(xiàn)特征性的核表現(xiàn)或者是真乳頭表現(xiàn)，例如核溝、核內(nèi)假包涵體、毛玻璃樣核等，所有標(biāo)本都要實(shí)施下列的臨床病理學(xué)評估：侵及甲狀腺包膜外、多灶、伴發(fā)橋本甲狀腺炎、組織亞型、腫物包膜完整、纖維化、中午直徑（＞1或者是≤1 cm）、性別、年齡（≥45歲或者是＜45歲）[2]。

1.3 免疫組化分析

免疫組化應(yīng)用Histofine Simple Stain MAX及EnVision兩步法，石蠟切片厚度為4 Lm,對其實(shí)施常規(guī)的脫蠟水化，應(yīng)用3%的過氧化氫孵育10 min以便于將內(nèi)源性的過氧化物酶予以阻斷，根據(jù)抗體的不同，應(yīng)用各種不同的抗原修復(fù)方法，抗原修復(fù)液應(yīng)用的是枸椽酸鹽緩沖液(規(guī)格Buffer Solution,pH4.00/pH 7.00，1 kg，含量99.9%)，一抗滴加之后，室溫下孵育1 h，之后在滴加辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗，也就是Histofine Simple Stain MAX及EnVision，室溫下孵育45 min之后，對于顯色、蘇木精復(fù)雜性、脫水、透明度、封固等的觀察室在DAB顯微鏡（美國Labomed顯微鏡，上海器仁儀器）下開展，在完成以上各個(gè)步驟的過程中，都應(yīng)該應(yīng)用PBS緩沖液實(shí)施沖洗，依據(jù)抗體說明書，陽性對照應(yīng)該采用不同的組織。

腫瘤組織中的S100A4染色細(xì)胞核及細(xì)胞質(zhì)中等以上強(qiáng)度著色，CEACAM-1膜著色、p27kip1及cyclinD1細(xì)胞核著色則看作是腫瘤細(xì)胞的陽性著色，一旦腫瘤細(xì)胞陽性著色的染色超出10%，則視作是陽性，應(yīng)用雙盲法對所有的免疫組化染色切片在十倍的物鏡重復(fù)觀察三遍以上，如果病例的判斷結(jié)果不一致，就需要重新開展免疫組化染色，以保證結(jié)果的正確性[3]。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

該次研究中相關(guān)數(shù)據(jù)的處理應(yīng)用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS13.0來進(jìn)行處理，首先應(yīng)用V2對相關(guān)變量實(shí)施與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)的單因素分析，實(shí)現(xiàn)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的變量的篩選，并將其納入到二項(xiàng)分類成組資料的非條件Logistic回歸模型中實(shí)施多因素分析[4]。計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，用百分比表示。

2 結(jié)果

CEACAM-1、S100A4蛋白在甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本中的檢測陽性率分別為51.0%、79.4%，通過實(shí)施單因素分析，發(fā)現(xiàn)年齡為45歲的患者、腫物直徑為1 cm的淋巴結(jié)的CEACAM-1的陰性表達(dá)與S100A4的陽性表達(dá)與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，p27kip1及cyclinD1的陽性表達(dá)、侵及甲狀腺包膜外、多灶、伴發(fā)橋本甲狀腺炎、組織學(xué)亞型、腫物包膜完整、纖維化、性別等與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)，通過進(jìn)一步的多因素研究發(fā)現(xiàn)，年齡為45歲的患者、腫物直徑為1 cm的淋巴結(jié)的CEACAM-1的陰性表達(dá)與S100A4的陽性表達(dá)是甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素，其病理學(xué)特征如表1所示；臨床病理參數(shù)及免疫組化表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系如表2所示[5]。

表1 102例甲狀腺乳頭狀癌的臨床病理學(xué)特征

表2 甲狀腺乳頭狀癌臨床病理參數(shù)及免疫組化表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系

3 討論

該次研究中通過對102例甲狀腺乳頭狀癌的各種臨床病理參數(shù)以及免疫組化表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性進(jìn)行分析，該研究結(jié)果與任立軍[6]等人的研究結(jié)果基本一致。研究結(jié)果表明，甲狀腺乳頭狀癌臨床病理參數(shù)及免疫組化表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系研究中，年齡、腫物直徑、S100A4邊緣及CEACAM-1幾個(gè)病例參數(shù)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有直接的影響。在轉(zhuǎn)移方面，年齡低于45歲的患者轉(zhuǎn)移率為67.2%，腫物直徑＞1 cm的轉(zhuǎn)移率為68.9%，S100A4邊緣陰性的轉(zhuǎn)移率為63.6%，CEACAM-1陰性的轉(zhuǎn)移率為59.0%。幾個(gè)指標(biāo)與對應(yīng)不轉(zhuǎn)移率相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。CEACAM-1陰性表達(dá)、S100A4陽性表達(dá)、腫物直徑超過1 cm的甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為相關(guān)關(guān)系，在對其實(shí)施多因素分析，可以將患者年齡45歲、腫物直徑為1cm的淋巴結(jié)的CEACAM-1的陰性表達(dá)與S100A4的陽性表達(dá)作為甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的獨(dú)立性危險(xiǎn)因素，這有利于甲狀腺乳頭狀癌患者的臨床診斷、治療及預(yù)后。

與其他形式的癌癥相比，甲狀腺乳頭狀癌的預(yù)后比較好，患者一旦確診，實(shí)施有效的治療，對于患者的長期生存具有非常重要的作用，同時(shí)能夠有效的改善患者的生活質(zhì)量，其轉(zhuǎn)移方式中最為常見的就是頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，目前臨床中關(guān)于甲狀腺乳頭狀癌患者頸部淋巴結(jié)的處理方式的選擇還存在一定的爭議，是否將清掃術(shù)應(yīng)用于臨床上沒有發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的甲狀腺乳頭狀癌患者中目前還沒有達(dá)成統(tǒng)一的意見，尋找甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的預(yù)測因素具有非常大的臨床意義[7]。

CEACAM-1蛋白及S100A4蛋白在甲狀腺乳頭狀癌中的免疫組化表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，CEACAM-1的陰性表達(dá)、S100A4的陽性表達(dá)對于甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有一定的提示作用，雖然該結(jié)論在臨床意義上還有待進(jìn)一步研究，但是通過檢測甲狀腺乳頭狀癌術(shù)前穿刺標(biāo)本中此兩種蛋白的不同表達(dá)，對于是否存在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具有良好的預(yù)測作用，這對于臨床選擇術(shù)式的準(zhǔn)確評價(jià)及預(yù)后具有非常重要的參考價(jià)值。

[1]張作峰，王剛平，張紅，等.COX-2、VEGF在多灶性甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的表達(dá)及意義[J].中華臨床醫(yī)師雜志：電子版，2012,5(2): 123-125.

[2]王麗，劉澤兵，羅金芳，等.c-src和c-met與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系[J].復(fù)旦學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2011，38(2):131-135.

[3]戴詠玲，李北寧，努爾曼·麥麥提祖農(nóng)，等.BRAF基因突變與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)性的研究[J].中國醫(yī)學(xué)創(chuàng)新，2014,8(31):29-30.

[4]吳延升，董俊峰，岳愷，等.CXCL12-CXCR4生物學(xué)軸與甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的相關(guān)性研究[J].中國腫瘤臨床，2011,38(23):1439-1442.

[5]楊傳家，宮建，李景姝，等.D2-40在甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中的作用[J].中國醫(yī)學(xué)工程，2013(4):1-2.

[6]任立軍，楊廷芳，張成雷.甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移規(guī)律的臨床研究[J].中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志，2012,18(4):419-422.

[7]白云城，張建明，蘇艷軍，等.淋巴示蹤劑在甲狀腺乳頭狀癌淋巴結(jié)清掃和病理檢查中的作用與比較[J].中國腫瘤臨床，2013,40(17):1034-1037.

R73

A

1672-5654（2014）12（b）-0131-02

2014-09-15）

孫永敏（1983-），河南鄭州人，本科，初級檢驗(yàn)技，師研究方向：免疫學(xué)。