妊娠期高血壓患者血管內皮細胞功能和氧化應激水平的變化

張連英，傅珂，何英杰，杜靜，黃廣勇

臨床研究

妊娠期高血壓患者血管內皮細胞功能和氧化應激水平的變化

張連英，傅珂，何英杰，杜靜，黃廣勇

目的探討妊娠期高血壓(PIH)患者血管內皮細胞功能和氧化應激水平的變化。方法收集PIH患者48例為PIH組，分為妊娠期高血壓期、子癇前期及子癇期3個亞組，另選擇30例正常孕婦作為健康對照組。測定并比較血漿內皮素(ET)、血栓烷A2(TXA2)、前列腺環素(PGI2)和氧化終產物丙二醛(MDA)含量。結果PIH患者ET、TXA2、MDA水平明顯高于健康對照組(P<0.05)，PGI2水平明顯低于健康對照組(P<0.01)，TXA2/ PGI2比值呈上升趨勢；子癇亞組的ET水平明顯高于妊娠高血壓亞組(P<0.05)，PGI2明顯低于妊娠高血壓亞組(P<0.05)。ET、TXA2和MDA呈明顯正相關(r=0.72，0.61；P<0.01)；PGI2與MDA呈負相關(r=0.48；P<0.05)。結論氧化應激和內皮功能紊亂在PIH發病中起了重要的作用，氧化應激與血管內皮功能紊亂密切相關。

妊娠期高血壓；內皮功能；氧化應激

妊娠期高血壓(pregnancy induced hypertension，PIH)是孕產婦和圍產兒病死率升高的主要原因之一，嚴重影響母嬰健康。目前該病的確切病因仍不清楚。關于其病因主要有以下幾種學說：子宮螺旋小動脈重鑄不足、炎性免疫過度激活、血管內皮細胞受損、遺傳因素、營養缺乏以及胰島素抵抗等[1]。

近年的研究發現血管內皮功能紊亂在PIH的發病機制中可能起重要作用，內皮素分泌增加可能是體內各種致病因子作用導致PIH的最終調節通路[2]。Heimrath等[3]研究發現，妊娠高血壓孕婦血液循環中的內皮細胞及內皮祖細胞明顯少于正常血壓的孕婦，血液循環中的內皮細胞及內皮祖細胞的減少消弱了內皮的更新與恢復，與妊娠高血壓疾病的發生有關。Henriques等[4]對30例PIH患者和30例健康孕婦進行了隊列研究，以肱動脈血流介導的舒張功能評價內皮功能，發現PIH患者內皮功能異常的比例明顯高于對照組，同時，PIH患者體質量指數、收縮壓水平、低密度脂蛋白膽固醇水平及糖耐量異常的比例也明顯高于對照組。另外，國外研究顯示，子癇前期患者胎盤及母體血清中的總氧化劑水平明顯升高，胎盤總抗氧化劑水平明顯減低[5]。雖然目前在這些方面有一些研究，但這些研究一般例數較少，對于血管內皮功能和氧化應激在PIH發病中的確切作用以及氧化應激與內皮功能的關系仍未確定。

本研究對PIH患者測定了反映血管內皮功能的血漿內皮素(ET)、血栓烷A2(TXA2)、前列腺環素(PGI2)和氧化終產物丙二醛(MDA)含量的變化，并與健康孕婦相比較，探討PIH 患者血管內皮細胞功能和氧化應激水平的變化，為PIH的防治提供理論依據。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機選擇2013年8月—2014年2月醫院婦產科住院治療的PIH患者共48 例(PIH組)，平均年齡(29.3±5.6)歲，平均孕周(34.1±1.8)周；診斷以《婦產科學》第8版為依據[1]，均無明顯的內外科疾病，4周內無急、慢性感染等疾病，將患者分為妊娠期高血壓期、子癇前期及子癇期3個亞組，分別為16例、20例和12例。另隨機選擇30例同期健康孕婦作為健康對照組，平均年齡(28.6±3.7)歲，平均孕周(35.5±2.2)周。PIH組和健康對照組患者年齡和孕周比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。入選者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 內皮功能指標測定 測定PGI2、TXA2和ET等3種能反映內皮功能的指標。由于PGI2和TXA2的不穩定性，目前難以直接測定，PGI2生物半衰期約3 min，迅速代謝為6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)，而TXA2生物半衰期約30 min，迅速代謝為活性的TXB2，故國內外均以測定6-keto-PGF1α和TXB2作為判斷其濃度的指標。本研究應用放免法測定PGI2(實際測定6-keto-PGF1α)、TXA2(實際測定TXB2)和ET，血樣放-70℃低溫冰箱保存。試劑購自解放軍總醫院放免研究所。

1.3 氧化應激指標測定 血漿中MDA測定采用改良的熒光光度法，采集患者外周血3 ml，EDTA-K2抗凝。血液樣品相對離心力(RCF)180×g離心5 min，分離血漿，24 h內檢測。按試劑盒說書應用熒光光度法檢測血漿MDA水平。

1.4 統計學方法 使用SPSS 13.0統計軟件進行統計。計量資料用均數±標準差表示，采用t檢驗或F檢驗。ET、TXA2、PGI2和MDA相關性采用Pearson相關分析。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 2組內皮功能及氧化應激指標比較 PIH組患者ET、TXA2水平明顯高于健康對照組(t=8.75,P<0.01；t=2.14,P<0.05)，PGI2水平明顯低于健康對照組(t=3.76,P<0.01)，TXA2/PGI2比值呈上升趨勢(t=2.36，P<0.05)；MDA水平明顯高于健康對照組(t=4.75,P<0.05)。子癇亞組的ET水平明顯高于妊娠高血壓亞組(t=2.38,P<0.05)，PGI2明顯低于妊娠高血壓亞組(t=2.26,P<0.05)，MDA明顯高于妊娠高血壓亞組和子癇前期亞組(t=2.83、3.29，P<0.01)。見表1。

2.2 PIH患者ET、TXA2、PGI2和MDA相關分析 相關分析顯示，ET、TXA2和MDA呈明顯正相關(r=0.72、0.61；P<0.01)；PGI2與MDA呈負相關(r=-0.48；P<0.05)，顯示氧化應激與血管內皮功能紊亂密切相關。

3 討 論

妊娠期高血壓直接影響孕婦及圍生兒的健康，該病的確切病因仍不清楚, 早期預防及治療手段仍很有限，國內外對該病一直進行研究[6]。Wang等[7]研究發現，PIH患者血清hs-CRP、sVCAM-1、NT-proBNP水平明顯高于健康孕婦，hs-CRP、sVCAM-1、NT-proBNP水平與PIH的嚴重程度呈正相關。國內研究顯示，妊娠期高血壓綜合征孕婦血清及胎盤滋養層細胞中基質金屬蛋白酶-9的表達明顯減少，基質金屬蛋白酶-9可能參與PIH的發生和發展[8]。國內研究顯示，PIH患者血清胱抑素C、B型尿鈉肽及尿微量白蛋白水平均明顯高于正常妊娠組，輕度、中度及重度依次遞增,監測血清胱抑素C、B型尿鈉肽及尿微量白蛋白可以預測嚴重程度及預后,具有一定臨床意義[6]。

近年來的研究發現血管內皮功能紊亂在PIH的發病機制中可能起重要作用，血管內皮細胞在調節血管舒縮、生長、血栓、炎性反應等多方面具有至關重要的作用，內皮細胞合成和釋放具有舒張血管、抗血小板聚集的PGI2和一氧化氮(NO)，同時合成和釋放具有強烈縮血管作用的ET等血管活性物質。TXA2主要是由激活的血小板合成釋放的一種具有強烈促進血管收縮和血小板聚集的生物活性物質，內皮功能失調以內皮依賴的血管舒張功能障礙為主。由于某些病理因素引起TXA2和PGI2平衡失調，即TXA2/PGI2比值增加，是造成血小板聚集、血管痙攣收縮或血栓形成的重要原因。國內研究顯示，妊娠期高血壓患者組血漿NO水平明顯低于正常妊娠組和健康對照組，重度妊娠期高血壓患者血漿NO水平明顯低于輕、中度妊娠期高血壓綜合征患者，妊娠期高血壓組血漿ET-1水平明顯高于正常妊娠組和正常對照組[9]。國內研究顯示，妊娠高血壓患者的血清血管內皮生長因子水平顯著高于健康孕婦，認為血清血管內皮生長因子水平與妊娠高血壓發病及病情發展有關[10]。國內對40 例PIH 患者和30例同期入院的正常孕婦測定了血漿ET-1、NO、超氧化物歧化酶(SOD)和MDA，結果顯示PIH 患者血漿SOD/MDA 和NO/ET-1 比例失調，表明PIH 患者體內存在氧自由基代謝和血管內皮功能紊亂[11]。

本研究結果發現，PIH患者ET、TXA2和TXA2/PGI2明顯上升，明顯高于健康對照組，PGI2明顯低于健康對照組，并且隨著PIH病情加重，引起血管收縮和血小板聚集的ET、TXA2升高，PGI2降低。子癇亞組的ET水平明顯高于妊娠高血壓亞組，PGI2明顯低于妊娠高血壓組；子癇亞組的TXA2水平明顯高于子癇前期亞組。說明PIH患者血管舒縮功能失調，血小板聚集、血管痙攣收縮增強，并且隨著病情加重，血管舒縮功能失調及血小板聚集更加明顯。

注：與健康對照組比較，aP<0.05,bP<0.01；與妊娠高血壓亞組比較，cP<0.05；與子癇前期亞組比較，dP<0.05,eP<0.01

氧化應激是指機體內自由基的產生和抗氧化防御之間嚴重失衡的一種病理狀態，在體內引發一系列脂質過氧化反應，最終產物為MDA，MDA為自由基作用于脂質發生過氧化反應的氧化終產物，為常用的氧化應激指標。機體內存在氧化應激損傷和抗氧化防御的過程，細胞通過幾種途徑減少氧化應激的損害，主要包括SOD、谷胱甘肽過氧化酶等。Watanabe等[12]研究發現，子癇前期孕婦血管舒張功能明顯減低、血清活性氧代謝衍生物濃度明顯升高，并于產后1個月左右逐漸恢復至與健康對照組相近水平；正常妊娠組則無此變化。陳朝霞[13]研究顯示，氧化應激與妊娠高血壓相關，PIH患者MDA水平明顯高于健康孕婦，而妊娠高血壓患者抗氧化物質包括維生素C和維生素E水平低于健康孕婦。

本研究顯示，PIH患者與健康對照組相比，血漿MDA明顯升高，子癇亞組的MDA水平明顯高于子癇前期亞組，說明氧化應激較強。進一步對ET和MDA進行相關分析顯示，ET和MDA呈明顯正相關(r=0.71；P<0.01)，PIH患者血管舒張功能(PGI2)與氧化應激產物MDA呈負相關(r=-0.41；P<0.05)。可見，孕期氧化應激的增強與內皮功能紊亂密切相關，氧化應激可能是導致血管內皮功能紊亂的重要因素。

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12 Watanabe K,Mori T,Iwasaki A,et al.Increased Oxygen free radical production during pregnancy May impair vascular reactivity in preeclamptic women[J].Hypertens Res,2013,36(4):356-360.

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252000 山東省聊城市第四人民醫院婦產科(張連英、傅珂、何英杰)； 山東省聊城市人民醫院婦產科(杜靜)， 心內科(黃廣勇)

黃廣勇，E-mail:13346256309@163.com

10.3969 / j.issn.1671-6450.2014.08.028

2014-04-04)