基因TCF7L2多態性與中國妊娠期糖尿病相關性的研究

劉曉慧李福平張煥靈

1.蛇口人民醫院產科，廣東深圳518067；2.深圳市婦幼保健院內科，廣東深圳518028

基因TCF7L2多態性與中國妊娠期糖尿病相關性的研究

劉曉慧1李福平2張煥靈1

1.蛇口人民醫院產科，廣東深圳518067；2.深圳市婦幼保健院內科，廣東深圳518028

目的探索基因TCF7L2rs11196218與中國漢族婦女妊娠期糖尿病(GDM)的關系。方法依據美國糖尿病學會2004年頒布的GDM標準進行診斷,將2009年6月—2012年6月收取的289例患者排除糖耐量異常以及I型糖尿病、胰腺炎及胰腺手術者，隨機分為對照組145例，病例組144例。且經rs11196218的單核苷酸多態性（SNPs），對等位基因在二組間頻率分布進行統計學處理。結果發現兩組之間對照組剖腹產69（47.9%），非剖腹產75（52.1%），病例組剖腹產94（66.7%），非剖腹產47（33.3%），病例組剖腹產比率高于對照組，差異具有統計學意義。且兩組間rs11196218位點基因的基因頻率AA、GG、GA，對照組分別為5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例組分別為9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差異不明顯，無統計學意義。而兩組間等位基因A及G分布頻率分別為對照組31.5（21.9%）、112.5(78.1%)，病例組38(26.4%)、106(73.6%)，差異無顯著統計學意義。結論未發現rs11196218與中國漢人GDM發病相關聯。高齡和雙胎妊娠是中國漢人婦女GDM的發病因素，合并GDM患者剖腹產率升高。

妊娠期糖尿病；單核苷酸多態性；rs11196218

妊娠期糖尿病（GDM）在全球發病率逐步升高。國內外的研究表明GDM與2型糖尿病（T2DM）有相似發病機理。轉錄因子7類似物2（Transcription factor 7 like2,TCF7L2）基因位于人類10號染色體q25.3區,其rs7903146多態性是至今人類發現與T2DM相關性最顯著的。但Ng[1]等人發現rs7903146點位在香港漢族人群中突變率很低。以往研究表明，很多單核苷酸多態性（SNPs）是外國人種某些疾病的遺傳基礎，但在中國漢人中研究結果不同。TCF7L2的另一點位rs11196218在課題申請時僅有Ng等報道與漢人T2DM相關[1]。有必要在漢人GDM中開展調查研究。該研究選取2009年6月—2012年6月在該院產科住院的孕產婦為研究對象，現將結果總結如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

研究對象為2009年6月—2012年6月在該院產科住院的孕產婦。于孕24～28周行75 g口服葡萄糖耐量試驗（OGTT）,依據美國糖尿病學會2004年頒布的GDM標準進行診斷。研究對象均為同期住院分娩孕產婦,排除糖耐量異常以及I型糖尿病，胰腺炎及胰腺手術者，其中病例組144例，年齡22～45歲，平均（31.88±4.21）歲，新生兒體重1740～4900 g,平均體重(3366.88±529.36)g;對照組為145例，年齡18～41歲，平均（28.78±4.23）歲，新生兒體重1050～4750 g，平均體重（3265.07±510.92）g，兩組患者的一般資料如年齡、新生兒體重等差異不明顯，無統計學意義（P＞0.05）。該研究獲醫院倫理學委員會批準，所有研究對象均簽署知情同意書。

1.2 研究方法

收集病例組和對照組的靜脈血，用酚氯仿法提取全血基因組DNA，采用美國sequenom公司MassARRAY時間飛行質譜技術，先通過PCR擴增，SAP酶處理，延伸引物單堿基，樹脂除鹽純化。芯片點樣，質譜儀檢測等實驗步驟，最終使用Typer.4軟件分析實驗數據，獲得分型結果。標本準確率為99.66%。引物序列如下。見表1。

表1 引物序列

1.3 統計方法

2 結果

2.1 研究對象的臨床特點

2.1.1 產婦年齡比較病例組144例,最小年齡22歲，最大年齡45歲,平均年齡（31.88±4.21）歲;對照組145例，最小年齡18歲，最大年齡41歲，平均年齡（28.78±4.23）歲；兩組年齡差異有統計學意義（t=6.248，P=0.0001）。

2.1.2 新生兒體重比較病例組141例，最大體重4900 g，最小體重1740 g，平均體重（3366.88±529.36）g；對照組144例，最大體重4750 g，最小體重1050 g，平均體重（3265.07±510.92）g；兩組嬰兒體重差異無統計學意義（t=1.652，P=0.100）。

2．1.3兩組間不同產式比較病例組剖腹產比率高于對照組，差異具有統計學意義（χ2=10.230，P=0.001），見表2。

表2 兩組間不同產式比較[n(%)]

2.2 Hardy-Weinberg平衡檢驗

經分析rs11196218的基因型在病例組和對照組的分布均符合Hardy-Weinberg平衡（P＞0.05）。

2.3 兩組間位點差異情況比較

rs11196218位點基因型頻率和等位基因頻率比較，見表3、4。

表3 兩組間位點差異情況比較

表4 等位基因分布頻率比較

2.4 與國內報道結果的比較

見表5。

3 結語

rs11196218基因型和等位基因分布頻率在GDM組和對照組無統計學顯著的差別，表明未發現rs11196218與中國漢人GDM發病相關聯。我們與張春[4]等報道的rs11196218的基因型頻率和等位基因頻率不相同。高齡和雙胎妊娠是中國漢人婦女GDM的發病因素，合并GDM患者剖腹產率升高。

4 討論

上述研究中除回園敕等和該研究的病例組為GDM外均為T2DM。Syeda Sadia Najam[3],等研究發現rs11196218的單核苷酸多態性與T2DM顯著性相關聯，其他研究均未發現該SNPs與T2DM或GDM有顯著的相關性。由以上結果可知，對照組和病例組采用GDM和非GDM方式相比較，對照組剖腹產69（47.9%），非剖腹產75（52.1%），病例組剖腹產94（66.7%），非剖腹產47（33.3%），病例組剖腹產比率高于對照組，差異具有統計學意義。且兩組間rs11196218位點基因的基因頻率AA、GG、GA，對照組分別為5(3.5%)、86(59.7%)、53(36.8%)，病例組分別為9(6.3%)、77(53.5%)、58(40.2%），差異不明顯，無統計學意義。而兩組間等位基因A及G分布頻率分別為對照組31.5（21.9%）、112.5(78.1)，病例組38 (26.4%)、106(73.6%)，差異無顯著統計學意義。以上結果均與花巍，竇昊穎，黃海超，等[7]在關于細胞周期素依賴性激酶5調節亞單位相關蛋白1類似物1基因多態性與2型糖尿病相關性的研究進展中的相關數據相一致，具有臨床意義。且國內外已有的研究表明T2DM與GDM有著相似的發病機理。

表5 與國內報道結果比較

與其他學者報道的差異如何解釋?有人從該SNPs對研究的所有人群(包括病例組和對照組)某些影響糖代謝的生理特征如早相胰島素分泌量進行定量研究。巳知GDM和T2DM一樣是受多基因遺傳影響的[7-9],假定G純合子可使早相胰島素分泌量產生一定量減少,但由于其對疾病發生貢獻量很小，且影響疾病的其他基因均正常或同時攜帶有抑制糖尿病的遺傳基因，各種基因相互作用，從整體水平上不會發生GDM[10]。也就會出現有國人報道對致糖尿病的某一生理特征有影響，該研究發現在整體水平上等位基因在兩組間分布無顯著差別的情況。由于條件限制該研究標本量小，也應擴大標本量來得出更可靠結論。

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[4]張春，梁旭霞.脂聯素基因單核苷酸多態性與妊娠期糖尿病相關性的臨床意義[J].醫學綜述,2014(5):870-872.

[5]孫璐璐，喬虹.C2CD4A/C2CD4B基因多態性與2型糖尿病相關性的研究[J].中國糖尿病雜志,2014(4):379-381.

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Study on the correlation between gestational diabetes mellitus andChinese gene TCF7L2 polymorphism

LIU Xiaohui1LI Fuping2ZHANG Huanling1
1.Obstetric Shekou people's Hospita，Shenzhen 518067，China；2.Shenzhen City Maternal and Child Health Hospital Department of Internal Medicine，Guangdong 518028，China

ObjectiveExploration of gestational diabetes gene TCF7L2rs11196218 and China women of Han(GDM)relationship.MethodsOn the basis of diagnosis American Diabetes Association issued in 2004 by the GDM standard,will be charged 289 patients excluded IGT and type I diabetes,pancreatitis and pancreatic operation,were randomly divided into control group of 145 cases,144 cases.And the single nucleotide polymorphism of rs11196218(SNPs),allele frequency distribution in the two groups were statistically.ResultsFound between the 2 groups control group,caesarean section 69(47.9%),noncaesarean section 75(52.1%) cases of caesarean section,94(66.7%),non caesarean section 47(33.3%)cases,the rate of cesarean section was higher than the control group,with significant difference.And the gene frequency of AA,GG,GA between the two groups of rs11196218 genes,the control group were 5(3.5%),86(59.7%),53(36.8%),the case group were 9(6.3%),77(53.5%),58(40.2%),the difference was not significant,no statistical significance.And between the two groups of A and G allele distributionfrequencies were 31.5 in the control group 21.9%,112.5(78.1%),38(26.4%)cases,106(73.6%),no significant difference statistically significant.ConclusionNo rs11196218 is associated with the pathogenesis of GDM China Han found.The elderly and twin pregnancy were factors in China Han women in GDM patients with GDM,increased cesarean section rate.

Gestational diabetes mellitus;Single nucleotide polymorphism;rs11196218

R473.74

A

1672-5654（2014）12（c）-0007-03

2014-09-11）

劉曉慧，女，50歲，主任醫師，本科，蛇口人民醫院產科主任，研究方向：高危妊娠。