化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法檢測便隱血的臨床比較

張野

鐵嶺市婦嬰醫院檢驗科，遼寧鐵嶺112000

化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法檢測便隱血的臨床比較

張野

鐵嶺市婦嬰醫院檢驗科，遼寧鐵嶺112000

目的探討化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法檢測便隱血的臨床效果。方法選取該院2013年5月—2014年5月間收治的大便標本90例作為研究對象，通過靈敏性、干擾性和特異性對化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法三種試驗方法進行比較，并采用三種試驗方法同時對90例大便標本進行便隱血檢測。結果聯合免疫法、化學法以單克隆抗體法三種方式檢測出血紅蛋白的最低檢出濃度分別為2、20、0.2；化學法對人和動物的血紅蛋白可發生反應，聯合免疫法和單克隆抗體僅和人的血紅蛋白發生反應；單克隆抗體法和聯合免疫法不受維生素C的干擾，當維生素C濃度超過10 mg/mL可引起化學法的陰性結果，而對聯合免疫法和單克隆抗體的檢測無影響。50例大便標本作為健康對照組，22例診斷為上消化道出血，記為上消化道出血組，18例診斷為下消化道腫瘤性病變，記為下消化道腫瘤性病變組，其中，化學法檢出陽性例數30例、22例、18例，單克隆抗體法檢出陽性例數17例、10例、15例，聯合免疫法檢出陽性例數25例、22例、18例。結論聯合免疫法具有較好的特異性且靈敏度比較高，抗干擾性比較強，具有良好的發展前景，在臨床上有良好的應用價值。

化學法；單克隆抗體法；聯合免疫法；便隱血

臨床上，便隱血主要是檢測消化道出血的常規診斷指標，同時也是消化道惡性腫瘤早期診斷的重要篩查指標。隨著醫療技術的快速發展，化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法檢測便隱血具有顯著的臨床效果。其中，化學法以匹拉米洞法為主要檢測方法，但極易受到食物和藥物的影響，發假陽性反應[1]。而單克隆抗體法雖不受食物影響，但血紅蛋白極易產生變性，發生假陰性反應[2]。聯合免疫法則不受食物和藥物影響，對便隱血的檢測擁有良好的應用價值。對此，為了對比分析化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法檢測便隱血的臨床效果，現選取該院2013年5月—2014年5月間收治的大便標本90例作為研究對象。現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取該院收治的大便標本90例作為研究對象，通過靈敏性、干擾性和特異性對化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法三種試驗方法進行比較，并采用三種試驗方法同時對90例大便標本進行便隱血檢測。其中，50例大便標本作為健康對照組，為臨床未診斷有任何消化道疾病的常規檢測標本；22例診斷為上消化道出血，記為上消化道出血組，18例診斷為下消化道腫瘤性病變，記為下消化道腫瘤性病變組；血紅蛋白由正常人血液制成，以人、兔、羊、雞等動物血液制成濃度不同的血紅蛋白和維生素C。其中，前者用于靈敏性試驗，后者用于干擾性試驗。

1.2 試劑和方法

聯合免疫法主要以華普曼生物工程有限公司提供的聯合免疫法診斷試紙，按照說明書操作，結果判讀參照說明書，單克隆抗體法采用華普曼生物工程有限公司提供的“速而準”便隱血單克隆抗體試劑盒，嚴格按照使用說明測定，5 min內讀取結果。兩條紫紅色條帶出現為陽性，一條紫紅色條帶出現為陰性。化學法采用珠海貝索的貝索大便隱血Ⅱ號試紙進行檢測，利用紙卡作為大便檢體的輸送容器，其陽性反應最終呈色為紫紅色。

1.3 靈敏性、特異性和干擾性試驗

1.3.1 靈敏性試驗取已知濃度轉鐵蛋白，采用蒸餾水將其稀釋成500、200、100、20、2和0.25種濃度的大便懸浮液，用化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法分別對其進行測定。

1.3.2 特異性試驗用化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法這三種方法對500的人、兔、羊、雞血紅蛋白液反應。

1.3.3 干擾性試驗在含500的大便混懸液中加入4種不同濃度的維生素C，用化學法、單克隆抗體法和聯合免疫法這三種方法對其進行測定。

1.4 統計方法

數據均采用統計學軟件SPSS18.0處理，計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 三種便隱血試驗靈敏性比較

聯合免疫法、化學法以單克隆抗體法三種方式檢測出血紅蛋白的最低檢出濃度分別為2、20、0.2。其中，“+”為陽性，“-”為陰性，見表1。

表1 三種檢測方法人的血紅蛋白液（μg/mL）

2.2 三種便隱血試驗特異性比較

化學法對人和動物的血紅蛋白可發生反應，聯合免疫法和單克隆抗體僅和人的血紅蛋白發生反應。其中，“+”為陽性，“-”為陰性，見表2

表2 三種檢測方法檢測人和動物的血紅蛋白（μg/mL）

2.3 三種便隱血試驗抗干擾性比較

單克隆抗體法和聯合免疫法不受維生素C的干擾，當維生素C濃度超過10 mg/mL可引起化學法的陰性結果，而對聯合免疫法和單克隆抗體的檢測無影響。其中，“+”為陽性，“-”為陰性，見表3。

表3 三種便隱血試驗抗干擾性比較（mg/L）

2.4 三種便隱血試驗檢測陽性率比較

50例大便標本作為健康對照組，22例診斷為上消化道出血，記為上消化道出血組，18例診斷為下消化道腫瘤性病變，記為下消化道腫瘤性病變組，化學法檢出陽性例數30例、22例、18例，單克隆抗體法檢出陽性例數17例、10例、15例，聯合免疫法檢出陽性例數25例、22例、18例。聯合免疫法檢測陽性率和單克隆抗體法差異有統計學意義（P＜0.05），化學法和單克隆抗體差異有統計學意義（P＜0.05）。

表4 三種便隱血試驗檢測陽性率比較[n(%)]

3 討論

通常情況下，單克隆抗體和聯合免疫法兩種檢測便隱血的方法，主要為了檢測人體血紅蛋白抗原，而聯合免疫法除了檢測人體血紅蛋白抗原外，還檢測人轉鐵蛋白，具有較強的特異性和靈敏性，不會受到食物和藥物等因素的影響，基于這種優勢，單克隆抗體和聯合免疫法兩種檢測方法均被廣泛應用于各個醫院中。但也有不足之處，當患者正常生理失血時，很容易產生假陽性結果；而單克隆抗體法極易因血紅蛋白變性產生假陰性結果；化學法則很容易受到藥物和食物的影響，進而產生假陽性結果。因此，化學法多以匹拉米洞組為代表，其原理是利用匹拉米洞為呈色指示劑，在酸及過氧化氫溶液作用下，與血紅蛋白作用，產生紫藍而后呈現紫紅的顏色[3]。但匹拉米洞化學法跟其他化學法一樣都是基于過氧化物酶活性的測定[4]，此法不具有特異性，其靈敏度比較低[5]，不易進行質量管理等問題。所以，聯合免疫法具有較好的特異性且靈敏度比較高，抗干擾性比較強，具有良好的發展前景，在臨床上有良好的應用價值。

從研究中可以看出，22例上消化道出血組利用聯合免疫法、化學法和單克隆抗體法檢測陽性率分別為100%、98.5%、75.6%，其中聯合免疫法和單克隆抗體法差異有統計學意義（P＜0.05）。化學法和單克隆抗體法差異有統計學意義（P＜0.05），而18例下消化道出血利用聯合免疫法、化學法和單克隆抗體法檢測陽性率分別為100%、96.4%、82.5%，化學法和單克隆抗體法、化學法與聯合免疫法之間差異有統計學意義（P＜0.05）。而對照組采用聯合免疫法、化學法和單克隆抗體法檢測陽性率分別為52.8%、65.8%、21.4%。化學法與單克隆抗體差異有統計學意義（P＜0.05）。由此可見，聯合免疫法中的轉鐵蛋白在糞便中的穩定性高于血紅蛋白，所以同時檢測轉鐵蛋白可以減少由于血紅蛋白抗原性消失而出現的假陰性結果，提高檢出的精度[6]。而單克隆抗體法利用抗人血紅蛋白或抗人紅細胞基質抗體與膠體金結合，可檢測微量的血紅蛋白，對人體微量的消化道出血更敏感。而化學法則受的影響因素較多[7]。所以，三種檢測方法各有其獨自的適用性[8]。

綜上所述，化學法快捷方便，但對人和動物的血紅蛋白可發生反應，靈敏度比較低，而單克隆抗體能夠直接測定人體血紅蛋白，靈敏度比較高，不易受外界因素干擾，但很容易受到血紅蛋白抗原性變化，出現假陰性結果。而聯合免疫法則彌補了以上方法的不足，一旦化學法和單克隆方法的測定結果有疑問時，則可以結合患者實際病情測定結果，采用聯合免疫法作為有效互補，進一步提高檢測便隱血的準確性。

[1]劉蘭英.糞便隱血試驗聯合檢測的臨床應用探討[J].醫藥前沿,2011,15 (23):190-191.

[2]畢紅琳，林玲.3種大便隱血檢測方法的比較[J].檢驗醫學與臨床,2010,26 (22):2495-2497.

[3]鄧紅艷，赫蘭輝.糞便隱血試驗聯合檢測的臨床應用[J].檢驗醫學與臨床,2013,10(10):1315-1316.

[4]李功軍，鄒偉.探討大便隱血的檢測方法[J].醫藥前沿,2014,11(13):34-35.

[5]陳健康，肖敏敏.免疫膠體金法檢測糞便隱血的應用評價[J].檢驗醫學與臨床,2010,7(11):1113-1114.

[6]潘崖，馮家伍.血紅蛋白聯合轉鐵蛋白便隱血實驗在大腸癌檢測中的應用[J].醫藥前沿,2009,49(16):46-47.

[7]吳萍，宓慶梅，周琳，等.糞便中血紅蛋白與轉鐵蛋白聯合檢測對于消化道出血的診斷價值[J].求醫問藥：學術版，2012,10(12):361-362.

[8]袁樂永，李艷，徐萬洲，等.臨床三種常規大便隱血檢測方法的評價及其應用[J].現代檢驗醫學雜志,2012,27(2):73-76.

R446.6

A

1672-5654（2014）12（c）-0183-02

2014-09-25）

張野（1979-），滿族，本科，主管檢驗技師，研究方向：臨床基礎檢驗。