甲真菌病400例致病真菌分析

馬越娥 李秀麗顧俊瑛 劉至昱 高 飛 王茠茠

甲真菌病400例致病真菌分析

馬越娥 李秀麗?顧俊瑛 劉至昱 高 飛 王茠茠

目的: 確定上海地區(qū)甲真菌病的致病菌種。方法: 對(duì)本院皮膚科門診就診的直接鏡檢陽(yáng)性的400例甲真菌病患者的甲標(biāo)本做真菌分離培養(yǎng)和分析。結(jié)果: 分離出致病真菌233株,其中皮膚癬菌120株(紅色毛癬菌104株,須癬毛癬菌10株,犬小孢子菌3株,絮狀表皮癬菌3株),酵母菌68株,非皮膚癬菌11株(曲霉6株,青霉5株),其余為絲狀真菌。結(jié)論: 上海地區(qū)甲真菌病的致病真菌以皮膚癬菌為主,酵母菌中非白念珠菌占有一定比例。

甲真菌病； 皮膚癬菌； 酵母菌； 非皮膚癬菌

甲真菌病是皮膚科常見(jiàn)病,對(duì)患者的生活產(chǎn)生一定的影響,日益引起人們的重視。甲真菌病的流行因地區(qū)不同而不同,為了解上海地區(qū)甲真菌病的菌種構(gòu)成及變化趨勢(shì),現(xiàn)對(duì)我院皮膚科真菌室自2011年12月至2012年5月400例甲屑培養(yǎng)陽(yáng)性病例的病原菌構(gòu)成比進(jìn)行分析,報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 病例選擇 400例甲真菌病患者直接鏡檢陽(yáng)性,其中男144例,女256例。男女比例1∶1.8,年齡3～82歲,平均40.7歲。病甲甲屑116份來(lái)源于指甲, 284份來(lái)源于趾甲。

1.2 標(biāo)本收集 75%酒精徹底消毒病甲,然后用鈍刀盡可能多的刮取病變部位的甲屑于潔凈玻片上。遠(yuǎn)端側(cè)位甲下型:伸入遠(yuǎn)端甲板內(nèi)側(cè),刀口朝上刮取甲床甲屑；白色淺表型:取甲板表面甲屑；近端甲下型:先削去正常甲板,再?gòu)慕思状踩〔模蝗谞I(yíng)養(yǎng)不良型:取整甲表面甲屑。

1.3 培養(yǎng)方法 自制沙保弱斜面培養(yǎng)基(葡萄糖40 g,蛋白胨10 g,瓊脂12～15 g,200 mg氯霉素,加入1000 mL蒸餾水加熱溶解,121℃,10 min高壓滅菌后分裝斜面培養(yǎng)管,冷卻備用)。將所取甲屑同時(shí)接種于兩管斜面培養(yǎng)基,每管最少接種3點(diǎn)。分別放置于27℃和37℃恒溫箱培養(yǎng),每日取出觀察。4周以上無(wú)菌落生長(zhǎng)判定為無(wú)真菌。

1.4 菌種鑒定 菌種鑒定主要依據(jù)菌落形態(tài)、生長(zhǎng)速度的快慢、菌落顏色、鏡下菌絲和孢子的結(jié)構(gòu)特點(diǎn),鏡下菌絲或孢子形態(tài)不典型者做小培養(yǎng)進(jìn)一步觀察鑒定。酵母菌鑒定采用科瑪嘉念珠菌顯色培養(yǎng)基,嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)判讀結(jié)果。

2 結(jié)果

見(jiàn)表1。

表1 甲真菌病病原菌分布情況

400例病甲標(biāo)本經(jīng)真菌培養(yǎng)鑒定,233例有真菌生長(zhǎng),培養(yǎng)陽(yáng)性率為58.25%。分離出病原菌233株,其中皮膚癬菌120株,占51.50%,酵母菌68株,占29.19%,非皮膚癬菌45株,占19.31%,其中黑曲霉6株,青霉5株。

3 討論

甲真菌病是皮膚科門診常見(jiàn)病,在皮膚真菌感染疾病中占20%～30%,且有逐年增加的趨勢(shì)。1致病真菌主要為皮膚癬菌、酵母菌和非皮膚癬菌,皮膚癬菌包括紅色毛癬菌、須癬毛癬菌、犬小孢子菌等常見(jiàn)致病菌,酵母菌主要為念珠菌、馬拉色菌。國(guó)內(nèi)相關(guān)資料表明,絕大多數(shù)致病真菌為皮膚癬菌,而在皮膚癬菌中,紅色毛癬菌占絕對(duì)優(yōu)勢(shì),其次是酵母菌,酵母菌中以白念珠菌為主,然后是非皮膚癬菌。2,3本組分析結(jié)果顯示,在上海地區(qū),皮膚癬菌仍是首要致病菌,且以紅色毛癬菌為主,與其他地區(qū)報(bào)道基本一致,但較李福秋等報(bào)道2的比例(約80%)要低。其次為酵母菌,其中非白念珠菌有所上升,白念珠菌所占比例低于以往報(bào)道。2,4非皮膚癬菌中曲霉、青霉共有11株,其余均為絲狀真菌。此34株絲狀真菌在菌落形態(tài)及鏡下結(jié)構(gòu)均與臨床上常見(jiàn)皮膚癬菌不同,由于沒(méi)有能具體鑒定到種,在此歸為非皮膚癬菌。

甲真菌病的診斷主要依靠臨床表現(xiàn)、真菌鏡檢及培養(yǎng)。隨著診斷技術(shù)的不斷提高,酵母菌、霉菌等檢出率有所上升,但如何區(qū)分其是致病菌還是污染菌,仍沒(méi)有統(tǒng)一的判定標(biāo)準(zhǔn),這也導(dǎo)致各地區(qū)報(bào)道有差異。但一般來(lái)講,分離出皮膚癬菌即可確認(rèn)為致病菌,因此皮膚癬菌的確認(rèn)是比較統(tǒng)一的,近幾年流行病學(xué)調(diào)查發(fā)現(xiàn)皮膚癬菌仍然是主要致病菌,但其所占比例有所下降,2酵母菌和非皮膚癬菌的比例有逐年增加的趨勢(shì),大多數(shù)國(guó)內(nèi)報(bào)道4,5顯示酵母菌中非白念珠菌的構(gòu)成比有所上升,白念珠菌感染降低,與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致,提示在甲真菌病治療中,應(yīng)更加重視霉菌及其他非皮膚癬菌等致病真菌菌種的變化趨勢(shì),盡可能選擇廣譜抗真菌藥物。

甲真菌病的發(fā)病及致病真菌的分布受年齡、季節(jié)、性別等影響。本組結(jié)果顯示甲真菌病門診患者中女性就診率大于男性。近年來(lái),兒童甲真菌病的發(fā)病率有所上升,而且由于兒童免疫系統(tǒng)未發(fā)育完善,多個(gè)甲可在短時(shí)間內(nèi)受累,致使就診率增加,患病原因主要是由于家長(zhǎng)接觸感染。6老年人由于年齡增長(zhǎng),免疫力降低,誘發(fā)甲真菌病的因素增多(如糖尿病等),且大多是由于自身甲真菌感染引起其他部位的體癬而來(lái)就診。

1 Kaur R,Kashyap B,Bhalla P.Onychomycosis－－epidemiology, diagnosis and management.Indian J Med Microbiol,2008,26 (2):108－116.

2李福秋,曲生明,李若愚,等.2004年中國(guó)部分地區(qū)甲真菌病致病菌調(diào)查.中華皮膚科雜志,2006,12(39):720－721.

3吳紹熙,劉維達(dá),郭寧如.中國(guó)部分地區(qū)甲真菌病致病菌流行病學(xué)調(diào)查.中國(guó)社區(qū)醫(yī)師,2008,22(13):17.

4夏修蛟,陶茂燦.分離出酵母的甲真菌病分析.中華皮膚科雜志,2005,11(38):695.

5徐明,張弘,陳靜.505例甲真菌病真菌培養(yǎng)結(jié)果分析.福建醫(yī)藥雜志,2009,31(1):102－103.

6 Romana C,PapiniM,Ghilardi A,et al.Onychomycosis in children:a survey of 46 cases.Mycoses,2005,48(6):430－437.

(收稿:2012－06－12)

Analysis of pathogenic fungal strains in 400 patients of onychom ycosis

MA Yue-e,LIXiu-li,GU Jun-ying,et al.Department of Dermatology,Tenth People's Hospital of Tongji University,Shanghai,200072

Objective:To determine the pathogenic fungal strains isolated from onychomycosis in Shanghai.Methods:Fungal culture was performed on 400 patients of onychomycosis with positive results by directmicroscopic examination.Results:A total of 233 strains of fungiwas isolated,ofwhich 120 strainswere dermatophytes(Trichophyton rubrum in 104 isolates,Trichophyton mentagrophytes in 10,Microsporum canis in 3 and Epidermophyton floccosum in 3),68 were Saccharomycetes,11 were non－dermatophytes(Aspergillus 6 and Mould 5)and the restwere filamentous fungi.Conclusion:In Shanghai,the dominated pathogenic fungus of onychomycosis is Trichophyton rubrum,and the non－Candida albicans accounts for a proportion of the yeast.

onychomycoses；dermatophytes；yeast；non－dermatophytes

同濟(jì)大學(xué)第十人民醫(yī)院皮膚科,上海,200072

?通信作者