不同血細胞分析儀比對分析及偏差評估

沈觀樵，金海勇，童海江

不同血細胞分析儀比對分析及偏差評估

沈觀樵，金海勇，童海江

目的評價同一實驗室不同血細胞分析儀檢測結(jié)果的可比性和臨床可接受性。方法按照NCCLSEP9-A2的文件要求，每天選取8例新鮮全血標本，共測定5 d。以Coulter LH750血細胞分析儀為參比儀器，Sysmex XE-2100、Mindray BC-5800儀器為比對儀器，對白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細胞壓積（Hct）、血小板（PLT）5個主要參數(shù)進行比較，根據(jù)美國臨床實驗室改進修正法案(CLIA`88)標準的1/2進行判斷。結(jié)果與Coulter LH750比較，其他兩臺血細胞分析儀檢測結(jié)果均與其有良好的相關(guān)性（＞0.975），相對偏差均＜1/2 CLIA`88的允許誤差。結(jié)論3臺血細胞分析儀主要參數(shù)的相對偏差為臨床可接受范圍，測定結(jié)果具有可比性。

血細胞分析儀；比對；偏倚（流行病學(xué)）；質(zhì)量控制

隨著檢驗醫(yī)學(xué)的發(fā)展和血常規(guī)標本量的日益增加，同一實驗室配置多臺血細胞分析儀的現(xiàn)象漸趨普遍。由于不同廠家血球分析儀使用各自的檢測系統(tǒng)，檢測原理和方法也不盡相同，使檢測結(jié)果存在一定差異。雖然室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)控在避免偶然誤差和系統(tǒng)誤差方面發(fā)揮重要作用，但是室內(nèi)和室間質(zhì)控卻難以滿足不同儀器之間的結(jié)果比對。為確保同一標本在本科室不同血細胞分析儀的檢驗結(jié)果準確性和可比性。按照NCCLS EP9-A2的文件要求[1]對3臺血球分析儀的主要參數(shù)進行比對分析和偏差評估，確保實驗室內(nèi)測定結(jié)果的準確性和可比性，加強質(zhì)量控制，現(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取浙江省紹興第二醫(yī)院患者當天EDTA-K2抗凝新鮮全血標本，要求室溫放置時間＜2 h，選擇含有高、中、低濃度的標本。不選用含有小紅細胞、紅細胞碎片、巨大血小板、血小板聚集及高血脂等任何可能檢測方法有干擾的標本。時間從2013年11月1—5日，共40個標本。

1.2 儀器與試劑美國CoulterLH750、日本Sysmex XE-2100、國產(chǎn)Mindray BC-5800血細胞分析儀各1臺，3臺儀器均選取原廠配套試劑、校正品、質(zhì)控品。使用浙江康是公司EDTA-K2真空管。

1.3 方法按照美國臨床化學(xué)標準化委員會（NCCLS）EP9-A2方案，每天選取8個高、中、低濃度的標本，同時用Coulter LH750、Sysmex XE-2100、Mindray BC-5800 3臺血細胞分析儀按常規(guī)標本檢測，標本排序按“1→8”順序測定，再按“8→1”相反順序重復(fù)測定，連續(xù)測試5 d。以參加省室間質(zhì)量評價優(yōu)秀的Coulter LH750血細胞分析儀為參比儀器，Sysmex XE-2100、Mindray BC-5800分別為比對儀器。過程中每次用原裝配套質(zhì)控品對試驗數(shù)據(jù)進行監(jiān)控。取白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細胞壓積（Hct）、血小板（PLT）5個項目，進行比對分析和偏差估計。

1.4 統(tǒng)計方法應(yīng)用Excel軟件先作方法內(nèi)離群點檢測，以4倍儀器內(nèi)2次檢測數(shù)據(jù)的平均絕對差為標準，再作方法間離群點檢測，以4倍參比儀器與比較儀器的平均絕對差為標準，目測儀器內(nèi)部離群點及儀器間離群點，如某個數(shù)據(jù)偏差超出相應(yīng)平均偏差4倍時，從數(shù)據(jù)中刪除，如出現(xiàn)兩組或以上離群值，查找原因，并增加檢測批次，使所有統(tǒng)計數(shù)據(jù)達到有效。應(yīng)用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件進行處理，以參比儀器檢測數(shù)據(jù)為軸，比對儀器檢測數(shù)據(jù)為軸，作相關(guān)分析，計算回歸方程=b+a，求相關(guān)系數(shù)（）。按照EP9-A2文件規(guī)定，若≥0.975時即可將各個給定的醫(yī)學(xué)決定水平濃度代入回歸方程計算預(yù)期偏倚（SE=︱XCYC︱）和相對偏差（SE%=︱XC－YC︱/XC×100%），以美國臨床實驗室修正法規(guī)CLIA'88規(guī)定的相對偏差SE%小于CLIA'88規(guī)定的室間質(zhì)量評價標準的1/2為臨床可接受誤差[2]。判斷標準：WBC≤7.5%，RBC≤3%，Hb≤3.5%，HCT≤3.0%，PLT≤12.5%。

2 結(jié)果

2.1 離群值檢驗按照EP9-A2文件要求進行方法內(nèi)和方法間離群值檢查，本次試驗WBC、RBC、Hb、HCT及PLT主要項目都無方法內(nèi)和方法間離群值。

2.2 相關(guān)性比較XE-2100、BC-5800比對儀器與LH750參比儀器比較的五個主要項目參數(shù)均＞0.975，說明所選標本濃度范圍合適，見表1。

2.3 各項目在給定醫(yī)學(xué)決定水平的相對偏差用回歸方程以血細胞5個主要項目在醫(yī)學(xué)決定水平處的數(shù)值計算相對偏差，以相對偏差SE%小于CLIA'88規(guī)定的室間質(zhì)量評價標準的1/2為臨床可接受誤差。XE-2100和BC-5800的相對偏差均小于規(guī)定的允許誤差。見表2。

3 討論

血細胞分析是臨床最常見的檢測指標之一，由于不同的血球分析儀使用各自檢測系統(tǒng)，采用的檢測原理（電阻抗、光散射、高頻波及細胞化學(xué)染色等技術(shù)）和試劑性質(zhì)不盡相同[3]，致使分析結(jié)果潛在不同程度差異，要保證不同血球分析

儀間同一檢測項目結(jié)果具有可比行，除了完善的室內(nèi)和室間質(zhì)量檢測體系，還需要建立合理的比對程序，使同一標本在不同儀器測定結(jié)果偏差控制在臨床允許范圍內(nèi)，使測定結(jié)果在同一實驗室具有可比性和連續(xù)性。

本科室的CoulterLH750血細胞分析儀進行配套原廠校準品校準，并連續(xù)參加省室間質(zhì)評成績優(yōu)秀，其作為參比儀器[4]。即用可溯源的儀器CoulterLH750對本實驗室其他血球分析儀Sysmex XE-2100、Mindray BC-5800進行比對。按照EP9-A2的文件要求，對血細胞分析的5個主要項目參數(shù)進行比對分析。3臺儀器測試項目參數(shù)方法內(nèi)和方法間均無離群點，說明3臺儀器精密度比較恒定[5]。本文顯示，LH750與其他2臺儀器的五個測定項目結(jié)果相關(guān)密切（均＞0.975）。說明X測定范圍合理，回歸方程的斜率和截距較為可靠，可以進一步在醫(yī)學(xué)決定水平計算相對偏差。以相對偏差SE%小于CLIA'88規(guī)定的室間質(zhì)量評價標準的1/2為臨床可接受誤差。本文還發(fā)現(xiàn)，5個主要參數(shù)的相對偏差均在臨床可接受誤差。實現(xiàn)了本實驗不同血球分析儀檢測系統(tǒng)中各項目結(jié)果的可比性[6]。

在檢驗儀器實現(xiàn)自動化的今天，同一標本在不同分析儀上的測定結(jié)果可能會產(chǎn)生臨床不可接受的誤差，因此實驗室必須建立比對程序制度并定期進行比對[7]，新鮮全血在同一實驗室不同血細胞分析儀間的傳遞，實現(xiàn)了可溯源性，使各檢測系統(tǒng)之間具有可比性。

表1 兩臺比對儀器與LH750參比儀器的相關(guān)性比較

表2 兩臺比對儀器與LH750參比儀器各檢測項目在醫(yī)學(xué)決定水平處的相對偏差比較

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10.3969/j.issn.1671-0800.2014.11.070

R446

A

1671-0800(2014)11-1448-02

312000浙江省紹興，紹興第二醫(yī)院

童海江，Email:thjsxey@ 163.com