Graves病患者血清IL-3、IL-2及sIL-2R的表達研究

章步文，馮云飛

Graves病患者血清IL-3、IL-2及sIL-2R的表達研究

章步文，馮云飛

目的探討Graves病患者治療前后血清白介素（IL）-3、IL-2及白介素2受體（sIL-2R）的表達研究。方法

白介素；Graves病；白介素2受體

并且與甲狀腺疾病發病及病情控制密切相關[1]。本研究旨在了解甲狀腺疾病患者免疫功能狀態與IL-3等細胞因子的關聯及其臨床意義，為GD患者診斷與治療中臨床應用IL-3等細胞因子指標提供理論依據。現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料初診GD患者均為浙江省湖州市中醫院2008年10月至2009年6月內科門診和住院散發的無親緣關系的患者，共37例納入觀察組，其中男14例，女23例；年齡15～63歲，平均（39.2±14.0）歲。另設健康對照組37例，均為隨機選取在本院體檢的健康查體者，心、肝、腎功能正常，無甲狀腺疾病及甲狀腺疾病家族史，甲狀腺功能正常，甲狀腺自身抗體陰性。其中男15例，女22例；年齡25～57歲，平均（37.6±12.9）歲。兩組一般資料差異無統計學意義（＞0.05），具有可比性。

根據臨床表現及檢測血清總甲狀腺素（TT4）、總甲狀腺三碘原氨酸（TT3）、游離甲狀腺素（FT4）、游離甲狀腺三碘原氨酸（FT3）、超敏促甲狀腺素（sTSH）而確診GD。其診斷符合下列標準：（1）有典型的甲狀腺功能亢進的癥狀和體征；（2）FT3、FT4均高于正常，TSH低于正常；（3）甲狀腺自身抗體不同程度的陽性。排除標準：（1）其他原因引起的甲狀腺功能異常者；（2）合并浸潤性突眼或合并其他自身免疫性疾病，如系統性紅斑狼瘡（SLE）、類風濕性關節炎（RA）、銀屑病、多發性硬化（MS）及重癥肌無力（MG）等；（3）嚴重心、肝、腎疾病。（4）其他免疫性或感染性疾病及妊娠婦女。

1.2 研究方法觀察組于治療前早晨8:00空腹采靜脈血5 ml，以3 000 r/min離心，分離血清后分裝，一部分血清在－20℃以下凍存待測外，余送作TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、甲狀腺球蛋白抗體（TGA）、甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）檢查。藥物治療后數月，病情相對穩定，甲狀腺功能恢復正常后再次采血標本。正常對照組在查體時留取血樣，處理同上。IL-3、IL-2、白介素2受體（sIL-2R）試劑盒（生產批號20090325）為美國Gengyme公司產品，由深圳晶美公司提供。

1.3 統計方法采用SPSS13.0統計軟件進行統計學分析，正態分布數據采用均數±標準差表示，組間比較采用配對資料檢驗；率的比較采用2檢驗。＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后甲狀腺功能水平的比較治療前觀察組患者TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TPOAb及TGAb均顯著高于對照組（均＜0.01）。觀察組患者經治療后TT4、TT3、FT4、FT3及sTSH均恢復正常，治療前后差異均有統計學意義（均＜0.01）；TPOAb與TGAb治療前后均在正常范圍內，經治療后TPOAb顯著下降（＜0.01），TGAb前后差異無統計學意義（=0.54，＞0.05）。見表1。

表1 兩組治療前后甲狀腺功能水平的比較

2.2 對照組及GD患者治療前后IL-3、IL-2、sIL-2R表達水平的比較觀察組患者IL-3、IL-2、sIL-2R水平與對照組差異有統計學意義（均＜0.01）；觀察組患者經治療后IL-3、IL-2表達水平較治療前顯著升高，而sIL-2R的表達水平較治療前降低，治療前后差異有統計學意義（均＜0.05）。見表2。

2.3 觀察組治療前IL-3、IL-2、sIL-2R表達水平與甲狀腺激素相關性觀察組治療前患者外周血IL-3、IL-2水平與T T4、TT3、FT4、FT3水平均呈負相關（=－0.504、－0.603、－0.624、－0.589、－0.762、－0.654、－0.587、－0.609，均＜0.05），而sIL-2R水平與TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈正相關（=0.532、0.487、0.614、0.578，均＜0.05）。

表2 兩組治療前后IL-3、IL-2、sIL-2R的表達

3 討論

甲狀腺細胞能產生腫瘤壞死因子（TNF-）、干擾素（IFN-）、IL-1及IL-3等細胞因子[2]。IL-3具有顯著的免疫調節作用，已有研究表明IL-3能促進外周血T細胞的增殖。在IL-2存在的條件下，它還能促進B細胞的增殖及分化，并能誘導、激活B細胞分泌免疫球蛋白，IL-3的這些作用是通過誘導B細胞表達IL-2R來實現的。

IL-2是免疫調控因子，具有促進T淋巴細胞增殖分化，增強Ts細胞活性作用[3-4]。因此，IL-2減少會影響Ts細胞的分化，成熟和增殖，體內免疫自穩機制不能有效發揮監視作用。而目前認為Ts細胞下降不能抑制“禁株”細胞是GD發病的關鍵環節之一，故IL-2減少可能與GD發病有關系。研究發現IL-2受體有二種形式，膜IL-2R（mIL-2R）及sIL-2R。sIL-2R是mIL-2R的主要廓清形式，二者都參與了對II-2的調節。sIL-2R可消耗IL-2，抑制IL-2依賴的免疫反應，并加重體內IL-2的不足，使免疫功能紊亂。因此，IL-2在GD發病中，還明顯受到受體等多方面的調節。IL-2對甲狀腺細胞的合成、分泌及分化功能有著重要的影響。有學者對甲狀腺功能異常伴有IL-2水平降低的高甲狀腺素血癥患者，給予外源性的IL-2補充治療，使患者的甲狀腺激素水平降至正常，并避免部分患者復發[5]。直接測量血清IL-2的水平，可以幫助進一步證實由GD引起的甲狀腺機能亢進。

IL-2/IL-2R與甲狀腺疾病的相關研究已有報道[6-7]，甲狀腺機能亢進癥未經治療組及甲亢未治療合并有突眼的患者血清slL-2R明顯升高，IL-2明顯降低。患者經過抗甲狀腺藥物治療后sIL-2R明顯降低；Graves病患者血清slL-2R均與FT3呈正相關。高水平的sIL-2R是淋巴細胞激活的產物，并且可控制這一免疫功能失常。T細胞釋放受體，同時降低可利用的IL-2水平。在體外細胞培養中，也發現GDsIL-2R增加而IL-2水平下降。這種降調節可能為GD發病過程中免疫調控失衡時迅速建立反饋性相互制約。本研究中GD患者sIL-2R值增高，IL-2水平降低，與大量國內外研究一致[7]，表明細胞大量活化，增高的sIL-2R與IL-2結合，可阻礙IL-2與膜IL-2R結合，從而避免Th細胞的進一步增殖，有助于減輕免疫反應強度，這也是機體自我保護的一種機制。研究還表明，GD患者sIL-2R水平與甲狀腺激素包括TT4、TT3、FT4、FT3均呈顯著正相關，并且隨著甲狀腺激素水平的升高或降低，sIL-2R水平亦呈相應的變化趨勢；但是有研究證明，不僅GD患者血清sIL-2R水平升高，其他原因所致的甲亢如毒性多結節性甲狀腺腫、毒性甲狀腺瘤、橋本氏甲狀腺炎伴甲狀腺功能亢進患者血清sIL-2R水平均明顯升高。因此認為sIL-2R與自身免疫性有關，sIL-2R可能作為體內淋巴細胞激活的一項獨立指標，而不只是繼發于高甲狀腺素血癥的改變，并且其與疾病的活動性密切相關，定期隨訪sIL-2R水平對于GD的病情監測可能有重要意義。

本研究發現，GD患者初發時較健康對照組研究對象其血清sIL-2R水平顯著增高，而IL-2及IL-3水平顯著降低，隨著甲狀腺功能的恢復，IL-2及IL-3水平逐漸升高，sIL-2R水平降低。IL-3、IL-2水平與TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈負相關，而sIL-2R含量與TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈正相關。說明GD初發時高甲狀腺素血癥與血清中IL-2、IL-3水平降低有關。治療后IL-3水平上升非常明顯，組間較治療前比較差異有統計學意義，這一現象不僅能反映自體免疫反應的動態，同時也能反映甲狀腺細胞的功能狀態，因此認為IL-3有可能作為了解GD病情的檢測指標，同時提示動態觀察血清IL-3水平或許對判斷GD的轉歸具有一定的臨床價值。當然，該研究樣本量少，細胞因子在GD發生發展中的確切作用仍需進一步研究。

[1]Anvari M,Khalilzadeh O,Esteghamati A, et al.Graves'disease and gene polymorphism of TNF-,IL-2,IL-6,IL-12,and IFN-[J].Endocrine,2010,37(2):344-348.

[2]張金華,馮玉欣,趙艷艷,等.Th1/Th2型細胞因子失衡與Graves病相關性研究[J].臨床合理用藥,2010,3(9):39-40.

[3]Eller T,Vasar V,Shlik J,et al.The role of IL-2 and soluble IL-2R in depression and antidepressant response[J].Curr Opin Investig Drugs,2009,10(7):638-643.

[4]Wang J,Wicker LS,Santamaria P.IL-2 and its high-affinityreceptor:geneticcontrol of immunoregulation and autoimmunity[J].SeminImmunol,2009,21(6):363-371.

[5]Hoyer KK,Dooms H,Barron L,et al.Interleukin-2 in the development and control of inflammatorydisease[J].Immunol Rev, 2008,226:19-28.

[6]劉靜,田利民,李茂欣.毒性彌漫性甲狀腺腫患者血清IL-1、IL-2、IL-6水平變化的分析[J].華中醫學雜志,2001,25(3):117-118.

[7]Topliss DJ,Eastman CJ.Diagnosis and management of hyperthyroidism and hypothyroidism[J].Med J Aust,2004,180 (4):186-193.

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.029

R581

A

1671-0800(2014)04-0423-03 Graves病（簡稱GD）又稱毒性彌漫性甲狀腺腫或Basedow病，是一種伴甲狀腺激素（TH）分泌增多的器官特異性自身免疫病。已有研究提示，細胞因子對于甲狀腺細胞具有重要的免疫調節和免疫穩定作用。細胞因子的不平衡能夠直接或間接地導致甲狀腺濾泡上皮細胞（TEC）生長、分化的異常和免疫功能的紊亂，從而導致甲狀腺疾病，特別是自身免疫性甲狀腺病（ATID）的發生和發展，

浙江省衛生廳資助項目（2009B058）

313000浙江省湖州，湖州市中醫院(章步文)；浙江大學醫學院附屬第一醫院（馮云飛）

章步文，Email：1046993395@qq.com

37例初診Graves病的甲狀腺機能亢進癥患者，在甲亢治療前后分別抽血檢測IL-3、IL-2及sIL-2R，余送作總甲狀腺素（TT4）、總甲狀腺三碘原氨酸（TT3）、游離甲狀腺素（FT4）、游離甲狀腺三碘原氨酸（FT3）、超敏促甲狀腺素（sTSH）、甲狀腺球蛋白抗體（TGA）及甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb），比較治療前后IL-3、IL-2及sIL-2R的表達水平。健康對照組37例，進入研究時抽血檢測IL-3、IL-2及sIL-2R，余送作TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TGA及TPOAb水平。結果治療前甲狀腺機能亢進患者血清TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TPOAb、TGAb以及IL-2、IL-3、sIL-2R水平與健康對照組差異均有統計學意義（均＜0.05）。甲狀腺功能亢進癥患者經治療后IL-3、IL-2表達顯著升高，sIL-2R的表達水平降低，治療前后IL-3、IL-2、sIL-2R的表達水平有差異有統計學意義（均＜0.01）。IL-3、IL-2表達與甲狀腺激素水平呈負相關，sIL-2R與甲狀腺激素水平呈正相關（＜0.05）。結論甲狀腺功能亢進癥患者經治療后IL-3、IL-2表達顯著升高，sIL-2R的表達水平降低。口服抗甲狀腺藥物有免疫調節作用，可能與IL-3的免疫調節相關。