文蛤化學成分與藥理作用研究進展

杜正彩， 侯小濤， 黃 慶， 鄧家剛*， 范氏芳草

(1.廣西中醫藥大學新藥研究開發中心，廣西南寧 530001；2.廣西中藥藥效研究重點實驗室，廣西南寧 530001)

文蛤(MeretrixmeretrixLinnaeus)又稱為花蛤、海蛤、黃蛤、蛤蠣，為軟體動物簾蛤科(Veneridae)文蛤屬的海產經濟貝類。文蛤素有“天下第一鮮”的美稱，不僅營養豐富，而且藥用價值也較高。文蛤的藥用部位包括外層貝殼與殼內肉質2個部分，古代以貝殼入藥為主，現代對肉質部分的研究較多。文蛤作為一種海洋傳統中藥，其藥用歷史已有2 000多年，早在《神農本草經》中就有關于文蛤殼的記載，稱其“主惡瘡飾，五痔”。《本草經疏》記載：“文蛤能消散上下結氣，故主咳逆胸痹腰痛脅急也”。《長沙解藥》記載：“文蛤，清金利水解渴除煩，化痰止咳，軟堅消痞”。清代汪昂的《本草備要》中也有文蛤除瘤的記載，在民間流傳有“海蛤治癌”的秘方。《廣西海洋藥物》中歸納文蛤殼具有“軟件散結、清熱化痰、止咳、利濕之功效，主治口渴煩熱、咳嗽氣喘、咳逆、胸痹、瘰疬、痰核、咯血、崩漏帶下、痔瘺等病癥”[1]。文蛤在我國北至遼寧、南至廣西、廣東、海南等沿海地區均有分布，是我國沿海傳統養殖的主要經濟貝類之一[2]。基于此，筆者對近年來對文蛤化學成分及藥理作用研究進展進行了綜述。

1 化學成分

文蛤中含有多種活性天然產物和許多重要化合物，如蛋白質、多肽、多糖、核酸、甾醇、牛磺酸類化合物等[3]。另外，文蛤還富含EPA和DHA等多烯不飽和脂肪酸以及人體易吸收的各種氨基酸和維生素及豐富的礦物質(Na、K、Ca、Mg)和微量元素(Fe、Zn、Cu、Cr)等[4]。劉琦等[5]對文蛤殼中無機鹽與氨基酸進行了含量測定，結果發現CaCO3含量為94%；用等離子測定無機元素的半微量Al2O3為0.08%、Fe2O3為0.03%、CaO為51.15%、MgO為0.05%；測定結果表明文蛤殼含有16種氨基酸，其中含量較高的氨基酸為(mg/kg)：天冬氨酸Asp(861.0)、苯丙氨酸Phe(832.7)、甘氨酸Gly(1 942.9)、精氨酸Arg(569.3)、纈氨酸Val(936.8)。楊晉等[6]以文蛤肉為原料來測定其脂肪酸組成和無機離子含量，結果表明文蛤中含有豐富的飽和脂肪酸和不飽和脂肪酸，EPA和DHA含量分別達6.904%和7.244%，無機離子中呈咸味的Cl-含量最高達601 mg/100g。康勁翮等[7]以文蛤肉為原料，采用復合胰蛋白酶酶解，通過噴霧干燥工藝制成文蛤多肽粉，該文蛤多肽粉中蛋白質、氨基酸和對人體有益的金屬元素含量豐富，對人體有害的重金屬含量都遠遠低于國家食品檢驗標準的安全劑量，氨基酸種類齊全，該方法制備的多肽分子量均小于5 200 U，其中分子量小于1 000 U的多肽占總多肽含量的69.03%。竇昌貴等[8]將新鮮文蛤肉酶解，去蛋白質，純化干燥后得到文蛤多糖。龔麗芬等[9]采用正交試驗法探討熱水提取文蛤中牛磺酸的最佳工藝條件，并用傅立葉紅外光譜儀鑒定產品質量。結果表明，在料液比為100 g/L和100 ℃下水浴1.0 h時，提取率最高，用H+型陽離子交換樹脂，得到高純度的牛磺酸。

2 藥理作用

2.1抗腫瘤作用1964年，Schmeer[10]等首次從文蛤中分離到抗腫瘤因子，命名為“蛤素”(Mercenene)；這種腫瘤抑制因子對小鼠 S180肉瘤有顯著的抑制作用，但對正常小鼠無毒性；后期研究表明，蛤素是分子量小于 10 kD的多肽類物質(糖肽或小分子核蛋白)，而且其在文蛤體內的含量隨季節呈規律性變化。張玉艷等[11-13]從文蛤體液中純化得到單一蛋白組分MML，分子量約為40 kD，研究發現該蛋白在體外具有顯著的抗人肝癌細胞BEL-7402的活性，其IC50為52 μg/ml，這種文蛤體液蛋白是1種新型的抗腫瘤蛋白，主要通過增加細胞膜的通透性、引起細胞凋亡、抑制微管蛋白聚合產生抗腫瘤作用。鄭國興等[14]將文蛤肉以復合胰蛋白酶酶解，經噴霧干燥工藝得到文蛤多肽粉，研究文蛤多肽粉對肝癌細胞的抑制作用。結果表明，文蛤多肽粉對體外培養的肝癌細胞SMMC7721具有明顯的殺傷作用，使細胞變形以至破裂從而抑制癌細胞的生長，抗腫瘤作用明顯。冷波等[15]從文蛤體內分離提取了分子量為3 147 U小分子多肽，發現該文蛤多肽能有效抑制體外培養肝癌細胞的增殖活動，可通過改變肝癌細胞的形態及細胞周期而明顯抑制細胞的增殖。劉曉丹等[16]從新鮮文蛤肉中提取到分子量約為18 kD的多肽，當該多肽濃度為10 μg/ml時，對人胃腺癌細胞BGC-823細胞的抑制率達到50%。康勁翮等[17]從新鮮文蛤中分離純化到文蛤抗癌多肽，發現其對N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)有明顯的抑制作用，該抑制作用是一種可逆過程。該研究為闡明文蛤抗癌多肽的抑癌作用機制以及對文蛤的進一步研究開發提供了理論依據。

王翠翠等[18]從文蛤體液中分離純化到分子量約為15 kD的多肽，命名為Mere15；經研究發現Mere15具有較好的廣譜抗癌活性，但對正常細胞卻沒有明顯的抑制作用，其作用機制與誘導細胞凋亡和細胞周期阻滯有關。Mere15還具有抑制A549細胞增殖的作用，其機制可能與抑制微管蛋白聚合有關[19]；王惠等[20]從文蛤體液中分離純化到一種抗腫瘤多肽Mere15，通過MTT法研究也發現Mere15在體外對肺癌細胞A549的增殖具有抑制作用，其IC50為34.90 μg/ml。范成成等[21]從文蛤肉中提取了1種低分子量的多肽，命名為Mer2，并發現Mer2具有廣譜的抗癌活性，其中Mer2對人肝癌HepG2細胞株抑制作用最為顯著，但對正常的人肝chang-liver細胞抑制作用較小[22]。Mer2對人肝癌細胞株(HepG2)、宮頸癌細胞株(Hela)、膽管癌細胞株(QBC939)、肺癌細胞株(SPC-A-1和LTEP-a-2)的生長均有較強的抑制作用，且抑制效果隨著Mer2含量的增高和處理時間的延長而增強，證明Mer2具有廣譜的抗癌活性[23]。張劍等[24]發現Mer2對宮頸癌Hela細胞有明顯的抑制效應，抑制作用呈量效與時效關系。康勁翮等[25]研究發現Mer2對體外培養的肺癌A549細胞的生長有較強的抑制作用，該多肽可能通過誘導細胞凋亡從而抑制癌細胞的生長。

竇昌貴等[8]研究發現文蛤多糖對小鼠移植性腫瘤(S180肉瘤、EAC腹水瘤、肝癌腹水瘤)有顯著的治療效果，具有抗癌作用，有希望研制成新型的抗癌藥。張鉑等[26]從文蛤中分離純化到糖肽MGP0405，并對其性質進行研究發現MGP0405(200 μg/ml)對人鼻咽癌KB細胞的抑制率達到69%；此外，MGP0405還具有抑制腫瘤細胞與基底膜成分的黏附作用，對S180荷瘤鼠具有較高的體內抗腫瘤活性[27]。吳杰連等[28]從文蛤中分離出1種具有抗腫瘤作用的小分子糖肽(MGP0501)，通過MTT試驗發現MGP0501對人卵巢癌(HO8910)、宮頸癌(Hela)、肺癌(A549)、肝癌(SMMC-7721)、鼻咽癌(KB)生長均有較強的抑制作用，對鼠源性癌細胞株(B16)抑制性最強，并呈量效關系；此外，研究發現MGP0501對正常脾淋巴細胞無抑制作用，表明其對腫瘤細胞具有選擇性抑制作用。另外，Wu T.H等[29]從文蛤中分離出類固醇(5α,8α-epidioxycholest-6-ene-3beta-ol ，MME)，研究發現MME通過誘導p53依賴性與非依賴性2條途徑使肝癌細胞HepG2 和 Hep3B細胞周期阻滯在 G1期有效地抑制了癌細胞的增值。

2.2免疫調節作用文蛤具有較好的免疫調節作用。竇昌貴等[8]采用Cy 造成小鼠免疫功能損傷，小鼠各項免疫指標均有顯著降低，口服文蛤多糖干預后胸腺、脾臟增重，外周血液白細胞數量增加，吞噬能力增強，血清溶血素抗體水平升高，SRBC和PC 所致超敏反應增強，具有較好的免疫調節作用。何雅軍等[30]對文蛤多糖與文蛤提取物在小鼠免疫調節方面進行了比較研究，結果表明小鼠灌服文蛤提取物和文蛤多糖都可使免疫抑制狀態下小鼠脾臟重量、外周血白細胞數以及巨噬細胞的吞噬功能顯著增加，明顯促進特異性抗體的恢復，但同等劑量下文蛤多糖比文蛤提取物有更強的作用，說明文蛤提取物中起主要作用的部分是多糖。另外，研究發現文蛤提取物及文蛤多糖對受環磷酰胺抑制的DH反應具有明顯的上調作用，而對受環磷酰胺所致過高的DH反應具有明顯下調作用，說明文蛤提取物及文蛤多糖有雙向免疫調節作用[31]。袁強等[32]探討了文蛤多糖對實驗性糖尿病大鼠免疫功能的影響，發現文蛤多糖對糖尿病模型大鼠有免疫調節治療效應。

羅運滿等[33]研究發現文蛤肉能夠明顯提高小鼠血清溶血素水平，促進小鼠脾淋巴細胞增殖反應，增加小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬百分率和吞噬指數，提高老年小鼠血清T-SOD活力和降低老年小鼠血清MDA含量，但未能延長小鼠游泳時間。鄭國興等[34]將文蛤肉以復合胰蛋白酶酶解，經噴霧干燥工藝制成文蛤多肽粉，研究該文蛤多肽粉對昆明種小鼠的急性毒理作用和免疫調節作用，發現文蛤多肽粉給藥組的胸腺指數和脾臟指數較空白對照組明顯升高，說明文蛤多肽粉能夠促進小鼠胸腺和脾臟的生長發育，增強免疫力。

2.3降糖和降血脂作用袁強等[35]對文蛤多糖進行降血糖的試驗研究，結果表明文蛤多糖可以顯著降低四氧嘧啶糖尿病小鼠的血糖。徐秀蘭等[36]研究文蛤水解液的降血糖及降血脂作用，結果表明文蛤水解液能夠明顯降低正常小鼠及糖尿病小鼠的血糖水平(P<0.05)，顯著降低食物性高脂血癥大鼠的血清甘油三酯(P<0.01)和血清膽固醇水平(P<0.01)。吳麗明等[37]采用四氧嘧啶糖尿病模型大鼠來評價文蛤和南瓜粉膠囊的降血糖作用，結果表明文蛤和南瓜粉膠囊對四氧嘧啶性糖尿病大鼠有降低血糖作用。張廣欽等[38]發現高脂血癥鵪鶉口服2%和1%文蛤肉水解液2周后，能明顯抑制血清總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的升高，提高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的含量。4周后，肝膽固醇(Ch)及TG含量有不同程度降低；給藥3周后，對正常及高脂血癥鵪鶉的全血粘度均有降低作用，并且能抑制家兔體外ADP誘導的血小板聚集。金學仁[39]以《金匱要略》中的文蛤湯加減治療7例糖尿病，取得了滿意的效果。

2.4抗氧化作用邱春江等[40]用木瓜蛋白酶水解文蛤蛋白制備小分子肽后利用凝膠層析初步分離并對抗氧化性進行了研究，結果表明木瓜蛋白酶解產物中對羥自由基的清除率最高，達到95.8%，其分子量為1 350；對超氧自由基清除率最高，卻只有44.7%，其分子量為397。閻欲曉等[41]發現文蛤蛋白分別經木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、酸性蛋白酶作用后酶解物對羥自由基和超氧自由基均具有清除作用，水解液中多肽的分子量主要集中在1 000以下，分別占圖譜面積的51.90%、61.7%和42.07%。李和生等[42]采用蛋白酶水解文蛤發現多肽組分中分子質量為13 kU左右的組分對氧自由基和羥自由基有較高的清除率，分別達56.36%和74.60%。肖湘等[43]從文蛤肉中分離到的活性蛋白具有抗氧化作用，降低血清CK、BLA水平，提高機體抗氧化酶SOD、CAT的活性，降低脂質過氧化產物MDA的水平。康勁翮等[44]從文蛤中提取到能抑制癌細胞的生長的物質，將此活性物質命名為Mer2，并采用DPPH法研究了該活性多肽的抗氧化能力，結果表明其具有一定的清除氧自由基的能力。邱春江等[45]發現文蛤在酶解溫度50 ℃、pH 8.0～8.5，加酶量為2%，酶解時間4 h，酶解產物對·OH清除率明顯提高，達到94.02%。

2.5其他藥理作用禹志領等[46]研究發現文蛤具有抗突變作用，以文蛤肉煎劑20 mg/kg，給小鼠灌胃1次/d，連續7 d，對環磷酰胺(25 mg/kg×ip)及烏拉坦(0.5 g/kg×4d.ip)引起的骨髓微核率增高均有顯著對抗作用。祝素平等[47]研究發現文蛤提取液可以延長小鼠游泳的力竭時間，表明文蛤具有抗疲勞的作用。Woo等[48]從文蛤中提取的1種新型β-硫酸半乳糖組成的多糖化合物，被認為能夠直接與HIV在T細胞上的膜蛋白結合子CD4相互作用從而抑制HIV活性。Saravanan等[49]從文蛤中分離出1種葡糖胺聚糖(GAGs)，結果表明這種物質具有類似肝素的抗凝作用，說明從文蛤中分離的GAGs可以替代肝素來源。

3 小結

綜上所述，文蛤營養豐富且具有多種生物活性和藥理作用，具有較高的開發價值和應用前景。近年來，人們對文蛤研究較多的是文蛤多肽、多糖的提取分離及其抗癌、免疫調節等生物活性。文蛤作為一種海洋中藥，具有較大的開發潛力，但要開發出新藥或保健食品，其活性成分的組成及藥理作用還需進一步深入研究。

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