T-spot.TB在克羅恩病和腸結核鑒別診斷中的價值

何 敏，荀安營，賴廣順，吳慧華，鄒 兵，吳子剛

(北京大學深圳醫院消化內科,廣東 深圳 518000)

克羅恩病是發生于消化道的慢性肉芽腫性炎癥，以末段回腸及其鄰近結腸發病多見，腸結核是由結核桿菌在腸道引起的慢性特異性感染，以回盲部多見。克羅恩病與腸結核的臨床、影像、內鏡及病理表現均十分相似[1]，但治療、預后和轉歸存在很大差異，兩種疾病的鑒別診斷一直是消化科醫師的難題，結核桿菌T細胞斑點試驗(T-cell spot of tuberculosis test，T-spot.TB)在結核病的鑒別診斷中具有較高的價值[2-3]，但其用于克羅恩病與腸結核鑒別診斷國內研究不多，本研究通過分析兩種疾病患者T-spot.TB和其他實驗室檢查情況，探討T-spot.TB在克羅恩病與腸結核的鑒別診斷價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2010年1月至2012年8月在北京大學深圳醫院消化內科診治的37例ITB和35例克羅恩病患者作為研究對象，腸結核患者中男21例、女16例，年齡11～68(34.5±6.7)歲；克羅恩病患者男17例、女18例，年齡13～71(36.7±7.2)歲，兩組患者性別及年齡構成差異無統計學意義(P>0.05)。克羅恩病的診斷參照中華醫學會消化病學分會炎癥性腸病協作組制訂的《中國炎癥性腸病診斷治療規范的共識意見》[4]，并且治療隨訪超過12個月，符合克羅恩病的自然發展規律，并且經病理學診斷為克羅恩病，手術標本病變組織無干酪樣壞死。腸結核診斷參照文獻[5]，并且內鏡或手術切除病變組織可見干酪樣肉芽腫，正規抗結核治療半年以上，臨床及內鏡檢查痊愈，治療后9個月以上無復發。兩組患者均能夠排除惡性腫瘤、女性生殖系統病變、腎衰竭、肺炎及肝硬化等病變。

1.2檢測方法

1.2.1T-spot.TB 按照T-spot.TB試劑盒(購自英國Oxford Immunotec 公司，批號：J2918D6)操作說明書進行，應用肝素抗凝試管采集外周靜脈血8 mL，密度梯度離心法分離外周血單核淋巴細胞，將陽性對照植物血凝素、陰性對照細胞培養液及結核桿菌特異性A抗原和B抗原分別加入已包被抗干擾素γ抗體的微量板中，然后在每孔加入外周靜脈血單核細胞2.5×105個，置于37 ℃恒溫箱內孵育16～20 h，取出進行磷酸鹽緩沖液洗脫4次，加入抗干擾素γ抗體在4 ℃恒溫下孵育2 h，再次磷酸鹽緩沖液洗脫后顯色，磷酸鹽緩沖液 終止反應。在放大鏡下進行斑點數閱讀和人工計數。陽性評判標準：測量孔點數是陰性對照孔的2倍以上或者較陰性對照多 6個斑點。

1.2.2糖類抗原125測定 采集清晨空腹靜脈血，采用快速發光免疫分析法檢測，儀器選用美國雅培公司生產AXSYM型全自動快速發光免疫分析儀及配套試劑。嚴格按試劑說明書進行操作，以糖類抗原125(CA125)>35 kU/L為陽性。

1.3統計學方法 應用SPSS 19.0版本統計軟件分析，計數資料以例(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

T-spot.TB、血CA125檢測陽性率腸結核組均顯著高于克羅恩病組，差異有統計學意義(P<0.01)，而紅細胞沉降率增快率、C反應蛋白升高率、便潛血陽性率、結明三項陽性率、結核菌素試驗陽性率及抗中性粒細胞胞漿抗體陽性率組間比較差異均無統計學意義(P>0.05)(表1)。T-spot.TB檢測陽性中腸結核為34例，克羅恩病為3例，T-spot.TB檢測陰性中腸結核為3例，克羅恩病為32例，CA125檢測陽性中腸結核為29例，克羅恩病為8例，CA125檢測陰性中腸結核為9例，克羅恩病為32例，以病理檢查結果為金標準，T-spot.TB鑒別克羅恩病和腸結核的靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值均高于血CA125檢測(表2)。

表1 兩組患者實驗室檢查指標比較 [例(%)]

表2 T-spot.TB、血CA125檢測鑒別 克羅恩病和腸結核的價值 (%)

3 討 論

克羅恩病是西方經濟發達國家常見的消化系統疾病，近年來隨著工業化的發展和生活環境的變化，我國克羅恩病的發病率也有所上升，腸結核在我國發病率較高，與克羅恩病臨床表現酷似，且有部分重疊，兩者的鑒別診斷多年來是消化科臨床的難題，而鑒別診斷對于治療方案的選擇有重要意義，如果將克羅恩病誤診為腸結核，將使患者承受不必要的抗結核治療，并且可延遲克羅恩病的正確治療；而將腸結核誤診為克羅恩病，激素、免疫抑制劑甚至生物制劑的應用會加重克羅恩病患者的病情[6]。結核菌的病原學診斷是鑒別克羅恩病和腸結核的金標準，但標本中的細菌數量對檢測結果的影響較大，并且結核桿菌培養周期較長，不利于早期診斷[7]，本研究T-spot.TB和血CA125檢測陽性率在兩種疾病患者中的差異有統計學意義(P=0.000)，兩種檢測方式均有助于克羅恩病和腸結核的鑒別。

結核桿菌的染色體上存在著一段名為RD1的基因序列，而在T-spot.TB中，感染結核桿菌患者外周靜脈血T細胞可被RD1編碼抗原活化而分泌干擾素γ，干擾素γ與微孔板上的相應抗體結合而顯色為色素斑點，據此可對結核感染做出診斷[7]。T-spot.TB作為一種新的結核檢測手段對結核桿菌感染具有較高的敏感性和特異性，近年來開始應用于克羅恩病和腸結核的鑒別。雷少妮等[7]的研究對T-spot.TB 鑒別克羅恩病和腸結核的價值進行了探討，靈敏度、特異度分別為93.3% 、85.7%，并認為T-spot.TB檢測有助于克羅恩病和ITB的鑒別。Beom 等[8]的研究也證實了T-spot.TB在克羅恩病和腸結核中的鑒別價值，其診斷腸結核的靈敏度為67%，特異度達到90%，陽性預測值和陰性預測值也分別達到87%和73%。本研究結果顯示T-spot.TB鑒別克羅恩病和腸結核的靈敏度、特異度、準確度、陽性預測值、陰性預測值分別為91.9%、91.4%、91.7%、91.9%、91.4%，與雷少妮等[7]的結果一致，高于Beom等[8]的研究，可能與研究對象所處不同地區和不同生活環境有關。

CA125是一種高分子量糖蛋白，在結核病的診斷和鑒別診斷中有較高的價值，也有學者將其用于克羅恩病和腸結核的鑒別診斷，腸結核患者多合并肺部活動性結核，CA125主要是胸膜、腹膜間皮細胞或支氣管黏膜上皮細胞在結核炎性刺激下產生的[9]。本研究結果顯示腸結核患者血CA125的陽性率顯著高于克羅恩病患者，提示血CA125檢測對于克羅恩病和腸結核的鑒別有一定價值，但靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為78.4%、74.2%、76.3%、76.4%，均低于T-spot.TB檢測，提示其診斷價值低于T-spot.TB，可能的原因為部分ITB患者未合并腸外結核，難以產生大量CA125，造成敏感性降低，而克羅恩病嚴重時也可存在透壁性炎癥，刺激腸道漿膜的間皮細胞分泌CA125，導致其血液中水平升高，降低了血CA125在檢測腸結核中的特異性。

綜上所述，T-spot.TB方便快捷，敏感性和特異性高，在克羅恩病和腸結核的鑒別診斷中具有重要價值，但T-spot.TB也存在著較小的假陽性率，如結合血CA125及其他檢測方式，更有利于兩者的鑒別。

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[7] 雷少妮,劉家云,梁潔,等.結核桿菌T細胞斑點試驗在克羅恩病與腸結核鑒別診斷中的應用價值[J].中華消化雜志,2011,31(10):677-680.

[8] Beom J K,Yong SC,Byung IJ,et al.Prospective evaluation of the clinical utility of interferon-γ assay in the differential diagnosis of intestinal tuberculosis and Crohn′s disease[J]. Inflamm Bowel Dis,2011,17(6) : 1308-1313.

[9] 喻研,但自力.血CA125 在腸結核和克羅恩病中的鑒別診斷價值[J].實用醫學雜志,2011,27(24):4489-4491.