Th細胞變化與肺癌骨轉移的相關性研究

張 波，傅祖紅，胡振紅

(廣州軍區武漢總醫院呼吸內科，武漢 430070)

骨骼是肺部腫瘤轉移的好發部位，由于原發肺癌的部位和病理類型各不相同，其肺癌骨轉移的發生率也不同[1]。臨床上發生骨轉移患者的病灶以多發為主，病程通常已經發展為中晚期，因此常規的腫瘤放化療療效差，隨著以細胞和細胞因子為核心的免疫治療技術的加速發展，免疫治療為這類患者的痊愈帶來了新的可能。而腫瘤免疫治療的核心就是Th淋巴細胞[2]。本研究主要分析經病理證實的94例肺癌患者的Th細胞變化與肺癌骨轉移的關系。現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2011年1月至2014年1月廣州軍區武漢總醫院經病理證實的肺癌患者94例作為試驗組，男72例、女22例，年齡23～65(45.7±7.8)歲。其中腫瘤未轉移患者53例，其中接受化療者25例，尚未化療者28 例；腫瘤轉移患者41例，其中接受化療者23例，尚未化療者18 例。在發生轉移并化療者中,先化療后轉移者5例,先轉移后化療者18例，所有骨轉移患者作全身骨放射性核素掃描、磁共振成像、X線平片以確診疾病。來自本院的80例健康志愿者作為正常對照組，男65例、女15例，年齡20～71(46.2±8.3歲)。

1.2儀器及相關細胞分析軟件 流式細胞儀為FACS- Calibur(美國BD公司產品)，氬離子激光器功率為15 mW，激發光波長為488 nm。用BD公司提供的Cellquest軟件程序獲取細胞和分析淋巴細胞中CD25+和CD3+/ CD4+細胞的百分率。每份樣品分別獲取2×104個細胞。

1.3方法 采集受檢者靜脈血1 mL，肝素抗凝，取抗凝全血100 μL，加入10 μL單克隆抗體帶熒光標記試劑(CD25-FITC或CD4-FITC/CD8-PE/CY5PE)，在室溫下反應30 min，然后加入2 mL溶血劑，5 min后離心去上清液，再加0.15～1.0 mL磷酸緩沖鹽溶液液稀釋，混勻后上機檢測并分析CD25+細胞百分率或CD3+/ CD4+細胞百分率。同時設定陰性同型對照，樣品在染色后6 h內檢測完畢。單克隆抗體熒光試劑及同型對照試劑均采用蘇州生物基因技術有限公司的試劑。

2 結 果

2.1肺癌轉移對CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率的影響 各組CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率比較差異有統計學意義(P<0.01)，組間兩兩比較結果顯示：轉移組CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率顯著低于正常對照組(均P<0.05)，未轉移組CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率顯著低于正常對照組(均P<0.05)，轉移組CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率顯著低于未轉移組(P<0.05)(表1)。

表1 各組CD25+和CD3+/ CD4+細胞檢出率比較

組別例數CD25+細胞CD3+ /CD4+細胞試驗組 轉移者 417.69±4.95ab22.32±7.15ab 未轉移者5311.16±6.58a30.56±9.02a正常對照組8013.27±5.1536.42±8.93F13.57636.936P0.0000.000

a：與正常對照組比較，P<0.05；b：與未轉移者比較，P<0.05

2.2化療對肺癌患者CD25+和CD3+/CD4+細胞檢出率的影響 各組CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率比較差異有統計學意義(P<0.01)，組間兩兩比較結果顯示：轉移化療組CD25+和CD3+/CD4+細胞檢出率高于轉移未化療組(均P<0.05)，未轉移化療組CD25+和CD3+/CD4+細胞檢出率高于未轉移未化療組(均P<0.05)，轉移化療組CD25+細胞檢出率低于未轉移化療組(P<0.05)(表2)。

2.3肺癌骨轉移患者的化療順序與CD25+和CD3+/ CD4+細胞變化的關系 肺癌化療后骨轉移者在血細胞中CD25+和CD3+/ CD4+細胞百分率均低于轉移后化療患者(P<0.05)(表3)。

表2 化療對患者CD25+和CD3+/CD4+細胞檢出率的影響

治療情況例數CD25+細胞CD3+ /CD4+細胞轉移化療者 2310.45±4.97a32.85±6.92a轉移未化療者 185.38±3.02b26.24±6.33b未轉移化療者 2515.74±5.94c38.47±5.54c未轉移未化療者286.65±2.80d24.73±6.06dF25.97325.743P0.0000.000

a與b、c與d、a與c比較，均P<0.05

表3 化療后轉移和轉移后化療者CD25+和CD3+/CD4+細胞比較

治療情況例數CD25+細胞CD3+ /CD4+細胞化療后轉移者55.83±1.2625.72±8.39轉移后化療者1810.95±5.3734.18±7.81t2.0832.445P0.0250.012

3 討 論

肺癌是我國發病率和病死率增長最快的惡性腫瘤之一，對人們的健康和生命具有很大的威脅[3]。肺癌的轉移最常發生在骨骼，而肺癌骨轉移是患者預后不良的主要因素，大部分肺癌患者的骨轉移發生在確診后1.5～2.5年內發生。據研究顯示，肺癌骨轉移發生率與原發癌病理類型有密切聯系，骨轉移發生率最高的病理類型為腺癌，其次為小細胞肺癌和鱗癌[4]。

機體免疫系統分為細胞免疫和體液免疫，它們共同監視腫瘤細胞發生、轉移[5]。細胞免疫在腫瘤的免疫監視中占主體地位，而細胞惡性腫瘤患者存在免疫逃逸機制，由于機體免疫監視功能不能及時徹底清除突變細胞，或者突變細胞可以躲避宿主的監視功能，那么經過一定生長慢慢變成腫瘤。而腫瘤術后的轉移可能是機體的抗腫瘤免疫功能降低所致[6-8]。細胞免疫應答的關鍵環節就是Th淋巴細胞亞群間接對腫瘤局部微環境的調節作用，其作用體現為Th淋巴細胞亞群通過分泌細胞因子調節殺傷性T淋巴細胞、巨噬細胞、自然殺傷細胞等活性，起到對腫瘤細胞監視及殺傷作用，少數可直接殺傷腫瘤細胞[9-10]。而肺癌患者中Th淋巴細胞數量明顯減少，生理活性減弱，不能充分發揮其免疫作用。同時,肺癌是否發生轉移以及化療與否都對Th淋巴細胞的數量及活性有著一定影響。

本研究結果提示，無論是否轉移，肺癌患者CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率均較對照組有顯著降低。骨轉移組CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率低于未轉移組。化療對于肺癌患者的CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率也有一定影響，化療者CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率較未化療者均有明顯提高。化療順序對肺癌骨轉移患者也有一定的影響，肺癌化療后骨轉移者血細胞CD25+和CD3+/CD4+細胞百分率均顯著低于轉移后化療患者，尤其是CD25+細胞降低更顯著。

綜上所述，肺癌骨轉移患者機體Th細胞百分率降低，機體的免疫功能受到抑制，而化療可以有效恢復Th細胞百分率，化療順序也對其有一定影響。

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