NFSF15基因多態性與克羅恩病易患性的Meta分析

鄧銀芝，張長江，賀建華△※

(恩施州中心醫院 1消化內科， 2內科心血管病中心，湖北 恩施445000)

克羅恩病(Crohn disease,CD)是一種病因尚不十分明確的非特異性慢性胃腸道炎性肉芽腫疾病,目前認為其發病與環境、遺傳、微生物及免疫等因素有關。CD的家族聚集現象和CD發病的種族差異性提示遺傳因素在CD發病過程中起著至關重要的作用。NFSF15(tumor necrosis factor superfamily，member15)基因能編碼包括腫瘤壞死因子超家族成員15(Tumor necrosis factor superfamily-15,TNFSF15,TL1A又名TNFSF15)與DR3炎性因子在內的多種細胞因子,鑒于炎癥在CD發生、發展中的作用,國內外學者對NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD易患性做了大量研究,但由于單個研究樣本量小和地區差異,導致各研究結論不一。為解決這些分歧,本研究對已發表的相關研究進行Meta分析,以明確NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD風險的相關性。

1 資料與方法

1.1納入和排除標準

1.1.1納入標準 ①涉及NFSF15基因多態性與CD易患性相關性的文獻；②所有納入研究均為公開發表的病例對照或巢式病例對照；③全文發表；④文獻中數據完整,能直接或間接提供統計指標比值比(odds ratio,OR)及95%CI；⑤病例均為經確診CD患者,其診斷符合診斷標準[1]或者內鏡、組織、影像學綜合檢查結果。

1.1.2排除標準 ①研究未設立對照組；②具體數據描述不清；③重復報道；④CD相關的綜述以及動物實驗。

1.2檢索策略 計算機檢索英文數據庫EMbase、PubMed以及中文數據庫CBM、CNKI,檢索時間均為1990年6月至2013年6月。英文檢索式:“Crohn disease or CD or inflammatory bowel disease or IBD”AND“mutation OR variant OR polymorphism”AND“NFSF15 OR rs3810936”；中文檢索式:“克羅恩病或CD”和“基因多態性或突變”和“NFSF15 OR rs3810936 ”。文種限中、英文,手工檢索相關學術雜志。

1.3資料提取 由兩位評價者獨立根據納入標準對文獻進行篩選,通過討論達成一致。兩位評閱人獨立完成對原始文獻記錄數據的收集。提取以下一般信息:第一作者姓名、出版年份、國家、病例組和對照組基因型分布及其頻率(表1)。

1.4方法學質量評價 根據STREGA原則，對納入研究進行質量評價[2]。文獻質量指標包括：①樣本量是否充分；②病例診斷是否清楚；③病例組和對照組匹配情況；④對照組基因型分布是否符合H-W遺傳平衡定律；⑤基因檢測方法是否合理；⑥數據是否充分。以上6項，每滿足一項記為1分，其中總分≥3分者為質量可靠。

1.5統計學方法 應用Revman5.0軟件進行Meta分析。采用χ2檢驗分析各研究結果間的異質性；各研究結果間的異質性檢驗采用Q檢驗和P統計量,P<0.05提示各研究間存在異質性,I2用來衡量異質性大小程度，若各研究結果間不存在異質性，合并采用固定效應模型計算OR；反之采用隨機效應模型，合并效應OR，P<0.05為差異有統計學意義。敏感性分析為依次排除單個文獻后重新進行Meta分析,觀察合并效應是否改變,森林圖對稱性判斷是否存在發表偏倚。

2 結 果

2.1文獻檢索結果 根據中英文檢索式初檢出文獻134篇，經閱讀文題和摘要初篩，納入文獻51篇，進一步查找和閱讀全文復篩，最終納入5篇文獻，包括中文文獻1篇和英文文獻4篇[3-7]。所有納入研究均為國內病例對照研究。共納入患者3328例，其中CD患者1178例，對照人群1550例。TT、TC、CC基因型在病例組和對照組的分布分別為50.11%、41.45%、8.44%和35.81%、47.94%、16.26%。納入的研究時間分布為2005～2010年,研究人群主要分布在日本、韓國、英國、中國(表1)。

2.2納入研究質量評價 根據評分標準對文獻評分，5篇文獻評分分別為4,5,4,3,4分；均分為4分提示文獻質量較好。

2.3Meta分析結果 NFSF15基因rs3810936多態性與CD易患性Meta分析結果顯示，純合子比較模型(CC vs TT):OR=0.34,95%CI0.17～0.72,P=0.004；雜合子比較模型(TC vs TT):OR=0.62,95%CI0.54～0.72,P<0.01；顯性遺傳模型(CC+TC vs TT):OR=2.18,95%CI1.19～4.02,P=0.01；隱性遺傳模型(CC vs TC+TT):OR=0.46,95%CI0.25～0.84,P=0.01(圖1～圖4)。

表1 納入研究的一般情況以及基因型分布

圖1 NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD易患性CC vs TT比較Meta分析

圖2 NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD易患性TC vs TT比較Meta分析〗

圖3 NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD易患性CC+TC vs TT比較Meta分析

2.4發表偏倚分析 四種基因模型的Meta分析漏斗圖均對稱，提示無發表偏倚存在(圖5～圖8)。

2.5敏感性分析 依次單獨剔除1篇文獻后,各基因模型Meta分析結果未見明顯改變，提示Meta分析結果穩定。

圖4 NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD易患性CC vs TC+TT比較Meta分析

圖5 CC vs TT比較漏斗圖 圖6 TC vs TT比較漏斗圖 圖7 CC+TC vs TT比較漏斗圖 圖8 CC vs TC+TT比較漏斗圖

3 討 論

CD是多因素共同作用導致的疾病,其發病機制主要與腸道菌群，異常免疫介導的組織損傷和遺傳易患性有關。CD患者發病過程中腸膜細分泌干擾素γ、腫瘤壞死因子和白細胞介素2、白細胞介素18，這些促炎癥細胞因子在腸道黏膜的炎癥發生、發展中發揮重要作用[8-9]。

研究表明，CD患者腸道黏膜固有層T細胞表達NFSF15基因編碼基因產物TL1A上調，且CD患者結腸炎性區的TL1A mRNA水平明顯高于非炎性區，目前推斷是通過促進腸黏膜固有層單核細胞分泌干擾素γ繼而引起炎癥[10]。由此可見，NFSF15在CD黏膜炎癥的發病機制中發揮重要作用。

在發展中國家對CD的研究已成為消化內科醫師關注的一個熱點。激素和免疫抑制劑仍是CD內科治療活動期的基礎藥物，但療效不佳。因此，明確CD的病因，以期對因治療是國內外消化醫師迫切需要解決的問題。作為編碼NFSF15的NFSF15基因自然引起人們的關注，本研究通過Meta分析顯示，NFSF15基因rs3810936多態性與CD易患性有明顯關聯性。本研究通過Meta分析解決單個研究樣本量小和地區差異等問題，但也存在以下不足：①本研究Meta分析只檢索了國內外幾個代表性數據庫，檢索語言僅為中文和英文，且只限于公開發表的文獻，影響了納入研究的全面性。②納入研究的人群無法分清民族。③飲食和社會環境是影響CD易患性的重要因素,本研究納入病例-健康對照組的研究往往忽略上述因素。由于存在以上的局限性，為進一步明確NFSF15基因rs3810936位點多態性與CD易患性的內在聯系，尚需要開展更多樣本量更大、設計更嚴謹、視角更寬的研究。

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