AFP聯合AFP-L3、GPDA和CA125在原發性肝癌診斷中的可能價值

鄭 飛，王春暉，周文平

(中國人民解放軍沈陽軍區總醫院肝膽外科，沈陽 110840)

原發性肝癌發病隱匿，早期診斷十分困難[1]。大多患者確診時已處于中晚期，因而容易錯失治療良機[2]。盡早發現原發性肝癌具有主要的臨床意義。血清腫瘤標志物檢測以其簡捷、廉價的優勢成為原發性肝癌早期診斷的常用手段。甲胎蛋白(α-fetoprotein，AFP)是公認的原發性肝癌腫瘤標志物，但有30%～40%的漏診率[3-5]。近年的研究顯示，單個腫瘤標志物檢測原發性肝癌的靈敏度和特異度均不高，多種腫瘤標志物聯合檢測能提升檢測靈敏度和特異度[6-10]。AFP聯合甲胎蛋白異質體(human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3)、甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶(glycylproline dipeplidyl aminopeplidase，GPDA)和糖類抗原125(carbohydrate antigen 125，CA125)在診斷原發性肝癌方面的研究卻十分有限。本研究以原發性肝癌患者、乙型肝炎患者以及正常體檢者為研究對象，測定了AFP、AFP-L3、GPDA和CA125的血清水平，并評價了單個及多項腫瘤標志物聯合檢測對診斷原發性肝癌的可能價值。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取中國人民解放軍沈陽軍區總醫院2010～2012年度收治的患者和體檢人群，受試對象在充分了解本研究后簽署了知情同意書。原發性肝癌組65例，男35例、女30例，年齡31～78(54.3±13.9)，原發性肝癌的診斷依據中國抗癌協會肝癌專業委員會修訂的《原發性肝癌的診斷與分期標準》(2001版)[11]；乙型肝炎組57例，男29例、女28例，年齡38～77(56.8±11.0)，乙型肝炎的診斷依照中華醫學會傳染病與寄生蟲學分會、肝病學分會聯合修訂的《病毒性肝炎防治法案》(2000版本)[12]；正常組共60例，男27例、女33例，年齡41～65(54.9±6.8)，均為本院體檢中心體檢合格者，確認無心、肺、肝、腎等器官病變，無消化系統和血液系統病史。采用肝穿刺活檢、病理切片、B型超聲、CT、MRI、血管造影等檢查手段對所有病例進行確診。3組間在性別、年齡方面的差異無統計學意義，具有可比性。

1.2血樣收集 清晨空腹條件下抽取受試者靜脈血2 mL，并立刻離心分離出血清，吸取血清適當分裝并儲藏于-20 ℃冰箱備用。

1.3儀器試劑和方法 采用親和吸附法測定AFP-L3，所用AFP-L3親和吸附離心管及Abbott I2000全自動免疫分析儀配套試劑均為北京熱景生物技術有限公司生產。經過吸附離心后的AFP-L3洗脫液與原血清樣本一同在Abbott I2000全自動免疫分析儀中測定AFP-L3和AFP的含量，計算AFP-L3占總AFP的比例(%)，比例AFP-L3>10%判定為陽性，AFP>20 μg/L判定為陽性。采用速率法測定GPDA水平，GPDA測定試劑盒購自浙江夸克生物有限公司，并在Beckman全自動生化分析儀LX20上進行，GPDA>120 U/L判定為陽性。CA125采用電化學發光法測定，所用試劑為Abbott Axysym化學發光儀配套試劑，在Abbott Axysym化學發光儀上進行，CA125>35 kU/L判定為陽性。

2 結 果

2.1AFP、AFP-L3、GPDA和CA125血清水平的比較 原發性肝癌組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125四種腫瘤標志物的血清水平比乙型肝炎組和正常對照組的對應物都高，差異有統計學意義(P<0.05)。乙型肝炎組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125腫瘤標志物的血清水平比正常組高(均P<0.05)。乙型肝炎組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125腫瘤標志物的血清平均水平均超過正常參考值(表1)。

表1 三組AFP、AFP-L3、GPDA和CA125血清水平比較

AFP：甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白異質體；GPDA：甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶；CA125：糖類抗原125

2.2AFP、AFP-L3、GPDA和CA125單項檢測與多項聯合檢測陽性率的比較 AFP聯合AFP-L3、GPDA和CA125的檢測陽性率均比每一單項檢測陽性率有所提高(P<0.05)；四項聯合檢測靈敏性提高到92.3%(P<0.05)。乙型肝炎組有不少病例也為AFP、AFP-L3、GPDA和CA125陽性；正常對照組未檢測到AFP、AFP-L3、GPDA和CA125陽性的病例(表2)。

表2 AFP、AFP-L3、GPDA和CA125單項檢測與多項聯合檢測陽性率的比較 [例(%)]

AFP：甲胎蛋白；AFP-L3：甲胎蛋白異質體；GPDA：甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶；CA125：糖類抗原125

3 討 論

原發性肝癌在我國發病率位居第二[1]。AFP作為一種診斷原發性肝癌的重要腫瘤標志物已被醫學界公認，并被廣泛用于原發性肝癌的排查、確診、療效評估以及復發預測等，但AFP在診斷原發性肝癌時存有一定遺漏，給原發性肝癌早期診斷造成了困難[3-5]。研究表明，約10%肝癌患者血清無AFP，且高達30%的肝癌患者的血清AFP水平很低[13]。本研究結果發現，AFP單項檢測陽性率為78.5%，該報道和前人結果相呼應[6,14]。傳統意義上利用AFP檢測原發性肝癌的診斷方法很少，尋找更特異、更敏感的診斷方法是原發性肝癌診斷中的熱點和難點。

多種腫瘤標志物聯用的血清學檢測已成為當今診斷原發性肝癌的主流方法，迄今為止，已有大量研究探究了多種不同腫瘤標志物聯合檢測在診斷原發性肝癌上的臨床效用，但AFP聯合AFP-L3、GPDA和CA125的血清學檢測在診斷原發性肝癌方面的研究仍十分缺乏[6-7,9-10]。AFP-L3是經由美國食品藥品管理局認證的新型肝癌腫瘤標志物，是肝癌細胞特異性AFP，對原發性肝癌的臨床診斷具有很高的實用價值[15]。本研究數據顯示，AFP-L3單項檢測陽性率為76.9%，與AFP單項檢測陽性率78.5%相近，與上述文獻報道結果一致[15]。GPDA是存于人體組織和血液的二胎萘酰氨酶，Kojima等[16]和朱薇等[17]的臨床研究證實，肝膽疾病(特別是肝癌)患者的血清GPDA水平上升顯著，其對肝癌診斷具有一定臨床價值，然而它的陽性率和特異性卻不高。本研究發現GPDA單項檢測陽性率為69.2%，該結果與以往文獻報道相類似，表明了GPDA在陽性率方面存有局限[18]。CA125是一種腫瘤相關性糖類抗原，它是對胰腺癌和卵巢癌診斷有較高價值的腫瘤標志物，近年研究證實CA125在原發性肝癌患者的血清中也出現上升，尤其在晚期原發性肝癌病例中升高更為顯著[8,19]。本研究發現CA125單項檢測陽性率為70.8%，該數據得到前人研究結果的支持，證明CA125在原發性肝癌診斷中具有一定作用[6]。

本研究發現AFP聯合AFP-L3、GPDA以及CA125后的檢測陽性率均比每一單項檢測的陽性率有所提高，AFP-L3、GPDA和CA125能作為提高AFP檢測陽性率的輔助腫瘤標志物，說明兩項聯合檢測能提高原發性肝癌診斷的陽性率，具有一定的臨床實用價值。AFP、AFP-L3、GPDA和CA125四項聯合檢測后的陽性率提高到92.3%，有顯著上升。聯合多種腫瘤標志物的血清學檢測對提高原發性肝癌的診斷陽性率有顯著的貢獻，能夠彌補單項檢測陽性率相對低的不足之處，可以提高檢出率并同時減低漏診率，具有較高的臨床應用價值。另外，聯合多種腫瘤標志物的血清學檢測可能在評估原發性肝癌療效和轉歸方面具有一定指導作用，值得在實際臨床診斷中推廣運用。

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