不規則抗體導致ABO正反定型不符處理探討

鄭建華,王碰治,許偉雄

(解放軍第180醫院檢驗科,福建 泉州 362000)

在進行臨床治療的過程中，難免會遇到需要進行輸血救治的患者，但是輸血的前提是能夠進行精確的血型鑒定，否則由于血型不符導致患者出現溶血現象，造成患者生命危險[1]，因而正確鑒定ABO血型是安全輸血的重要保證。本研究對不規則抗體ABO正反定型不符的原因及其處理辦法進行了探討與分析，現報告總結如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 對解放軍第180醫院于2010年12月至2012年10月收治的需要進行輸血治療的患者進行血型鑒定統計，120例全部為正反定型困難的患者，其中男55例、女65例，年齡23～67(45.5±2.1)歲。

1.2試劑 在進行血型檢測的過程中，所用的抗-A、抗-B、抗-AB、抗-O標準血清全部由上海生物制藥有限公司提供，主要采用血型正反定型和ABO亞型認定試驗以及唾液血型物質測定與吸收放散試驗、抗人球蛋白試驗、抗體鑒定試驗等方法測定。

1.3方法 正定型測定采取抗-A、抗-B、抗-AB血清進行檢驗；反定型測定用AB、AC及自身細胞進行檢驗。對提取試管法和微柱凝膠法血型正反鑒定中血型不一致的標本，取患者血清進行篩選，對血清中的抗體在進行鑒定的同時再對抗體的性質進行區分。抗體篩選結果為陽性的標本還要進行繼續鑒定，對患者的紅細胞進行驗證性檢測，確定患者的血清型。

2 結 果

2.1ABO正反定型不符原因 通過對120例患者的血液標本進行分析，導致ABO正反定型不符原因主要表現為自身冷抗體和血漿成分異常，以及ABO亞型與AB抗原性減弱，具體的數據分析如表1所示。

2.2再次血型確定結果 通過用不規則抗體相應抗原陰性細胞制備反定型細胞再次進行ABO血型反定型檢測分析，ABO血型正反鑒定結果和最終確定結果情況如表2所示。

表1 120例患者ABO血型正反定型不符原因分析

表2 正反定型后各型血液個數及最終確定各血型個數

3 討 論

ABO血型鑒定的最終結果會受到各種內外在因素的影響，可導致血型檢測失誤而出現患者的溶血現象[2-4]。在進行O型血的鑒定和交叉配血時，一旦發現正反定型的檢測結果不同，應該立即重新抽取血樣，并且采用合格試劑進行嚴密的檢測，排除人為和其他外在可避免因素對血型鑒定的影響，正確測定樣本的血型[5]。

本次血型鑒定在進行正反定型和篩選之后，又對紅細胞進行了驗證性的檢測，通過研究分析，臨床中導致ABO正反定型不符原因主要表現為自身冷抗體和血漿成分異常以及ABO亞型與AB抗原性減弱等。本組的數據顯示，自身冷抗體和血漿成分異常以及ABO亞型與AB抗原性減弱所占的比例分別為38.3%、15.0%、32.5%、14.2%。由此可見，在導致ABO血型正反定型不符的原因中，自身冷抗體和ABO亞型是主要因素[6]。

在一般健康人的體內，自身冷抗體只有在適宜的溫度之下才具有活性，加之冷凝的效價較低，通常在1∶16以下，所以一般情況下不會發生凝集。但是在發生病毒性肺炎，自身免疫性溶血性貧血等疾病時，通常會導致患者血清中的高效價凝集素增多，從而使血液出現凝固，導致正反定型不符[7]。針對這一因素，在進行血型檢測的過程中，要先對血清和紅細胞在適宜的溫度(37 ℃)下孵化15 min，高速離心后觀察血液標本的凝集狀況；或者使用自體紅細胞充分吸收血清，然后進行反定型檢驗。但是，如果采集的血液標本已經發生凝固，那么必須經過處理才能進行進一步的檢測，否則檢測結果仍會受到影響。此時如果患者必須進行輸血救治，那么采用的血液可以是與患者進行交叉配血之后的O型洗滌紅細胞配合AB血型者的血漿。

ABO亞型導致ABO正反定型不符居第二位，導致ABO正反定型異常的因素就是ABO抗原亞型。所謂血漿抗原亞型是指血漿抗體表現出A1、A2、A3、Ax及Am幾種不同的抗原類型，這幾種抗原雖然同樣屬于A型血，但是并不完全相同。存在多種亞型的患者，血清中的抗原性減弱，不易進行定型。對于這樣的患者，一般采取以下檢測方法來對其血液進行定型：在進行一般檢測的基礎上，正定型時增加抗-AB、抗-A1等其他抗體的檢測，分別觀察在各種抗體的影響下血標本的凝集狀況；反定型時，在進行常規處理之后，還要進行A1C、A2C的檢測，從而確定血清中抗-A1的存在。另外，根據各個亞型的細胞放散能力強而吸收能力弱的特點，可以對含有亞型抗體的標本進行吸收放散實驗；或者也可以根據在一般情況下絕大多數的人唾液中含有與血型相關的物質，從而對唾液中的抗體進行檢測，確定血型，增加血型的可靠性[8]。

血漿成分異常是導致ABO正反定型不符的另一個原因。由于一些疾病的原因，如肝臟疾病和結核病等經常會不同程度地使患者血液中的球蛋白增多，而心肌疾病、細菌感染等又可以導致纖維蛋白增多。在疾病的治療過程中，一些藥物的使用也會導致紅細胞的凝集，這些因素都會導致血型確定的誤差[9]。為了避免假凝集干擾最后的觀察，通常在可能發生或者已經發生凝集的血清中滴加0.9%氯化鈉溶液進行抗凝，發生嚴重凝集者可以用抗人球蛋白與血液配比，防止凝集的發生。

AB抗原性減弱在ABO正反定型不符中屬于一種常見的原因。由于長期大量服用免疫抑制劑以及一些導致機體抵抗力降低的疾病，全都可以導致血清的抗原性減弱，血清抗體價效減弱，導致血型鑒定困難。對于抗體減弱的標本，在進行反定型時多采取延長反應時間、增加反應物的用量的方法，從而增加鑒定結果的可靠性。但是此處要特別考慮，對于出生不到0.5周歲的新生兒，由于自身系統尚未發育完全，血清價效低，不易發生凝集反應，所以一般將正定型測定的血型作為新生兒的血型[10]。

通過采取針對性的處理，再次進行ABO血型正反鑒定分析，A型確定為53例，B型確定為37例，O型確定為25例，AB型確定為5例。通過數據分析，患者在給予相應的處理后能夠有效降低ABO正反定型不符的情況。臨床上輸入正確的血型是需要進行輸血救治的患者救治成功的關鍵因素之一，但是在實際操作過程中，確實有一些患者因為輸血的問題而死亡，并且這些因為輸血死亡的患者中，大部分是因為輸入的血型與自身血型不相符合而導致溶血死亡。輸入不相符的血液的重要因素就是患者或者獻血者的血型鑒定錯誤，而血型鑒定的正誤相對于其他引起輸血的危險因素更不容易被發覺，并且不規則抗體檢驗血型作為臨床常用的血型鑒定方法，出現正反血型不符的現象更不易被醫務人員所發覺。因而，正確鑒定ABO血型是臨床輸血工作中的重要環節，一旦出現血型鑒定不清的情況下，必須要采取有效措施，對血型進行準確的鑒定，從而保證輸血安全。

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