系統性紅斑狼瘡患者外周血淋巴細胞亞群分析

吳文冰，林一，陳雯

(福建省立醫院檢驗科，福建 福州 350001)

SLE是一種伴有多系統損害癥狀的慢性系統性自身免疫性疾病，好發于女性，其發病機制尚不明朗，推測其可能是易感者因免疫耐受性減弱，外來抗原(如病原體等)引起B淋巴細胞活化，B淋巴細胞通過交叉反應與模擬外來抗原的自身抗原結合，同時將抗原提呈給T細胞，使之活化，B淋巴細胞在T細胞活化刺激下產生大量不同類型的自身抗體，從而造成組織損傷，在這過程中也伴有NK細胞功能失調[1，2]。為進一步了解T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞及NK細胞在SLE發病中的作用，我們對53例SLE患者進行淋巴細胞亞群的絕對計數，為探討SLE發病機制，判斷病程及預后提供實驗依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2011年1月至2011年12月間，按照美國風濕病協會1997年修訂的診斷標準[3]確診的SLE患者53例，并按照SLE疾病活動性指數評分標準進行SLEDAI評分標準[4]，分為活動期組(SLEDAI＞9)和非活動期組(SLEDAI≤9)，同期健康體檢者為對照組，各組資料見表1。

表1 各組一般資料

1.2 試劑 CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+及CD19+檢測試劑盒及BD TrucountTMTubes均為美國BD公司。

1.3 方法 CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+及CD19+采用BD FACSCalibur流式細胞儀檢測，所有操作嚴格按照說明書進行。

1.4 統計學方法 所有數據采用SPSS10.0進行處理，數據以均數±標準差(x±s)表示，組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

各組 CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+及CD19+絕對計數及百分比結果見表2。

表 2 各組 CD3+、CD4+、CD8+、CD3-CD16+CD56+及 CD19+絕對計數及百分比結果(x±s)

3 討論

正常免疫應答需要各種免疫細胞，尤其是淋巴細胞亞群之間的相互協作和制約。T淋巴細胞分為輔助/誘導T淋巴細胞(CD3+CD4+CD8-)和抑制/細胞毒T淋巴細胞(CD3+CD4-CD8+)等，其中CD4+T細胞與CD8+T細胞之間的相互平衡對機體免疫應答具有關鍵的作用。SLE是免疫性疾病，因而有關T淋巴細胞亞群在SLE發病過程中的作用的研究較多，但結論不太一致。過去研究認為活動期SLE CD4+、CD4+/CD8+比值升高，CD8+降低[5]，新近研究認為活動期 SLE CD4+、CD4+/CD8+比值降低，CD8+不變或升高[6],據此推測T淋巴細胞亞群改變與SLE的發病密切相關。本研究結果顯示：SLE活動期組和SLE非活動期組及健康對照組相比，CD4+和CD4+/CD8+比值明顯降低 (P<0.05)，CD3+和 CD8+改變無統計學意義 (P>0.05)；SLE非活動期組和健康對照組相比，差異均無統計學意義(P>0.05)。活動期SLE CD4+減少主要是因為CD4+亞群中的抑制誘導T淋巴細胞減少造成，繼而不能誘導CD8+對B淋巴細胞產生抑制作用，因此，活動期SLE雖有CD4+減少，但仍可出現體液免疫亢進[7]。此外，CD4+輔助T淋巴細胞又可分為Th1和Th2，有關SLE發病過程中是Th1為主，還是Th2為主的研究結果也不盡一致[8-11]。我們推測造成上述研究結果不一致的原因可能與所選的病例有一定的關系，SLE是伴有多系統損害自身免疫性疾病，即使SLEDAI評分一致，其臨床表現及病程也不盡相同。

SLE活動期組B淋巴細胞比非活動期組及健康對照組明顯增多(P<0.05)，而非活動期組及健康對照組B淋巴細胞無明顯差異(P>0.05)，其原因可能與前面提到的抑制誘導T淋巴細胞有關。SLE活動期組B淋巴細胞增多可能與大量自身抗體的出現有關。

SLE活動期組NK細胞比非活動期組及健康對照組明顯減少(P<0.05)，而非活動期組及健康對照組B淋巴細胞無明顯差異(P>0.05)，這與國外研究相近[12]。NK細胞是體內非特異性免疫效應細胞，對多種細胞，尤其是T、B淋巴細胞具有免疫調節作用，SLE活動期組NK細胞減少，對T、B淋巴細胞免疫調節作用減弱，從而導致多種自身抗體產生[13]。活動期SLE患者經過治療，NK細胞數有所增多，提示NK細胞在一定程度上可以反映機體免疫失衡狀態。

綜上所述，T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞及NK細胞的數量和/或功能的改變在SLE的發生發展各階段中發揮著重要的作用。檢測SLE患者外周血淋巴細胞亞群，對全面了解患者機體免疫狀態，判斷病情及指導臨床治療具有重要意義。

[1]葉任高,陸再英.內科學[M].第 5版,北京:人民衛生出版社,2001,909-915.

[2]葉任高,陸再英,謝毅,等.內科學[M].第 6 版.北京.人民衛生出版社,2007,892-900.

[3]Hochberg MC.Updating the american college of rheumatolo gy revised criteria for the classification of systemic lupus erythematosus[J].Arthritis Rheum,1997,40(9):17-25.

[4]Bombardier C，Gladman DD，Urowitz MB，et a1.Derivation of the SLEDAI.A dise aseactivity index for lupus patients.The Committee on Prognosis.Studies in SLE[J].Arthritis Rheum,1992,35(6):630-640.

[5]Raziuddin S，Nur MA，Alwabel AA．Increased circulating HLA-DR+CD4+T cells in systemic lupus erythematosus:olterations associated with prednisolone therapy[J].Scand J Immunol,1990,1(2):139-145．

[6]Bacchetra R，Passerini L，Gambineri E．Defective regulatory and effector T cell functions in patientswith FOXP3 mutatlons[J].JClin Invest,2006,16(6)：1713-1722，

[7]Meada N，Sekigawa I，Iida N，et al．Relationship between CD4+/CD8+T cell ratio and T cell activation in systemic Lupus erythematousus[J].Scand Rheumatd,1999,28(3):166-170．

[8]Hasegaw AK，Hayashi T，Maeda K．Promotion of lupus in NZB ×NZWF1 mice by plasmids encoding interferon (ifn)-γbut not by those encoding interleukin(IL)-4[J].JComp Pathol,2002,127(1):1-6.

[9]Amel-Kashipaz MR，Huggins ML，Lanyon P，et al.Quantitative and qualitative analysis of the balance between type 1 and type 2 cytokine-producing CD8(-)and CD8(+)T cells in systemic lupus erythematosus[J].JAutoimmun,2001,17(2):155-163.

[10]Solomou EE,Yuang TJ,Gourley MF,et al.Molecular basis of deficient IL-2 production in T Cells from patients with systemic lupus erythematosus[J].J Immun,2001,166(6):4216-4222．

[11]Szegedi A，Simis E，Aleksza M，et al．Ultraviolet-A1 phototherapy modulates Th1/Th2 and Tc1/Tc2 balance in patients with systemic lupus erythematosus[J].Rheumatology,2005,44(7):925-931.

[12]Stohl W，Elliott JE，Hamilton AS，et al.Impaired recovery and cytolytic function of CD56+T and non-T cells in systemic lupus erythematosus following in vitro polyclonal T cell stimulation.Studies in unselected patients and monozygotic disease-discordant twins[J].Arthritis Rheum,1996,39[11]:1840-1851.

[13]萬臘根,鞠北華,黃清水,等.SLE病人自身抗體檢測的循證檢驗研究[J].實驗與檢驗醫學,2009,27(5):441-444.