自制尿微量蛋白質控液測定的應用

解冰，江利萍，王軍，夏商

(鎮江市中西醫結合腎臟病研究所，江蘇鎮江212028)

自制尿微量蛋白質控液測定的應用

解冰，江利萍，王軍，夏商

(鎮江市中西醫結合腎臟病研究所，江蘇鎮江212028)

目的通過自制尿微量蛋白質控液對尿微量白蛋白(UmAlb)、α1-微球蛋白(α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-MG)的測定進行質量控制。方法采用全自動生化分析儀對UmAlb、α1-MG、β2-MG的進行測定，測定方法為免疫比濁法，根據測定結果進行分析并作出處理意見。結果UmAlb第一份質控液的第38次和第二份質控液的第40次和第47次均有超出3SD的失控現象；α1-MG第一份質控液的第30次和第二份質控液的第34次各有一次超出3SD的失控現象；β2-MG第一份質控液的第12次有一次超出3SD的失控現象。結論測定前一定要先行檢查試劑，試劑如果不夠做一批結果時，就直接將試劑換掉，并重新定標后再做標本，這樣才可以避免發生失控現象，保證臨床結果有較好的準確性和重復性。

質控液；尿微量白蛋白；α1-微球蛋白；β2-微球蛋白

尿微量蛋白測定有很多項目，如尿微量白蛋白(Urine microalbumin，UmAlb)、α1-微球蛋白(α1-Microglobulin，α1-MG)、β2-微球蛋白(β2-Microglobulin，β2-MG)、α2-微球蛋白(α2-Microglobulin，α2-MG)、視黃醇結合蛋白(Retinol Binding Protein RBP)、TH-蛋白(T-H Protein，THP)、轉鐵蛋白(Transferrin，TF)等。我們在日常工作中開展U-mAlb、α1-MG和β2-MG這3個項目的測定。雖然目前各實驗室均可開展UmAlb、α1-MG、β2-MG的測定，方法學也有多種如免疫透射比濁法、免疫散射比濁法、ELISA、放射免疫分析法等。但工作中一般是用試劑盒內的標準進行定標后就做樣本，一般不用質控液來進行質量控制，有的項目如β2-MG試劑盒內帶質控液，可以進行質量控制，但量少，不能多次地進行測量，故不能常規性地用于臨床質控分析，而UmAlb、α1-MG試劑盒內沒有質控液，故不能對結果進行質控分析。所以我們設想通過對自制尿微量蛋白質控液的測定，這樣可以對我們日常檢測的結果起著質量分析和控制作用，使發出的每一份報告均可靠、可信，對患者的治療和監測起著一種積極的作用。現將結果匯報如下。

1 材料與方法

1.1 質控品制備我們通過留取腎功能衰竭二期(177μmol/L＜Scr≤444μmol/L)[1]病人的尿液(晨第二次尿)3份，每份約50ml，混勻后用0.1mol/L NaOH或0.1mol/LHCl調整pH為7.0左右，中速定性濾紙(杭州富陽產)過濾，用LXJ-II型離心機3000rpm離心20min，取上清液約100ml，加NaN30.5g溶解后，用塑料試管分裝加塞，每管約0.5ml，置-70℃冰箱保存，作為質控物使用，用時取1支放37℃水溫箱速融。

1.2 儀器BS-200全自動生化儀。

1.3 試劑和方法UmAlb試劑盒由寧波賽克生物技術有限公司提供，免疫比濁法，波長：340nm；β2-MG試劑盒由北京科美生物技術有限公司提供，乳膠增強免疫比濁法，波長：540nm；α1-MG試劑盒由寧波賽克生物技術有限公司提供，免疫比濁法，波長：600nm。

1.4 操作取10支質控液融解后混勻備用，測定UAlb時先用生理鹽水稀釋10倍再進行操作；β2-MG和α1-MG均用原尿操作。對上述三項目進行定標，測定質控液的值并于第二天再取10支質控液測定，測定的同時將β2-MG試劑盒內的質控液當作標本測定，要求觀察結果在1SD內。以后每次做標本時取一支當做標本測定并做好記錄，如果出現出控現象，則先行檢查試劑，再另取一支重新測定，如在質控允許范圍內則將標本重新做一遍，如不在允許范圍內，則先重新定標后測定質控液，如結果在質控允許范圍內后再將標本重新做一遍。

1.5 統計質控圖用EXCEL作圖，計算靶值及標準差用SPSS13.0統計軟件。

2 結果

我們工作安排一般是每周測定2次，現已1年多，對臨床結果起著較好的監控作用。UmAlb質控液初定靶值(x±s)分別為32.5±2.32mg/L和27.5±1.97mg/L,在測定后重新計算靶值分別為31.8± 3.24mg/L和27.94±3.15mg/L。在第一份質控液的第38次和第二份質控液的第40次和第47次均有超出3SD的現象提示為失控；在第一份質控液的第8、22次和第二份質控液的第5、9、18、34次均有超出2SD的現象提示警告。發現失控后我們均再次檢查試劑，更換質控液并進行定標后重做，結果均在控，并顯示在出控后的一個數值。

α1-MG質控液初定靶值(x±s)分別為13.61± 1.02mg/L和24.61±1.42mg/L。在測定后重新計算靶值分別為13.74±1.39mg/L和24.67±1.95mg/L。在第一份質控液的第30次和第二份質控液的第34次各有一次超出3SD的現象，提示為失控；在第一份質控液的第17、25次和第二份質控液的第6、10次均有超出2SD的現象，提示警告。失控后我們均再次檢查試劑，更換質控液并進行定標后重做，結果均在控，并顯示在出控后的一個數值。

β2-MG質控液初定靶值(x±s)分別為3.45± 0.19mg/L和2.31±0.16mg/L。在測定后重新計算靶值分別為3.36±0.25mg/L和2.35±0.20mg/L。β2-MG在第一份質控液的第12次有一次超出3SD的現象，提示為失控；在第一份質控液的第3、26次和第二份質控液的第17、28次均有超出2SD的現象，提示警告。失控后我們均再次檢查試劑，更換質控液并進行定標后重做，結果均在控，并顯示在出控后的一個數值。

導致上述失控的原因經檢查均為試劑2用完后，直接添加新的試劑，并且是不同批號的，易發生失控現象。究其原因為尿微量蛋白測定的標本數量相對較少，不可能和生化試劑一樣，每次購進多盒，一般只購進1～2盒，而且每次用后均是試劑2偏少，故操作人員多不注意，在發現試劑2沒有了，就直接添加后再做。而我們所帶的質控液均是當作標本做，沒有設置質控位，因質控位已有生化質控液。同時我們為不影響標本的順序編號，所以將所帶質控液均放置在標本的最后進行測定，所以每次更換試劑后均是在最后測到質控液，我們認為這樣操作可以對結果的監控起著更好的效果。在發現失控后均首先進行檢查試劑，再重新定標，再次測結果一般均可。在做UAlb時最易發生警告現象，也說明此項目做的不太理想，以后在做時一定要多注意觀察。

3 討論

現在使用這幾個項目的質控物較少，進口的價格較貴，不適合中小醫院臨床的日常工作所用。鄧氏[2]提出稀釋白蛋白質控品制備尿微量白蛋白質控品的應用，只是提出在一個項目中測定，不能作為多種項目常規使用。范德勝[3]只提出兩種方法檢測質控血清白蛋白的結果分析，但沒有對尿液提出方法。李建珍[4]β2-MG蛋白自建檢測系統及其評價，只是對β2-MG檢測系統及溯源進行了評價，未對其質量控制進行分析評價。蔣紅君[5]某型號生化分析儀β2-MG蛋白測定精密度評價，也只對β2-MG檢測系統的批內和總精密度進行比較。對α1-MG的質量控制方面的文獻基本沒有查到。在查閱文獻過程中沒有找到更為明確的提出UAlb、β2-MG和α1-MG在日常工作檢測過程中的質量控制和分析。根據張瑞[6]提出的“質控品是含量已知或未知的處于與實際標本相同或近似基質中的特性明確的物質，含量已知的室內質控品用于臨床實驗室日常工作的室內質控，標準物質本身也可以用于日常臨床檢測的室內質量控制。但由于室內質量控制的主要目的是為了監測實驗室測定的重復性，通常不需要準確定值的標準物質作為室內質控品，或使用溯源鏈上等級較低的標準物質即可”。所以我們就設想通過自制一種質控物，并在日常工作中使用，這樣可以對我們的檢驗結果作一監測，以保證檢驗結果的重復性和準確性?，F在尿微量蛋白的測定對臨床工作有著較為重要的臨床意義[7，8]。

我們的體會是在做此類項目時，一定要先行檢查試劑，試劑如果不夠做此一批的結果時，就直接將試劑換掉，并進行定標后再做標本，這樣才可以避免發生失控現象，保證臨床結果有較好的準確性和重復性。

[1]王海燕,鄭法雷,劉玉春,等.原發性腎小球疾病分型與治療及診斷標準座談會紀要[J].中華內科雜志,1993,32(2):131.

[2]鄧慶豐,劉芬芳.稀釋白蛋白質控品制備尿微量白蛋白質控品的應用[J].中國衛生產業,2012,10(9):20.

[3]范德勝.兩種檢測方法測定質控血清及樣本血清白蛋白的結果分析[J].江西檢驗醫學,2006,24(6):535.

[4]李建珍.β2-微球蛋白自建檢測系統及其評價[J].中國民族民間醫藥,2010,19(10):74.

[5]蔣紅君,蔣杰,王凡,等.某型號生化分析儀β2-微球蛋白測定精密度評價[J].國際檢驗醫學雜志,2012,33(5):590-591.

[6]張瑞,李金明.如何正確使用臨床檢驗標準物質[J].中華檢驗醫學雜志,2009,32(1):10-14.

[7]羅琳.尿微量白蛋白測定在高血壓早期腎損害診斷中的應用[J].實驗與檢驗醫學,2008,26(6):710.

[8]李秀琴.超敏C反應蛋白、尿微量蛋白與同型半胱氨酸在2型糖尿病早期腎損傷中的診斷價值[J].實驗與檢驗醫學,2011,29(6): 680.

R446.12

A

1674-1129(2014)05-0545-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.05.020

2014-03-04；

2014-06-24)