高危型HPV檢測技術在提高宮頸癌前病變檢出率中的臨床價值

曹軍 邱建學 陳玉 李春飛

高危型HPV檢測技術在提高宮頸癌前病變檢出率中的臨床價值

曹軍 邱建學 陳玉 李春飛

宮頸癌是女性常見惡性腫瘤之一，位于女性惡性腫瘤病死率的第2位。宮頸癌存在著一個較長時間的、可逆轉的癌前病變期；從宮頸不典型增生發展為原位癌的時間約為10年[1]，若能早發現并及時治療早期宮頸癌，其治愈率達90%以上[2]。細胞學涂片可篩查癌前病變及原位癌，但存在著較高的假陰性和假陽性率。由于長期持續感染高危人乳頭狀瘤病毒（HR-HPV）是宮頸癌發生的必要條件[3]，宮頸癌篩查時通過聯合檢測HR-HPV可大幅度提高陽性及陰性符合率，因此,我們在篩查宮頸癌時行液基細胞學和HR-HPV聯合檢測，現將結果報道如下，并對其臨床應用價值作一探討。

1 資料和方法

1.1 一般資料 2011-07—2013-06我院臨床婦科及體檢中心送檢的宮頸液基細胞學篩查病例（19～70周歲，有性生活史女性），從結果為陽性［包括臨界狀態（非典型鱗狀上皮細胞，ASC-US）］的997例對象中，有陰道鏡下多點病理活檢對照的共347例，同時檢測HRHPV及陰道鏡下多點病理活檢對照的共320例。

1.2 方法

1.2.1 液基細胞學檢測 標本采集及處理用無菌專用細胞刷插入宮頸管內收集宮頸外口和宮頸管的脫落細胞標本，放入專用的細胞標本保存液中，采用安必平液基薄層制片儀完成制片，巴氏染色，TBS分級系統，結果分為正常細胞（NILM）、ASC-US、低度鱗狀上皮內病變（LISL）、高度鱗狀上皮內病變（HISL）。

1.2.2 HR-HPV檢測 采用第二代雜交捕獲技術（HC2），標本用專用小刷于宮頸口與頸管交界處收集分泌物保存于專用試管中。采用美國Digene公司提供的試劑盒，檢測對象為可導致浸潤性宮頸癌的高危HPV的 13種亞型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68），通過基因捕獲技術，儀器分析確定RNA-DNA的含量。

1.2.3 活檢對照 陰道鏡下觀察，醋酸白、碘試驗陽性處進行多點取材。宮頸組織病理學診斷分為：炎癥、濕疣樣變、CIN I、CINⅡ、CINⅢ、浸潤癌。

1.3 觀察指標 （1）液基細胞學檢查：陰性結果包括NILM，陽性結果包括ASC-US、LISL、HISL。（2）HR-HPV檢測：計算機判讀結果＜1pg/ml為陰性，≥1pg/ml為陽性。（3）活檢：炎癥為陰性，陽性結果包括低度病變（濕疣樣變、CINI）、高度病變（CINⅡ、CINⅢ）及浸潤癌。

1.4 統計學處理 采用Excel of Office 2013統計軟件，計數資料比較采用χ2檢驗。

2 結果

2.1 液基細胞學、HR-HPV檢測結果與活檢結果對照 見表1～2。

由表1～2可見，液基細胞學檢測與活檢對照，陽性符合率為56.48%（196/347），其中為LISL及以上的187例，與活檢對照陽性符合率為67.91%（127/187）。液基細胞學和HR-HPV聯合檢測與活檢對照可將陽性符合率提升至82.69%（172/208），其中為LISL及以上陽性的122例與活檢對照陽性符合率可提升至91.80%（112/ 122），與單獨檢測相比，差異均有統計學意義（均P＜0.01）。

2.2 HR-HPV檢測陰性預測值 320例HR-HPV行檢測，有112例檢測結果陰性，對照活檢結果（炎癥106例、濕疣樣變3例、CINⅠ2例、CINⅡ1例），陰性預測值為94.64%（106/112）；高度病變陰性預測值為99.11%（111/112）。

表1 液基細胞學、HR-HPV檢測結果與活檢結果對照（例）

表2 液基細胞學、HR-HPV檢測結果與活檢結果對照（例）

3 討論

一直以來，宮頸脫落細胞學涂片巴氏染色是篩查宮頸癌的主要手段。隨著液基細胞學的發展與推廣，其漏診率和誤診率不斷降低。但由于細胞學涂片是人為主觀判斷結果，可重復性差，受診斷醫生經驗和水平的制約；并且我國宮頸癌大批量篩查時往往集中在基層醫療單位，專職病理細胞學醫生的缺乏和人工閱片的極限（100張/工作日），導致其結果不可避免的存在著假陰性和假陽性。研究表明，長期持續感染HR-HPV是宮頸癌發生必要的生物學條件[4]。因此，在宮頸癌篩查時只要能夠準確地檢測出是否感染了HR-HPV，可以減少液基細胞學涂片的漏診和誤診。

本文HR-HPV檢測采用第二代雜交捕獲技術（HC2 HPV DNA Test），是獲美國FDA、歐洲CE認證及中國藥監局SFDA注冊檢測技術。采用儀器客觀判讀結果，有極高的靈敏度，可達99.9%陰性預測值，在國際上被列為金標準。統計結果表明，宮頸癌在篩查中結合HC2檢測，可以將陽性符合率由單一液基細胞學檢測的56.48%（67.91%）提高至82.69%（91.8%）；具有統計學意義（P＜0.01），可明顯提高宮頸癌前病變的檢出率。

在液基細胞學篩查結果中，ASC-US是陽性結果中最多的診斷，本資料997例中ASC-US為632例，占63.39%。其也是臨床婦科醫生和病理細胞學診斷醫生以及受檢者遇到最多的困惑。由于多種主觀因素和客觀因素的存在，ASC-US診斷可重復性差，組織學陽性符合率低，較大一部分為炎性病變；臨床處理流程一般為隨訪復查，但易失訪，本文160例ASC-US活檢陽性對照中高度及以上病變有30例，其中浸潤性癌占3例，用單一液基細胞學篩查，易漏診。HR-HPV陰性112例活檢對照中高度病變陰性預測值達99.11%；文獻報道，樣本量足夠大時，HR-HPV陰性預測值，接近100%[5]。因此，HR-HPV檢測可以用作AS-CUS人群的有效分流管理手段，濃縮高危人群，陰性結果回歸常規篩查流程；陽性結果陰道鏡下活檢，降低癌前病變及早期宮頸癌漏診率。

雖然液基細胞學檢查方法對宮頸癌的篩查目前仍然很有效，而HC2作為新一代HPV檢測方法在臨床上可用來輔助細胞學檢查，以期提高篩查結果的客觀性；有研究顯示，兩項檢查結果均為陰性的病例再次檢查的間隔時間可延長至5年[6]，從而可進一步降低篩查成本。

[1]Yang L,Parkin D M,Li L D,et al.Estimation and projection of the rational profile of cancer mortality in China:1991-2005[J].Br J Cancer,2008,90(11):2157-2166.

[2] 張文瓔,薛月珍,韓玲.高危型人乳頭瘤狀病毒負荷量與子宮頸病變嚴重程度的關系[J].上海交通大學學報:醫學版,2007,27(11)1354-1357.

[3]錢德英,岑堅,王丁,等.高危型人乳頭狀瘤病毒DNA檢測與細胞學聯合檢查對子宮頸癌前病變篩查的研究[J].中華婦產科雜志,2006,41(1): 34-37.

[4]Castle P E.The Potential utility of HPV genotyping in screening and clinical Management[J].J Natl ComprCane Netw,2008,6(1):83-95.

[5] 呂衛國,謝幸.宮頸癌的篩查[J].中國實用婦科與產科雜志,2006,22(1): 8-9.

[6]Roncaglia M T,Tacla M,Vieira da Motta E,et al.Evaluation of the combination of cytology and hybrid capture to safely predict the high-grade lesion status of patients treated with conization with large loop excision of the transformation zone[J].Acta Cyt01, 2011,55(5):421-425.

2013-12-09）

（本文編輯：沈昱平）

桐鄉市科技計劃項目（201203177）

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