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(德州學(xué)院醫(yī)藥與護(hù)理學(xué)院,山東 德州 253023)
大鼠血漿或血清是研究藥物、疾病等最常用的生物樣本,體積較小的實(shí)驗(yàn)動物短期內(nèi)多次采血比較困難[1],因此合適的采血方法是獲取寶貴血液樣本的關(guān)鍵。我們在實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)采用大鼠眼內(nèi)眥采血法,每只眼睛可以一次性采血1.5 mL。現(xiàn)將采血的操作體會總結(jié)如下。
實(shí)驗(yàn)動物為清潔級SD大鼠,共60只,雌雄各半,體質(zhì)量200~300 g;玻璃毛細(xì)管,內(nèi)徑0.9~1.1 mm。
左手戴上皮手套,將大鼠放在45°的斜面上,用中指和食指按住老鼠的頭部,并且使老鼠的眼球外凸(便于取血),左手掌按壓大鼠以便固定。以酒精擦拭大鼠眼內(nèi)眥,將消毒并用肝素鈉處理的毛細(xì)管(長約3~4 cm)插入眼眶下前方,保持毛細(xì)管與鼠面成40°左右夾角以便找準(zhǔn)靜脈叢位置。用玻璃管刺入時(shí)能明顯感到一層彈性薄膜,旋轉(zhuǎn)刺破薄膜,有種落空感,此時(shí)若沒有血液流出,調(diào)整毛細(xì)管插入深度(大約3~5 mm),血液便成股流下,用肝素鈉處理的EP管在眼球下方接血即可。
使用此方法采血量大于1.5 mL,3 h后可對同一只眼進(jìn)行相同操作,采血量大于1.5 mL。取血后置室溫徑直1 h,3 000 rpm,離心10 min,所得血清呈淡黃色的。若出現(xiàn)紅色血清,則說明出現(xiàn)溶血現(xiàn)象。
大鼠的采血方法主要有腹主動脈采血法、眼內(nèi)眥采血法、尾尖采血法、尾靜脈采血法、斷頭采血法和頸靜脈采血法等[2]。當(dāng)科研試驗(yàn)要求短期內(nèi)多次多量采血時(shí),需避免采取存在以下缺點(diǎn)的方法:取血量少,需使用麻醉劑,創(chuàng)傷大,采血后不能存活,不能連續(xù)多次采血等。……