ELISA法檢測HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控研究

程俊麗

ELISA法檢測HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控研究

程俊麗

目的 分析ELISA法檢測HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控技術(shù)。方法 采用即刻法進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)控,以S/CO值及A值表示HIV。結(jié)果 兩次質(zhì)控的統(tǒng)計結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05), 第8次S/CO值2.581為在控, 第15次S/CO值為2.915, 為最大值, 屬于在控。結(jié)論 在采用ELISA法對HIV抗體進(jìn)行檢測時,應(yīng)利用即刻法強(qiáng)化室內(nèi)質(zhì)控, 以便能夠使檢測結(jié)果變得更為準(zhǔn)確。

HIV抗體；ELISA；檢測

HIV抗體篩查是檢測HIV感染的重要途徑, 在篩查HIV抗體時應(yīng)用酶聯(lián)免疫法(ELISA)有助于提高抗體檢測效率［1］。本文分析了晉中市疾病預(yù)防控制中心應(yīng)用ELISA法檢測HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控方法, 報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 ELISA法檢測試劑盒為珠海麗珠酶聯(lián)免疫試劑盒, 室內(nèi)質(zhì)控法為即刻法。第一組質(zhì)控血清為珠海麗珠L5,第二組為梅里埃, 檢測試劑為上海梅里埃檢測試劑, 采用自配質(zhì)控血清。

1. 2 方法 嚴(yán)格按照酶聯(lián)免疫試劑盒當(dāng)中的說明書進(jìn)行ELISA檢測, 以S/CO值及A值表示HIV。采用即刻法對兩組檢驗結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控。統(tǒng)計方法如下：如SI下限值及上限值n2s值且n3s值, 則表示警告。如在質(zhì)控中發(fā)現(xiàn)SI下限值及上限值不屬于在控狀態(tài), 則刪除該數(shù)值, 并對當(dāng)次結(jié)果進(jìn)行重新測定。如在控數(shù)據(jù)多于20個, 則可以依據(jù)測定結(jié)果建立質(zhì)控表及繪制質(zhì)控圖, 質(zhì)控圖的繪制工具為EXCEL表格。

1. 3 統(tǒng)計學(xué)方法 利用統(tǒng)計軟件SPSS 20.0對兩次質(zhì)控結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析, 計數(shù)資料采用( x-±s)表示, 通過χ2及t檢驗檢驗, 如P<0.05則差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

經(jīng)統(tǒng)計檢驗發(fā)現(xiàn), 采用即刻法進(jìn)行ELISA室內(nèi)質(zhì)控及按照統(tǒng)計學(xué)方法計算之后, 得出的兩組統(tǒng)計結(jié)果差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。兩組室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果如下：第一組：第8次S/ CO值2.581為在控, 前7次測定時的標(biāo)準(zhǔn)差SD以及變異系數(shù)CV偏小, 當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)偏小時, SI上限值就會不斷增大；因此采用即刻法對第8次S/CO值進(jìn)行判定時, 就會出現(xiàn)在控狀態(tài)。第15次S/CO值為2.915, 為最大值, 屬于在控。原因為第15次的變異系數(shù)CV值較大, 當(dāng)CV較大時, SI上限值就會減小, 因此第15次SI值屬于在控狀態(tài)。第二組：第6次S/CO值2.357為在控, 在控產(chǎn)生的原因是前5次測定時的標(biāo)準(zhǔn)差SD以及變異系數(shù)CV偏小。第10次S/CO值為2.732, 為最大值, 屬于在控, 原因為第10次的變異系數(shù)CV值較大。

3 討論

ELISA是一種常用的HIV抗體檢測法, ELISA的基本原理是使固相載體與抗體或抗原結(jié)合在一起, 從而使抗體及抗原保持原有的免疫活性［2］。在進(jìn)行檢測時, 固相載體中的抗體及抗原就會與酶標(biāo)抗體及抗原發(fā)生反應(yīng), 在兩者發(fā)生反應(yīng)之后, 利用洗滌劑分開固相載體當(dāng)中的抗體及抗原復(fù)合物,隨后再測定受檢物質(zhì)與酶量即可。由于酶具有較高的化學(xué)催化頻率, 所以利用 ELISA檢測HIV抗體具有敏感度較高的優(yōu)勢。本組HIV抗體的檢測人群主要有自愿咨詢檢測人員、羈押犯人、住院患者以及無償獻(xiàn)血人員, 檢測人群符合全國HIV抗體檢測的總體形勢。雖然ELISA法是一種較為靈敏的檢測法, 但為了能夠進(jìn)一步提高HIV抗體檢測結(jié)果及分析結(jié)果的精確性, 還應(yīng)在進(jìn)行ELISA檢測的過程中利用即刻法控制檢測質(zhì)量。在應(yīng)用即刻法控制ELISA檢測質(zhì)量時, 應(yīng)根據(jù)實際檢測情況建立起合理的質(zhì)控均值以及標(biāo)準(zhǔn)差, 并處理好特殊檢測結(jié)果, 以便能夠保證質(zhì)控結(jié)果的有效性。

即刻法是一種簡便易行的室內(nèi)質(zhì)控法, 且具有質(zhì)控準(zhǔn)確有效、質(zhì)控圖可視的優(yōu)點, 因此在ELISA質(zhì)控中被廣泛使用。本研究應(yīng)用即刻法完成了ELISA法檢測HIV抗體的室內(nèi)質(zhì)控, 且得出了較為合理的質(zhì)控結(jié)果。疾控中心每年約復(fù)核100份HIV抗體樣本, 目前復(fù)核量還在不斷上升。如在復(fù)核時發(fā)現(xiàn)樣本有反應(yīng), 則送往太原市CDC進(jìn)行確證, 目前在確診試驗中確證的樣本已超過60%。

［1］ 曹華.血站ELISA法篩查HIV抗體陽性標(biāo)本與免疫印跡法檢測結(jié)果的比較.中外健康文摘, 2012,09(16):59-60.

［2］ 李仁道,萬莉青.艾滋病初篩實驗室中酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測HIV抗體影響因素的探討分析.中國保健營養(yǎng)(下旬刊), 2012, 22(9):3053.

030600 山西省晉中市疾病預(yù)防控制中心檢驗科