ELISA法檢測HIV抗體的室內質控研究

程俊麗

ELISA法檢測HIV抗體的室內質控研究

程俊麗

目的 分析ELISA法檢測HIV抗體的室內質控技術。方法 采用即刻法進行室內質控,以S/CO值及A值表示HIV。結果 兩次質控的統計結果差異無統計學意義(P>0.05), 第8次S/CO值2.581為在控, 第15次S/CO值為2.915, 為最大值, 屬于在控。結論 在采用ELISA法對HIV抗體進行檢測時,應利用即刻法強化室內質控, 以便能夠使檢測結果變得更為準確。

HIV抗體；ELISA；檢測

HIV抗體篩查是檢測HIV感染的重要途徑, 在篩查HIV抗體時應用酶聯免疫法(ELISA)有助于提高抗體檢測效率［1］。本文分析了晉中市疾病預防控制中心應用ELISA法檢測HIV抗體的室內質控方法, 報告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 ELISA法檢測試劑盒為珠海麗珠酶聯免疫試劑盒, 室內質控法為即刻法。第一組質控血清為珠海麗珠L5,第二組為梅里埃, 檢測試劑為上海梅里埃檢測試劑, 采用自配質控血清。

1. 2 方法 嚴格按照酶聯免疫試劑盒當中的說明書進行ELISA檢測, 以S/CO值及A值表示HIV。采用即刻法對兩組檢驗結果進行質控。統計方法如下：如SI下限值及上限值n2s值且n3s值, 則表示警告。如在質控中發現SI下限值及上限值不屬于在控狀態, 則刪除該數值, 并對當次結果進行重新測定。如在控數據多于20個, 則可以依據測定結果建立質控表及繪制質控圖, 質控圖的繪制工具為EXCEL表格。

1. 3 統計學方法 利用統計軟件SPSS 20.0對兩次質控結果進行統計分析, 計數資料采用( x-±s)表示, 通過χ2及t檢驗檢驗, 如P<0.05則差異有統計學意義。

2 結果

經統計檢驗發現, 采用即刻法進行ELISA室內質控及按照統計學方法計算之后, 得出的兩組統計結果差異無統計學意義(P>0.05)。兩組室內質控結果如下：第一組：第8次S/ CO值2.581為在控, 前7次測定時的標準差SD以及變異系數CV偏小, 當標準差及變異系數偏小時, SI上限值就會不斷增大；因此采用即刻法對第8次S/CO值進行判定時, 就會出現在控狀態。第15次S/CO值為2.915, 為最大值, 屬于在控。原因為第15次的變異系數CV值較大, 當CV較大時, SI上限值就會減小, 因此第15次SI值屬于在控狀態。第二組：第6次S/CO值2.357為在控, 在控產生的原因是前5次測定時的標準差SD以及變異系數CV偏小。第10次S/CO值為2.732, 為最大值, 屬于在控, 原因為第10次的變異系數CV值較大。

3 討論

ELISA是一種常用的HIV抗體檢測法, ELISA的基本原理是使固相載體與抗體或抗原結合在一起, 從而使抗體及抗原保持原有的免疫活性［2］。在進行檢測時, 固相載體中的抗體及抗原就會與酶標抗體及抗原發生反應, 在兩者發生反應之后, 利用洗滌劑分開固相載體當中的抗體及抗原復合物,隨后再測定受檢物質與酶量即可。由于酶具有較高的化學催化頻率, 所以利用 ELISA檢測HIV抗體具有敏感度較高的優勢。本組HIV抗體的檢測人群主要有自愿咨詢檢測人員、羈押犯人、住院患者以及無償獻血人員, 檢測人群符合全國HIV抗體檢測的總體形勢。雖然ELISA法是一種較為靈敏的檢測法, 但為了能夠進一步提高HIV抗體檢測結果及分析結果的精確性, 還應在進行ELISA檢測的過程中利用即刻法控制檢測質量。在應用即刻法控制ELISA檢測質量時, 應根據實際檢測情況建立起合理的質控均值以及標準差, 并處理好特殊檢測結果, 以便能夠保證質控結果的有效性。

即刻法是一種簡便易行的室內質控法, 且具有質控準確有效、質控圖可視的優點, 因此在ELISA質控中被廣泛使用。本研究應用即刻法完成了ELISA法檢測HIV抗體的室內質控, 且得出了較為合理的質控結果。疾控中心每年約復核100份HIV抗體樣本, 目前復核量還在不斷上升。如在復核時發現樣本有反應, 則送往太原市CDC進行確證, 目前在確診試驗中確證的樣本已超過60%。

［1］ 曹華.血站ELISA法篩查HIV抗體陽性標本與免疫印跡法檢測結果的比較.中外健康文摘, 2012,09(16):59-60.

［2］ 李仁道,萬莉青.艾滋病初篩實驗室中酶聯免疫吸附試驗檢測HIV抗體影響因素的探討分析.中國保健營養(下旬刊), 2012, 22(9):3053.

030600 山西省晉中市疾病預防控制中心檢驗科