寶兒康顆粒的質量標準研究

胡軍林顧承剛吳 寧

（1 湖北省食品藥品檢驗監督研究院，湖北 武漢 430064；2 武漢藥谷科技開發有限公司，湖北 武漢 430070）

寶兒康顆粒的質量標準研究

胡軍林1顧承剛2吳 寧2

（1 湖北省食品藥品檢驗監督研究院，湖北 武漢 430064；2 武漢藥谷科技開發有限公司，湖北 武漢 430070）

目的建立寶兒康顆粒的質量控制方法。方法用薄層色譜法對寶兒康顆粒中的太子參、甘草、白術、薏苡仁、山楂進行定性鑒別；以橙皮苷為對照品，采用HPLC法測定了寶兒康顆粒中陳皮的含量。色譜柱：Inertsil ODS-3（不銹鋼柱4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.5%冰醋酸溶液（40∶60）；檢測波長：283 nm。結果太子參、甘草、白術、薏苡仁、山楂均能以薄層色譜鑒別；含量測定中橙皮苷線性范圍0.054～0.54 μg（r=0.9999），回收率為99.2%（RSD=0.63%，n=6）。結論方法操作簡便，靈敏度高，專屬性和重線性好，可有效地控制寶兒康顆粒的質量。

寶兒康顆粒；橙皮苷；反相高效液相色譜法；太子參；甘草；白術；薏苡仁；山楂

寶兒康顆粒由太子參、茯苓、薏苡仁、白術等十四味中藥組成，由寶兒康糖漿改變制劑成型工藝而成，具有補氣健脾，開胃消食，滲濕，止瀉功效。用于小兒脾胃虛弱，消化不良，食欲不振，大便異常，精神困倦，睡眠不安，夜驚、夜啼等癥。原糖漿劑收載于中藥部頒標準第十冊，標準編號WS3-B-1967-95[1]。寶兒康糖漿保持原劑型的提取工藝不變，僅改變制劑成型工藝，將其制成寶兒康顆粒。為使新制劑質量可控，本文研究制定了本品質量標準。

1 儀器及試劑

高效液相色譜儀（北京創新通恒科技有限公司），型號P3000，檢測器3000UV；CQ250超聲波儀（上海超聲波儀器廠），硅膠G（青島海洋化工廠），羧甲基纖維素鈉（國藥集團化學試劑有限公司）。寶兒康顆粒由武漢藥谷科技開發有限公司提供（批號20080601、20080602、20080603、20080604、20080701、20080702）；橙皮苷對照品（批號110721-20050，供含量測定用）、太子參對照藥材（批號1004-200203，供鑒別用）、甘草對照藥材（批號121303-200301，供鑒別用）、白術對照藥材（批號120925-200407，供鑒別用）、薏苡仁對照藥材（批號121254-200307，供鑒別用）、山楂對照藥材（批號121138-200403，供鑒別用）均由中國食品藥品檢定研究院提供，甲醇為色譜純，水為重蒸水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 太子參薄層色譜鑒別[2]

取本品20 g，研細，加甲醇50 mL，加熱回流30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水20 mL使溶解，通過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑1.2 cm，柱高15 cm），用水200 mL、20%乙醇100 mL依次洗脫，棄去水及20%乙醇洗脫液，再用40%乙醇及乙醇各100 mL洗脫，分別收集各自洗脫液，40%乙醇洗脫液預留備用，乙醇洗脫液置水浴上蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，作為供試品溶液。另取不含太子參的自制樣品20 g，同供試品溶液制法制成陰性對照溶液。取太子參對照藥材3 g，加水煎煮2 h，離心，取上清液，通過D101型大孔吸附樹脂柱，用水200 mL、20%乙醇100 mL洗脫，棄去水及20%乙醇洗脫液，再用乙醇100 mL洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣加甲醇1 mL使溶解，制成對照藥材溶液。照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VIB薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-醋酸乙酯（4∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴灑1%香草醛硫酸溶液，在105 ℃烘烤至斑點顯色清晰。結果在與對照藥材色譜相應的位置上，供試品溶液顯相同顏色的斑點，陰性樣品溶液無斑點顯現，對結果無干擾。見圖1。

圖1 太子參TLC（1 陰性對照；2 太子參對照藥材；3、4、5樣品）

2.2 甘草薄層色譜鑒別[2]

取2.1項下預留的40%乙醇洗脫液，置水浴上蒸干，加甲醇1 mL溶解殘渣，作為供試品溶液。另取不含甘草的自制樣品20 g，同供試品溶液的制法配制成陰性對照溶液。再取甘草對照藥材0.5 g，加乙醚40 mL，加熱回流1 h，濾過，棄去乙醚液，藥渣加甲醇30 mL，加熱回流1 h，濾過，濾液蒸干，加水30 mL溶解殘渣，用正丁醇萃取3次，每次20 mL，合并正丁醇液，用水洗滌3次，正丁醇液蒸干，加甲醇1 mL溶解殘渣，制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述供試品溶液、陰性對照溶液各10 μL和對照藥材溶液5 μL，分別點于同一用1%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上，以醋酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15∶1∶1∶2）為展開劑，展開，取出，晾干，噴灑10%硫酸乙醇溶液，在105 ℃烘烤至斑點顯色清晰。結果在與對照藥材色譜相應的位置上，供試品溶液顯相同顏色的斑點，陰性樣品溶液無斑點顯現，對結果無干擾。見圖2。

圖2 甘草TLC（1.陰性對照；2.甘草對照藥材；3、4、5.樣品）

2.3 白術薄層色譜鑒別[2]

取本品25 g，研細，加甲醇50 mL加熱回流30 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加水25 mL使溶解，用石油醚（60～90 ℃）振搖萃取3次，每次20 mL，合并石油醚液，水液預留備用，石油醚液揮干，加石油醚（60～90 ℃）1 mL溶解殘渣，作為供試品溶液。另取不含白術的自制樣品25 g，同供試品溶液的制法制成陰性對照溶液。再取白術對照藥材1.5 g，加水100 mL，煎煮2 h，過濾，濾液濃縮至20 mL，用石油醚（60～90 ℃）振搖萃取3次，同法制成對照藥材溶液。照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷-醋酸乙酯（7∶3）為展開劑，展開，取出，晾干，噴灑5%對二氨基苯甲醛硫酸溶液，在105 ℃烘烤10 min，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結果在與對照藥材色譜相應的位置上，供試品溶液顯相同顏色的斑點，陰性樣品溶液無斑點顯現，對結果無干擾。見圖3。

圖3 白術TLC（1.陰性對照；2.白術對照藥材；3、4、5.樣品）

2.4 薏苡仁的薄層色譜鑒別[2]

取不含薏苡仁的自制樣品25 g，照2.3項下的供試品溶液制法配制成陰性對照溶液。另取薏苡仁對照藥材2 g，加石油醚（60～90 ℃）20 mL，超聲處理30 min，濾過，濾液揮至約1 mL，制成對照藥材溶液。照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取2.3項下供試品溶液及上述兩種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（60～90 ℃）-醋酸乙酯-甲酸（10∶2∶0.1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。結果在與對照藥材色譜相應的位置上，供試品溶液顯相同顏色的斑點，陰性樣品溶液無斑點顯現，對結果無干擾。見圖4。

圖4 薏苡仁TLC（1.陰性對照；2.薏苡仁對照藥材；3、4、5樣品）

2.5 山楂薄層色譜鑒別[2]

取2.3項下的水液，用醋酸乙酯萃取2次，每次20 mL，合并醋酸乙酯液，蒸干，加甲醇1 mL溶解殘渣，作為供試品溶液。另取不含山楂的自制樣品25 g，照供試品溶液制法配制成陰性對照溶液。再取山楂對照藥材2 g，加水100 mL，煎煮2 h，濾過，濾液濃縮至20 mL，以稀鹽酸調節pH值至1～2，用醋酸乙酯振搖提取2次，同法制成對照藥材溶液。照《中華人民共和國藥典》2010年版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10 μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以環己烷-醋酸乙酯-甲酸（20∶20∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴灑2%三氯化鐵乙醇溶液，在105 ℃烘烤至斑點顯色清晰。結果在與對照藥材色譜相應的位置上，供試品溶液顯相同顏色的斑點，陰性樣品溶液無斑點顯現，對結果無干擾。見圖5。

圖5 山楂TLC（1.陰性對照；2.山楂對照藥材；3、4、5樣品）

2.6 橙皮苷的含量測定[2]

2.6.1 色譜條件與系統適應性試驗：色譜柱：Inertsil ODS-3（不銹鋼柱4.6mm×250mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.5%冰醋酸溶液（40∶60）；檢測波長：283 nm；柱溫：30 ℃；流速：1 mL/min；進樣量：10 μL；檢測靈敏度：1.0000AUFS；理論塔板數按橙皮苷峰計算應不低于2000。色譜圖見圖6。

圖6 樣品、對照品、陰性樣品色譜峰

2.6.2 溶液制備：精密稱取橙皮苷對照品適量，加甲醇制成25 μg/1 mL的溶液，作為對照品溶液。取本品適量，研細，取約0.7 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25 mL，稱定重量，置水浴上加熱回流1 h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續濾液，即得。另取不含陳皮的自制樣品適量，同法制備成陰性對照溶液。

2.6.3 方法學考察

線性關系考察：精密稱取橙皮苷對照品5.40 mg，置100 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，制成0.0540 mg/mL的溶液。分別精密吸取上述對照品溶液1、2、3、5，7，10μL，分別進樣，測定。以橫坐標為橙皮苷的量，以縱坐標為峰面積，測得回歸方程y=723804.4x-2437.04，r=0.9999。結果表明橙皮苷進樣量在0.054～0.54μg范圍內與峰面積線性關系良好。

精密度試驗： 精密吸取同—份對照品溶液10 μL，按色譜條件，重復進樣6次，測定峰面積，結果RSD=0.62%，表明儀器精密度良好。

供試品溶液穩定性試驗：分別精密吸取同—份供試品溶液10 μL，分別在0、2、4、6、8、10 h進樣，測定峰面積，結果RSD為0.69%（n=6）。結果表明供試品溶液在10 h內保持穩定，能滿足測定的時間要求。

重復性試驗：取同一批（批號為20080601）樣品6份，按供試品溶液制備方法提取制備并測定，計算含量，測得平均值為0.79 mg/g，RSD（%）=1.06%，表明方法的重現性良好。

準確度試驗：取已知含量的樣品（批號為20080601，含量為0.79 mg/g）6份，分別精密加入濃度為12.1 μg/μL的橙皮苷對照品溶液各25 μL（即0.3025mg），照供試品溶液制法制備溶液，測定含量，計算回收率。結果見表1。

表1 加樣回收率試驗結果

表1結果表明，本方法的回收率良好。

2.6.4 樣品含量測定

取供試品溶液和對照品溶液各10μL，注入高效液相色譜儀，記錄峰面積，按外標法計算橙皮苷含量，結果見表2。

表2 樣品含量測定結果

3 討 論

在太子參、甘草的薄層鑒別中將樣品通過D101型大孔吸附樹脂柱（內徑1.2 cm，柱高15 cm），制得樣品溶液顏色較淺，雜質較少，斑點清晰，分離效果好。鑒別項陰性對照均無干擾，且操作簡便，重現性好。

在含量測定項下，參考《中華人民共和國藥典》2005年版一部健胃消食片含測項下橙皮苷含測色譜條件及樣品制備方法，峰形良好，與其他色譜峰分離度符合要求。陰性對照對本品含量測定無干擾。通過研究，本文為寶兒康顆粒的生產提供了可行的技術方法。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑第十冊[S].1995:116.

[2] 國家藥典委員會.中國藥典.一部[S].北京:化學工業出版社,2005:59-567.

R282.7

B

1671-8194（2014）16-0094-03