H PLC測定注射用阿魏酸鈉含量

游蓉麗 李明花 喬玉峰 韓佩蓮

（1山西振東制藥股份有限公司，山西 長治 047100；2山西振東泰盛制藥有限公司，大同 037300）

H PLC測定注射用阿魏酸鈉含量

游蓉麗1李明花1喬玉峰1韓佩蓮2

（1山西振東制藥股份有限公司，山西 長治 047100；2山西振東泰盛制藥有限公司，大同 037300）

目的：對高效液相色譜法（HPLC）測定注射用阿魏酸鈉含量的方法進行研究。方法：色譜條件：C18柱，流動相為甲醇-水-醋酸（30∶69∶1.5），檢測波長為322 nm。結(jié)果：該方法的重復性RSD=0.13%，n=6。結(jié)論：該方法操作簡便、快捷、重復性好，可作為注射用阿魏酸鈉的含量測定方法。

高效液相色譜法；注射用阿魏酸鈉；含量

注射用阿魏酸鈉為無菌粉針劑產(chǎn)品，屬于抗血小板聚集藥。參照《中國藥典》2010年版二部[1]附錄藥品質(zhì)量標準分析方法驗證指導原則及通過對注射用阿魏酸鈉含量測定進行方法學研究，認為該方法簡便、快捷、重現(xiàn)性好，結(jié)果準確可靠。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀：島津 LC-20AT高壓二元泵，SPD-M20A二極管陣列檢測器以及LCsolution色譜工作站；電子分析天平（梅特勒AX105）、紫外-可見分光度計（島津UV2550）。

1.2 試劑

阿魏酸對照品，批號：110773-201012，規(guī)格：50 mg，來源：中國食品藥品檢定研究院（供含量測定用），含量：99.6%（使用前，置五氧化二磷減壓干燥12小時以上）。供試品：注射用阿魏酸鈉，規(guī)格：0.1 g，批號：1001291、1001301、1106301，來源：山西振東泰盛制藥有限公司。甲醇（色譜純）、醋酸（色譜純）。

2 色譜條件

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗參照國家食品藥品監(jiān)督管理總局標準YBH07352006。

2.1波長選擇

取阿魏酸對照品適量，制成1 mL中含0.1 mg的溶液，在 190～ 360 nm進行全波長掃描，在322 nm有最大吸收。

2.2 色譜柱選擇

色譜柱：C18柱（4.6 mm×250 mm；5 μm）；流動相：甲醇-水-醋酸（30∶69∶1.5）；檢測波長：322 nm；流速：1.0 mL/min；柱溫：25℃；進樣量：20 μL。

3 方法學實驗

3.1 專屬性

注射用阿魏酸鈉為無菌粉針劑，未添加任何輔料，無輔料干擾。

3.2 線性關(guān)系測定

取阿魏酸對照品20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密量取2，3，5，7，8 mL，分別置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液各 20 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

表1 阿魏酸含量線性關(guān)系測定

圖1 阿魏酸含量線性關(guān)系

對以上數(shù)據(jù)進行線性回歸，得回歸方程為：y=474 40x-271 406，相關(guān)系數(shù)r=0.999 3。由結(jié)果可見，在8～ 32 μg/mL濃度范圍內(nèi)，供試品濃度與其峰面積線性關(guān)系良好。

3.3 溶液的穩(wěn)定性試驗

避光操作，取阿魏酸對照品 20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。分別于第0，2，4，6，8，10小時精密量取 20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。

由表2可見，其RSD值為0.35%，表明本品在配制后8小時內(nèi)較穩(wěn)定。

表2 阿魏酸溶液含量穩(wěn)定性試驗結(jié)果

3.4 重復性試驗

取批號為1001291的注射用阿魏酸鈉20 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 5 mL置 50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。重復進樣6次，記錄色譜圖。

由表 3可見，其 RSD值為 0.13%，表明本方法的重復性良好。

表3 阿魏酸重復性試驗結(jié)果

3.5 回收率試驗

因注射用阿魏酸鈉為無菌原料藥直接分裝的無菌粉針劑，處方中無任何輔料，采用模擬處方回收率進行試驗。精密稱取阿魏酸鈉原料 16，20，24 mg各3份，分別置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5 mL置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。取上述溶液各20 μL分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算回收率。實驗結(jié)果見表4。

表4 阿魏酸回收率試驗結(jié)果

3.6 含量測定

分別取三批樣品（約相當于阿魏酸20 mg），精密稱定，置100 mL量瓶中，加流動相溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取此溶液5 mL，置50 mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻，精密量取20 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖。另取阿魏酸對照品，同法測定，按外標法以峰面積計算，結(jié)果乘以1.298 8，即得供試品中阿魏酸鈉（C10H9NaO4）的含量。結(jié)果與法定檢測結(jié)果比較見表5。

表5 注射用阿魏酸鈉含量測定結(jié)果

4 討論

根據(jù)上述各項測定結(jié)果，說明注射用阿魏酸鈉的HPLC測定結(jié)果較準確可靠，且此分析方法操作簡便、靈敏度高、快捷、重現(xiàn)性好，可作為注射用阿魏酸鈉的含量測定方法。

[1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典（2010年版）二部[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010.

Content Determination of Sodium Ferulate for Injection by HPLC

You Rongli1，Li Minghua1，Qiao Yufeng1，Han Peilian2
（1 Shanxi Zhendong Pharmaceutical Co.， Ltd， Shanxi Changzhi 047100，China；2 Shanxi Zhendong Taisheng Pharmaceutical Co.，Ltd，Datong 037300）

Objective:To research the method for the content determination of sodium ferulate for injection by HPLC.Methods:C18column was used with a mobile phase of methanol-water-acetic acid （30∶69∶1.5）.The detection wavelength was at 322 nm.Results:The recovery of the method was RSD=0.13% （n=6）.Conclusion:The method is simple，rapid and reproducible，which can be used for the content determination of sodium ferulate for injection.

HPLC；Sodium Ferulate for Injection；Content

10.3969/j.issn.1672-5433.2014.10.005

2014-06-05）

游蓉麗，女，博士。研究方向：藥效學。E-mail：sxzdyrl@163.com

韓佩蓮，女，主管藥師。研究方向：藥物分析技術(shù)。通訊作者E-mail：sxtshpl@163.com