分光光度法測定植酸含量

郝紅英　周芳　周彩榮　葉文見

摘要 [目的] 為了尋找適合于標準植酸的測定及微量測定的方法。[方法] 采用可見分光光度法， 測定植酸的含量。[結果] 在標準曲線下，植酸濃度在0～32 μg/ml范圍內與吸光度呈良好線性關系，方程為：Y=-2.284 2X+0.384 1（R=0.997 3），平均回收率為97.35%，RSD為4.82%（n=4）。[結論]該方法操作簡便、快速、準確，可作為植酸的定量分析方法。

關鍵詞 植酸；含量；可見分光光度法

中圖分類號S121文獻標識碼A文章編號0517-6611（2014）07-01907-01

植酸是一種重要的有機磷系添加劑，具有獨特的生理功能和化學性質，在食品、醫藥、金屬防腐、日化工業及塑料加工等方面具有廣泛的應用[1]。植酸的測定方法主要有硝酸釷滴定法、測磷分光光度法、高壓液相色譜法、測鐵分光光度法[2-5]。其中，硝酸釷滴定法操作簡單快速，但結果偏高；測磷分光光度法測定準確度高， 精密度好，但硝化較麻煩；高壓液相色譜法測定結果準確，但儀器昂貴；測鐵分光光度法采用植酸為標準，測定準確度與測磷法相近， 但它無需硝化，操作簡便，適合于有標準植酸的測定及微量測定。該研究采用三氯化鐵比色法測定植酸含量。

1材料與方法

以磺基水楊酸為顯色劑，在505 nm波長下，pH為2～3左右的酸性介質中，磺基水楊酸與Fe3+形成紫紅色絡合物，可滿足鐵含量測定的要求。在酸性介質中植酸能與三價鐵鹽專一定量沉淀，沉淀形式為[（C6H6）（OH）H3（PO4）5]3Fe7，而不受其他酸溶性磷的影響。濾去沉淀物，用紫外分光光度計測定剩下鐵的濃度，即可測得與菲丁結合的鐵濃度[6-7]。

取植酸提取液2 ml，加入濃度15%TCA 2 ml，在10 ml硬質玻璃試管中混勻，于4 ℃冰箱中靜置2 h后，4 000 r/min離心30 min；吸取上清2 ml，用0.75 mol/L NaOH調節pH為6.0～6.5，加蒸餾水至30 ml，混勻。取3 ml稀釋液，加1 ml濃度0.3%磺基水楊酸、濃度0.03%FeCl3·6H2O試劑，混勻后于505 nm處比色。

植酸含量=100×0.384 1-吸光度12.284 2

2結果與分析

2.1入射光波長的選擇入射光的波長應根據吸收光譜曲線，以選擇溶液具有最大吸收時的波長為宜。取7號液，以1號空白液為參比溶液，掃描出最大吸收波長為505 nm。

2.2顯色時間的選擇準確吸取一定量的試樣，每次只改變一個時間因素，測定吸光度（A），選出適宜的顯色時間。由圖1可知，顯色時間以15～20 min為宜。

圖1吸光度與顯色時間的關系2.3酸度的影響酸度對測定結果有較大的影響。隨著pH的變化，磺基水楊酸與Fe3+的顯色反應呈現不同的顏色。在pH為2～3時，生成紫紅色絡合物；在pH為4～7時，生成棕橙色絡合物；在pH為8～10時，生成黃色絡合物。所以，在顯色反應時，應嚴格控制pH。該試驗選用的pH為2～3。

2.4 工作曲線分別取0.1 g/L 植酸標準液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.4 ml于10 ml 玻璃試管中，分別加蒸餾水3.0、2.8、2.6、2.4、2.2、2.0、1.6 ml，分別加1 ml濃度0.03%FeCl3·6H2O、濃度0.3%磺基水楊酸試劑，搖勻，待測。 在505 nm處，以1號為參比溶液，測定所配制的2～9號溶液的吸光度，并作出工作曲線（圖2）。按照確定的試驗條件，加入標準植酸，測定回收率。由表1可知，4個樣品的添加量的回收率范圍為93.3%～104.0%，總平均為97.35%，表明采用三氯化鐵比色法測定標準植酸的含量時回收率較好，結果穩定。