王華
【摘要】目的:研究褚頭紅的化學成分。方法:用經典的中草藥化學成分提取分離方法,借助系統預試驗初步判斷楮頭紅所舍的化學成分,用苯酚-硫酸法測定其多糖總量,用原子吸收法測定部分營養元素含量。結果:楮頭紅含還原多糖平均為75g/kg,含Mg、Zn、Mn、Cu分刺為205.446+6.00 mg/kg、50.279+2.25 mg/kg、319.294+12.00 mg/kg、10.867 +0.36mg/kg,含Ca、Fe、K分別為13.501+0.24 g/kg、1.268+0.56 g/kg和17.467 +0.36g/kg,此外還含有游離苷類物質、黃酮類物質、酚類、鞣質等物質。結論:楮頭紅所含的生物活性成分與臨床藥效基本一致。
【關鍵詞】楮頭紅;化學成分;多糖;營養元素
【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】A 【文章編號】1671-8801(2014)10-0009-02
治療乙型肝炎目前尚無特效藥,這是世界性問題。臨床上主要以保肝護肝、涼血解毒或提高自身免疫力來提高對疾病的抵抗力,減少疾病造成的侵害。中草藥及其制劑對該病有獨特的療效,這可能與藥用植物多成分的協調和增效作用有關――如已有藥理研究表明植物多糖可調節機體免疫功能,并在抗肝炎等方面有獨特的生物活性,還有誘生干擾素和抗病毒的功能 [1,2];鞣質有抗菌抗炎抗過敏、抗脂質過氧化、抗腫瘤、抗人體免疫缺陷病毒( HIV)等作用 [3];黃酮類化合物生物活性廣泛而溫和,有保護肝臟和其他組織、器官和抗病毒、抗菌的作用,并有抑制癌細胞和細胞毒素等多種作用 [4];皂苷有影響代謝、免疫和酶系統以及抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤等作用,大多數中藥的皂苷具有明顯的抗氧化作用[5,6.];植物中多種有機態營養微量元素 [7] 易于吸收,與人體免疫密切相關,對疾病恢復有輔助作用。楮頭紅(S.nepalensis),別名風柜斗草 [8]。《中藥大辭典》記載:其性涼,味酸,無毒;功用:清肺熱、去肝炎 [9];《實用中草藥》記載:其性平,味甘。功用:涼熱解毒、涼血利水,主治急性肝炎,肺熱咳嗽 [10]。據有關臨床使用報道:楮頭紅對急性肝炎(甲肝、乙肝急性期)療效最佳,對慢性肝炎及乙肝病毒攜帶者有效。在福建省民間廣為使用,是一種極有價值的天然藥用植物和中草藥資源。對該植物的化學成分、藥理活性、藥效關系等的研究目前尚未見報道。為尋找活性物質,了解楮頭紅臨床用藥機制的指導科學用藥,開展對楮頭紅化學成分的研究,對探討楮頭紅臨床用藥機制,指導科學地合理用藥具有重要意義,對進一步深入開發應用該天然藥用植物也具有指導意義。
1、儀器與材料
1.1 儀器 電子天平、旋轉蒸發器、恒溫水浴箱、恒溫磁力攪拌機、電熱套、DHC電熱恒溫干燥箱、電熱板、原子吸收分光光度計(TAS-990型)。
1.2 材料 楮頭紅、無水乙醇、95%乙醇、丙酮、正丁醇、三氯化鐵、α-萘酚、3,5-二硝基苯甲酸、硝酸銀、冰乙酸、活性炭、苯酚、葡萄糖等均為分析純。
2、方法
2.1 楮頭紅化學成分系統預試
2.1.1 化學成分提取取50g楮頭紅干藥末,加石油醚回流提取(1.5h)3次,過濾,合并濾液濃縮后(下同)得石油醚提取部位105ml;濾渣加乙醚回流提取(1.5h)3次,過濾,合并濾液得乙醚提取部位110ml;所得濾渣繼續加乙酸乙酯提取(1.5h)3次,過濾,合并濾液乙酸乙酯提取部位116ml;所得濾渣再加乙醇回流提取( 1.5h)3次,過濾,合并濾液所得乙醇提取部位llOml;最后在濾渣中加蒸餾水回流提取(1.5h)3次,過濾,合并濾液得蒸餾水提取部位168ml。臨用時根據需要將各部位提取液稀釋或濃縮。
2.1.2 化學成分系統預試各提取部位的化學成分系統預試驗采用化學特征反應定性和紙層析定性試驗[11-13]。
2.2 多糖提取與含量測定
2.2.1 多糖提取與初步精制 取2.1.1蒸餾水提取部位上清液用酶法去除淀粉,按18ug/g加液化酶到上清液中,在pH為6,85℃水浴條件下處理1.5 h,用I2/KI溶液檢驗者到碘滾不變色,接著按200ug/g加糖化酶,pH調至6,水浴溫度60℃處理1h。去淀粉后,接著用sevag法除去蛋白質,然后加3倍體積95%乙醇溶液,靜置1h后,沉淀抽濾,干燥即得精制多糖。
2.2.2 多糖含量測定[14] 用葡萄糖為對照品,用2.2.1所得精制多糖為供試樣品,含量測定采用硫酸-苯酚法。
2.3 元素測定
2.3.1 楮頭紅中鈣、鎂、鐵、錳、鋅、銅測定 [15]稱取烘干磨碎的楮頭紅樣品2.Og于瓷坩堝中,在電熱板上緩緩加熱炭化至不再冒煙,移入高溫電爐,逐漸升溫到500℃灰化2h。待冷卻后滴加硝酸(1:1)溶解灰分,蒸發至干后,置于高溫電爐中繼續灰化完全,用2ml HCL(l:l)溶解灰分,移入25 ml容量瓶中,加水定容。在火焰原子吸收分光光度計上采用標準工作曲線法,分別于285.2nm、422.7 nm、248.3 nm、279.5 nm、213.8 nm、324.7 nm波長處測定標準液和樣液中Mg、Ca、Fe、Mn、Zn和Cu的吸收值,計算即得。
2.3.2 楮頭紅中鉀的含量測定取干燥的楮頭紅粉末l.Og于1mol/L鹽酸溶液中浸提,吸取浸提的待測液5.OOml于25ml容量瓶中,用水定容。在火焰原子吸收介光光度計上采用標準工作曲線法[16],于766.80 nm處相同條件測定,計算即得。
3、結果與分析
3.1 楮頭紅化學成分 化學成分系統預試和紙層析法試驗結果如表1,2。楮頭紅中主要活性化學成分有多糖、游離苷類物質,黃酮類物質,皂苷、有機酸、酚類、鞣質等物質。
3.2 多糖含量 經多次提取測定,楮頭紅中多糖的平均含量為75.Og/kg。
3.3 元素測定各元素測定結果如表3所示。
4、討論
試驗表明,楮頭紅中含有游離苷類物質、黃酮類物質、酚類、鞣質類等物質,含量較高的多糖和較豐富的人體所必需的營養元素,這些成分有的可調節機體免疫功能;有的可誘生干擾素和抗病毒作用;有的可抗菌抗炎;有的可抗脂質過氧化、抗腫瘤、抗人體免疫缺陷病毒(HIV);而有的可抑制癌細胞和細胞毒素、保護肝臟等多種作用,這與楮頭紅的臨床藥效基本一致。但是要掌握楮頭紅的臨床用藥機制以及藥效與各類物質結構之間的關系,有待于進一步對楮頭紅的各化學成分進行分離、分子結構鑒定和臨床藥理試驗等研究。
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