海南熱帶牧草真菌病害調查（Ⅱ）

曉妹 劉文波 丁曉帆 蒲金基

摘 要 熱帶牧草病害是影響其產量和品質的重要因素之一。本次在海南調查了10種禾本科和豆科牧草，共鑒定出了12種真菌性病害，其中國內新記錄寄主病害9種，海南省新記錄寄主病害3種。為害較重的有灰梨孢[Pyricularia grisea（Cke.）Sacc.]引起的雙花草梨孢灰斑病、新月彎孢[Curvularia lunata（Wakker）Boedijn]引起的雀稗或鼠尾粟彎孢菌葉斑病、球黑孢霉[Nigrospora zimmerman（Sacc.）Mason]引起的熱研11號黑籽雀稗葉枯病以及蝴蝶豆假尾孢（Pseudocercospora centrosematicola）引起的蝴蝶豆褐斑病。

關鍵詞 海南；熱帶牧草；真菌病害；鑒定

中圖分類號 S432 文獻標識碼 A

草業是農業的重要組成部分，中國是世界上第二草業大國，但草業產值在中國僅占農業總產值的10%左右，與發達國家相比還有很大的發展空間。海南草地資源豐富，天然草地面積占總土地面積的27.93%，發展熱帶牧草對調整海南熱帶農業結構、帶動海南畜牧業的發展具有重要的意義[1]。近年來，隨著人們對草業的認識不斷提高和重視，中國草業得到了較快的發展。但隨著熱帶牧草的不斷引種和繁育推廣，加之南方適宜病害流行的氣候條件，潛在的牧草病害問題日趨嚴重，已成為影響熱帶牧草產量和品質的重要因素之一[2-8]。國外于20世紀70年代開始重視牧草病害研究，對熱帶牧草病害的發生情況有較為詳細的描述[9]。我國對北方牧草病害也有較詳細的記錄[10-11]，但一直以來對熱帶牧草病害關注不夠。近幾年，國內外熱帶牧草新病害不斷出現[6-8，12-14]，為明確海南熱帶牧草病害的發生情況，本研究對海南部分熱帶牧草的真菌性病害進行了初步調查鑒定，并進行了對比分析，旨在為今后熱帶牧草的抗病育種和綜合防治提供依據。

1 材料與方法

1.1 標本采集

采自中國熱帶農業科學院品資所熱帶牧草種質圃及其海南大學儋州校區周邊。

1.2 病害鑒定

將采回的樣本首先描述癥狀，然后一部分根據寄主編號保存，一部分依據文獻[2-11，15-17]，采用常規病害研究技術[18]進行鑒定。對病征明顯的常見病害，直接制片或以徒手切片鏡檢鑒定；對沒有產生病征、直接鏡檢有一定困難的標本，進行病原菌常規組織分離，獲得病原菌的純培養后，再進一步鑒定并做致病性測定。每種病原菌每個性狀測量100個。對已鑒定的病原菌，用LEICA DM LS2顯微攝像系統在10×40倍下拍照保存。

2 結果與分析

2.1 國內新記錄寄主病害

2.1.1 臺灣甜草紋枯病 癥狀：主要為害近基部葉片葉鞘。病斑不規則形或云紋形，邊緣暗褐色，中部草黃色或灰白色。嚴重時，葉鞘變黃枯死、脫落。濕度大時，病健交界處產生白色菌絲體。

病原：幼嫩菌絲無色，后變為黃褐色，直徑7～10 μm；分枝處呈銳角，明顯縊縮，距分枝不遠處有1個橫隔膜，細胞內有顆粒狀內含物（圖1）。

寄主：臺灣甜草（Oldenlandia cantonensis How）。

國內[8]對禾本科牧草紋枯病有詳細的介紹，但未見為害臺灣甜草的記錄。根據上述病原菌的形態特征和文獻[8]，初步確定引起臺灣甜草紋枯病的病原菌為立枯絲核菌（Rhizoctonia solani Kühn）。

2.1.2 珍珠茅刀孢褐斑病 寄主：珍珠茅（Scleria berg）。

癥狀：主要為害葉片。初期在葉片上出現褐色斑點，擴展后大多數病斑呈梭形，中部淡褐色至黃褐色，邊緣暗褐色，有些病斑外緣有明顯的黃色暈圈。后期病斑上隱約出現同心輪紋（圖2）。

病原：分生孢子梗單生，直立，不分枝，褐色至深褐色，有5～6個隔膜；分生孢子棍棒狀或近圓柱形，頂端喙細長，具3～7個隔膜，直立或稍彎曲，褐色至深褐色，表面光滑，大小28.0～58.0 μm×6.0～7.0 μm。

寄主：珍珠茅（Scleria berg）。

該病害在國內外[2-17]未見報道，病原菌形態特征與文獻[13]報道的刀孢霉屬特征接近，所以初定為刀孢霉屬（Clasterosporium sp.）。

2.1.3 鼠尾粟、雀稗彎孢葉斑病 癥狀：主要為害葉片；病斑初期為褐色小點，擴展后大多數呈橢圓形或梭形，病斑中部灰白色，邊緣褐色，長約3～6 mm，寬多受葉脈限制；有時數個病斑可愈合成大斑（圖3）。

病原：在PDA培養基上菌落褐色，絮狀。分生孢子梗深褐色，不分枝，有隔膜；分生孢子不等短弓形，常向一側彎曲，3個隔膜，中間隔膜常位于中央偏下處，彎向一側，基部起第三個細胞膨大，褐色或深褐色，兩端細胞淡褐色，壁光滑，大小18.0～32.0 μm×8.0～16.0 μm。

寄主：鼠尾粟[Sporobolus fertilis（Steud.）W. D. Glayt]、雀稗[Paspalum thunbergii Kunth.]。

國內文獻[10，17]報道，為害禾本科牧草的彎孢霉有8種：新月彎孢（Curvularia lunata（Wakker）Boedijn）、近緣彎孢（C. affins Boed.）、短孢彎孢（C. brachyspora Boed.）、畫眉草彎孢（C. eragrostidis J.A.Meyer）、膝曲彎孢霉（C. geniculata Boed.）、間型彎孢（C. intermedia Baedijn）、不等彎孢（C. inaequalis）和棒狀彎孢（C.clavata），但寄主范圍未見記錄鼠尾粟和雀稗，除新月彎孢外，其它彎孢的中隔位于中央。所以根據上述病原菌的形態特征，初步確定引起鼠尾粟和雀稗彎孢葉斑病病原菌為新月彎孢[Curvularia lunata（Wakker）Boedijn]。

2.1.4 雙花草梨孢灰斑病 癥狀：主要為害中下層葉片；病斑梭形，邊緣紫紅色，中部灰白色，兩端有與葉脈平行的紫紅色縱向壞死線（圖4）。

病原：分生孢子梗2～5根成束從寄主氣孔伸出，灰色，有隔，略彎曲，大小55.0～95.0 μm×4.0～5.0 μm；分生孢子洋梨形或卵形，具2個隔膜，頂細胞錐形或成緣狀，孢子在分隔處最寬，基細胞外有臍點，大小為17.0～24.0 μm×8.0～10.0 μm。

寄主：雙花草[Dichanthium annulatum（Forsk.）Stapf]。

國內外[7-9]尚無報道灰梨孢為害雙花草的記載。上述觀測到的病原菌形態特征和文獻[10]記錄的灰梨孢（Pyricularia grisea（Cke.）Sacc.）特征極為接近，故確定雙花草梨孢灰斑病的病原菌為灰梨孢（Pyricularia grisea（Cke.）Sacc.）。

2.1.5 熱研11號黑籽雀稗葉枯病 癥狀：主要為害葉片；大多自葉尖開始發病，沿葉緣向下蔓延呈倒“V”字形，受害部位淡褐色或草黃色，病斑邊緣有黃色暈圈（圖5）。

病原：分生孢子梗屈曲狀、淡褐色、有隔膜；分生孢子單生于分生孢子梗頂端，初期淡褐色，成熟后呈亮黑色，廣橢圓形至近球形，單胞，光滑，直徑17.4～21.1 μm。

寄主：熱研11號黑籽雀稗[Paspalua atratum cv. Reyan No.11]。

國內外[2-11，15-17]尚無報道，依據病菌分生孢子梗和分生孢子的形態、顏色、大小等，其特征與文獻[19]記載的球黑孢霉相近，據此初步確定熱研11號黑籽雀稗葉枯病的病原菌為球黑孢霉[Nigrospora zimmerman（Sacc.）Mason]。

2.1.6 孔穎草窄條斑病 癥狀：主要為害葉片，葉鞘也可受害，染病初為褐色小點，后沿葉脈向兩端擴展，病斑與葉脈平行，窄長條形，四周呈紅褐色，長約11.0～39.0 mm，大多數長20.0～25.0 mm（圖6）。

病原：分生孢子梗束生，基部深褐色，往上呈膝狀彎曲且顏色變淡，孢痕明顯加厚，6～7個隔膜，大小75.0～110.0 μm×4.0～5.0 μm；分生孢子細鞭狀，微彎，有5～7個隔膜，近無色透明，大小14.0～25.0 μm×2.0～5.0 μm。

寄主：孔穎草[Bothriochloa pertusa（L.）A.Camus]。

國內外[4-17]尚無報道由尾孢為害孔穎草的記錄，根據上述病原菌的形態特征，初步確定孔穎草窄條斑病的病原菌為尾孢屬（Cercospora sp.）。

2.1.7 高粱煤煙病 癥狀：主要為害中下層葉片、葉鞘。也可為害穗部。被害部位被薄膜狀黑色霉狀物所覆蓋，外觀如被煤煙薰過一般（圖7）。

病原：菌絲黑褐色，有分隔。分生孢子星狀，無色至淡褐色，多為4分叉，每個分叉具多個隔膜，分隔處略縊縮，分叉頂端色淡，大小48.6～68.3 μm×4.2～8.7 μm。

寄主：高粱（Sorghum vulgare）。

從病原菌形態來判斷，與引起芒果煤煙病的三叉孢菌[19]特征基本一致，因此初步確定引起高粱煤煙病的病原菌為三叉孢菌[Tripospermun acerium（Syd.）Speg.]，在國內外未見報道[4-17]。

2.1.8 蝴蝶豆葉斑病 癥狀：主要為害中下層葉片。初期病斑呈褪綠小點，擴展后病斑近圓形、多角形或不規則形，邊緣褐色至暗褐色，外圍有明顯的黃色暈圈，后期個別病斑中心呈灰白色。濕度大時，病斑兩面生灰黑色霉層（圖8）。

病原：分生孢子梗單生或4～6個束生，基部深褐色，往上呈膝狀彎曲且顏色漸淡，孢痕不明顯，3～6個隔膜，大小45.0～100.0 μm×2.0～4.0 μm；分生孢子細鞭狀，無色，直立，有5～7隔膜，大小15.0～40.0 μm×1.1～2.3 μm，臍點不明顯。

寄主：蝴蝶豆（Centrosema pubescens Benth），別名：距瓣豆。

國外[9]報道引起蝴蝶豆葉斑病的病原有變灰尾孢（Cercospora canescens）、蝴蝶豆假尾孢（Pseudocercospora centrosematicola）、P. bradburyae、C. cetrosematis和C. cylindrospora 5個種。根據上述病原菌的形態特征，初步確定引起蝴蝶豆褐斑病病原菌為蝴蝶豆假尾孢（Pseudocercospora centrosematicola）。

2.2 海南省新記錄寄主病害

2.2.1 豬屎豆褐斑病 癥狀：主要為害葉片。多從葉緣開始發病，病斑呈“V”字形或不規則形，褐色，病健交界明顯，邊緣有不明顯的黃暈。濕度大時，病斑上生一層灰黑色霉層。

病原：分生孢子梗4～6個束生，具3～7個隔膜，孢痕較明顯，大小40～90 μm×2.0～5.0 μm；分生孢子鼠尾狀，無色透明，有3～7個隔膜，大小20.0～30.0 μm×2.0～4.0 μm。

寄主：豬屎豆（Crotalaria sp.）。

病原特征與文獻[15]報道的豬屎豆尾孢（Cercospora crotalariae Sacc.）相似。

2.2.2 高粱紫斑病 癥狀：主要為害葉片和葉鞘。葉片染病初生橢圓形至長圓形紫紅色斑塊，邊緣不明顯，有時產生淡紫色暈圈。

病原：分生孢子倒棒形或圓柱形，無色，直或稍彎，頂端較尖，基部截形，具3～9個隔膜，大小28～116 μm×3.7～5.8 μm，臍點明顯。

寄主：高粱（Sorghum vulgare）。

病原特征與文獻[15]報道的高粱尾孢（Cercospora sorghi Ellis & Everhart）相似。

2.2.3 雙花草銹病 癥狀：主要為害葉片。在葉背產生紅褐色夏孢子堆，黃色暈圈不明顯，后期孢子堆破裂，散出紅褐色粉末（夏孢子），嚴重時葉片枯黃。

病原：夏孢子橢圓形、圓形、卵圓形、不規則形，紅褐色，單胞，表面密生細刺，大小13.0～34.0 μm×16.0～32.0 μm。

寄主：雙花草[Dichanthium annulatum（Forsk.）Stapf]。

文獻[11]報道引起雙花草銹病的病原在國內有毛蕊草柄銹菌（Puccinia duthiae Ell.et Tracy）和白羊草柄銹菌（P. cesatii Schroet.）兩個種，但在海南未觀察到冬孢子階段，故暫時不能確定到種。

3 討論與結論

本次對海南10種禾本科和豆科牧草調查共鑒定出12種真菌性病害，其中半知菌11種，擔子菌1種；國內新記錄寄主病害9種，海南省新記錄寄主病害3種。為害較重的有灰梨孢[Pyricularia grisea（Cke.）Sacc.]引起的雙花草梨孢灰斑病、新月彎孢[Curvularia lunata（Wakker）Boedijn]引起的雀稗或鼠尾粟彎孢菌葉斑病、球黑孢霉[Nigrospora zimmerman（Sacc.）Mason]引起的熱研11號黑籽雀稗葉枯病以及蝴蝶豆假尾孢（Pseudocercospora centrosematicola）引起的蝴蝶豆褐斑病。結合分析本文結果和文獻[3-8]，可以看出在熱帶禾本科牧草普遍發生較為普遍的病害是梨孢灰斑病、銹病和彎孢霉葉斑病，而在豆科牧草上由炭疽菌、尾孢、假尾孢引起的葉斑病較為常見。

本次調查是在7～9月份開展的，這個季節的海南天氣炎熱、雨水多，有利于高溫高濕性病害的發生和流行，但不利于偏低溫高濕或適溫干濕交替條件下易流行病害的發生，如霜霉病、灰霉病、白粉病等，所以在此次調查中未發現這些病害。其次，本次調查主要檢查了葉、莖、穗部，但文獻表明根腐病[Drechslera sorokininana（Sacc.）Subram.et Jain，Curr.，Fusarium sp.][4，9]、根結線蟲病（Meloidogyne javanica，M. incognita，M. acronea，M. arenaria）[2，9]對熱帶牧草根部的為害也很嚴重，值得注意。

參考文獻

[1] 陳燕羽. 熱帶海島旅游草業與海南經濟發展[J]. 中國農業信息， 2013（15）： 268-270.

[2] 易小平， 鄧澤明， 文衍堂. 白花灰葉根結線蟲病癥狀及病原鑒定[J]. 熱帶農業科學， 2002， （6）： 20-23.

[3] 易克賢. 柱花草炭疽病及其抗病育種進展[J]. 中國草地， 2001， 23（4）： 59-65.

[4] 張 陶， 張中義， 劉云龍， 等. 云南省國外引種牧草、草坪病害研究Ⅱ、 禾本科牧草、 草坪真菌病害[J]. 云南農業大學學報， 1998， 13（1）： 78-83.

[5] 劉曉妹， 蒲金基， 零 羽. 海南熱帶牧草真菌性病害的調查（Ⅰ）[J]. 熱帶作物學報， 2006， 27（3）： 81-84.

[6] 張 利， 康曉慧， 周 俗， 等. 四川地區禾本科牧草真菌病害調查及綜合防治研究[J]. 安徽農業科學， 2011， 39（29）： 17 899-17 901.

[7] 蔡 明， 張美艷， 牟 蘭， 等. 云南主要牧草常見病害種類及防治對策[J]. 家畜生態學報， 2014， 35（2）： 83-87.

[8] 鄭 麗， 易小平， 文衍堂， 等.海南省熱帶牧草病害調查及病原菌初步鑒定[J]. 熱帶作物學報， 2014， 35（5）： 967-973.

[9] Jillian M， Lenne， Peter Trutmann. Disease of tropical pasture plants[M]. UK， CABIand CIAT， 1994.

[10] 薛福祥. 草地保護學（三）牧草病理學（第三版）[M]. 北京： 中國農業出版社， 2009.

[11] 南志標， 李春杰. 中國牧草真菌病害名錄[J]. 草業科學， 1994（增刊）： 1-160.

[12] Jones P， Devonshire B J， Holman T J， et al. Napier grass stunt： a new disease associated with a 16SrXI group phytoplasma in Kenya[J]. Plant Pathology， 2004， 53（4）： 519.

[13] Obura E， Masiga D， Midega C A O， et al. First report of a phytoplasma associated with Bermuda grass white leaf disease in Kenya[J]. New Disease Reports， 2010， 21： 23.

[14] Thomas J E， Steele V. First report of Panicum mosaic virus in buffalo grass（Stenotaphrum secundatum）from Australia[J]. Australasian Plant Disease Notes， 2011， 6（1）： 16-17.

[15] 郭蘭英， 劉錫琎. 中國真菌志（第二十四卷）[M]. 北京： 科學出版社， 2005.

[16] 張中義， 冷懷瓊， 張志銘， 等.植物病原真菌學[M]. 成都： 四川科學技術出版社， 1988.

[17] 劉榮堂主編.草坪有害生物及其防治[M]. 北京： 中國農業出版社， 2004.

[18] 方中達. 植病研究方法[M]. 北京： 中國農業出版社， 1997.

[19] 李增平， 鄭服叢.熱區植物常見病害診斷圖譜[M]. 北京： 中國農業出版社， 2010.

責任編輯：葉慶亮