自動凱氏定氮法測定魷魚肝粉中蛋白質含量

【摘 要】 食品中的蛋白質在催化加熱條件下被分解，產生的氨與硫酸結合生成硫酸銨。堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后以硫酸或鹽酸標準滴定溶液滴定，根據酸的消耗量乘以換算系數，即為蛋白質的含量。本文使用自動定氮儀確立魷魚肝粉中蛋白質含量的測定方法。該方法與傳統凱氏定氮法相比，更加安全、簡便、快速。分析結果對飼料配比具有指導性意義。

【關鍵詞】 自動凱氏定氮法 魷魚肝粉 蛋白質

【DOI編碼】 10.3969/j.issn.1674-4977.2014.14.006

魷魚肝粉是新一代高效魚、蝦、蟹飼料誘食劑。它是根據國外水產養殖專家多年辛勤研究而得出的水產動物嗜好的氣味魷魚腥香味，并結合我國水產養殖各個階段的生理、生長特征研制而成的。魷魚肝粉以天然海洋魷魚內臟為原料，具有濃烈的魷魚內臟腥香味，促使魚、蝦食欲增加，提高魚、蝦、蟹的采食量，促進生長等特殊功效，是一種理想的水產飼料誘食劑。自動定氮儀主要功能包括可調節的蒸汽功率、智能冷卻水系統和溜出液溫度控制、試劑添加、試管排空和專利的SAfE（蒸汽平衡添加）技術，此項技術提高了混合程序的安全性，減少了蒸餾過程中酸和堿之間的劇烈反應，從而不需要進行人工的預稀釋?？焖俚脑嚬芘趴障到y避免手工處理蒸餾后的熱試劑。用戶被一個獨特的自動安全門完全的保護起來，在進行實驗時需要手動放入一個試管，然后安全門自動關閉后系統才能運行，安全門和滴液盤可以很容易地移出進行清潔。冷卻水流量可自動進行控制，如果溜出液溫度太高，溫度傳感器會自動停止系統，多個傳感器監控試管在位、安全門、試劑液位、蒸汽發生器水位和是否過壓，為實驗員提供最安全的操作條件。同時，顏色滴定系統有無與倫比的精度，其出色的性能基于對化學反應終點顏色的精確探測。每次開機的自檢自校功能使精度能夠得到永久的保證。1 實驗部分1.1 儀器與試劑（試劑均為分析純）FOSS 8400型自動凱氏定氮儀：福斯華（北京）科貿有限公司（福斯集團全資子公司）；硝化器：福斯華（北京）科貿有限公司（福斯集團全資子公司）；電子天平（0.1mg）：梅特勒-托利多（上海）有限公司；催化劑：5水硫酸銅與硫酸鉀按質量比1：10磨碎，混勻；濃硫酸（密度1.84g/L）；鹽酸標準溶液（0.1017mol/L）：應按照GB/T601-2002中規定標定；氫氧化鈉溶液（40%）：稱取1000g氫氧化鈉，溶于2500ml水中，備用；吸收液、混合指示劑混合液：分別稱取0.14g甲基紅與0.2g溴甲酚綠，溶于200ml95%乙醇，與200g硼酸一同溶于20L水中，備用；水：應符合GB/T6682-1992中三級水的規格。1.2 分析方法（1）連接好硝化器電源，開始預熱。（2）制備有代表性的樣品，稱取0.2g樣品（精確到0.1mg）放入硝化試管，添加催化劑2g及濃硫酸10ml（同時做空白）。（3）將滌氣裝置接在支架中的硝化管上，接好水抽氣泵，將其開關全部打開。（4）將裝上滌氣裝置的硝化管連同支架放入預熱好的硝化器（設定溫度為420℃），5min后調小抽氣泵，使酸煙恰好吸入滌氣罩頭。（5）繼續硝化直至全部變為透明的藍綠色澄清液體，硝化時間大約2h。（6）硝化完畢后關閉硝化器電源，取出支架和滌氣裝置，冷卻至室溫。（7）連接好8400自動凱氏定氮儀主機電源，檢查水源、各桶中溶液是否達到水平及各個管路是否就位。打開電源開關，待自檢自校完畢，設定好儀器及樣品的各項參數（見表1），先將空白管放入滴液盤進行分析，空白分析結束后依次分析樣品，分析結果（見表2）自動顯示在屏幕上，也可輸出打印結果。（8）取一潔凈空管，選擇清洗功能，清洗管道5分鐘。2 結果與討論2.1 分析結果采用8400自動凱氏定氮法對5家水產飼料企業提供的5批次魷魚肝粉進行分析，每批次平行分析3次，結果見表2。2.2 討論利用表1中儀器參數，對5批次魷魚肝粉中蛋白質含量進行分析，得出表2中的數據，可以看出，魷魚肝粉中蛋白質含量高，是水產動物的優質蛋白源，且該分析方法分析得出的數據平行性好，不僅可以真實地反映出各批次魷魚肝粉中蛋白質的含量，而且可以為水產飼料生產企業投料配比提供強有力的指導性依據。