河南溫縣3種不同山藥蛋白質(zhì)含量及氨基酸成分分析

摘要[目的]通過對(duì)河南溫縣3種不同種類山藥蛋白質(zhì)總量的測(cè)定及氨基酸成分的測(cè)定來比較這3種山藥的營養(yǎng)價(jià)值。[方法]以3種不同種類的山藥為樣品，用凱氏定氮法測(cè)定3種山藥的蛋白質(zhì)含量，然后用高效液相色譜法對(duì)3種山藥的氨基酸成分進(jìn)行分析。[結(jié)果]溫縣番田山藥蛋白質(zhì)含量3.95%，普通山藥（購自溫縣農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)）蛋白質(zhì)含量2.82%，溫縣歸真堂山藥蛋白質(zhì)含量3.97%；溫縣番田山藥必需氨基酸含量0.389 9%，普通山藥必需氨基酸含量0.288 0%，歸真堂山藥必需氨基酸含量0.625 7%。[結(jié)論]歸真堂山藥營養(yǎng)價(jià)值高于番田山藥和普通山藥。

關(guān)鍵詞 山藥；蛋白質(zhì)含量；氨基酸；營養(yǎng)價(jià)值

中圖分類號(hào)S632.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）30-10673-03

作者簡(jiǎn)介王蕾（1963- ），女，河南鄭州人，副教授，從事生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。

山藥（Dioscorea opposita Thunb.）為薯蕷科（Dioscoreaceae）薯蕷屬（Dioscorea）植物的塊莖，主要分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)，全世界有600種以上，而我國有90多種[1]。山藥又稱薯藥、玉芋等，據(jù)不完全統(tǒng)計(jì)，山藥的各種名稱有350種左右[2]。山藥是我國傳統(tǒng)的藥食同源食物之一，我國自夏、商起就開始種植山藥，明清以來逐漸應(yīng)用為藥材。山藥在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，其性平、味甘，中醫(yī)藥學(xué)上用作益氣、健脾胃、補(bǔ)肺腎藥，主治脾胃虛弱、泄瀉、消渴、遺精等癥[3]。李時(shí)珍在《本草綱目》中將其功用概括為“益腎氣，健脾胃，止泄痢，化痰涎，潤皮毛”5個(gè)主要方面。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，山藥能治療虛弱、消化不良、慢性腸炎、糖尿病、遺精、盜汗等癥[4]。山藥產(chǎn)量很高，營養(yǎng)成分全面，含有豐富的碳水化合物和蛋白質(zhì)，其干品和谷物相比也毫不遜色，山藥塊莖主要含淀粉、蛋白質(zhì)、游離氨基酸等營養(yǎng)成分，以及黏性多糖（包括黏液質(zhì)及糖蛋白）、尿囊素、淀粉酶、膽堿、膽甾醇、麥角甾醇、多酚氧化酶等多種活性成分，這些化學(xué)成分是山藥營養(yǎng)價(jià)值和活性作用的物質(zhì)基礎(chǔ)[5]。

河南溫縣為我國山藥的道地產(chǎn)區(qū)，但溫縣種植山藥的地方較多，不同地方山藥品質(zhì)也有很大差異。筆者通過測(cè)定河南溫縣3種不同山藥的蛋白質(zhì)含量和氨基酸成分研究山藥的食用價(jià)值，為河南不同產(chǎn)地山藥的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品。番田山藥購自河南溫縣番田，普通山藥購自溫縣農(nóng)貿(mào)市場(chǎng)，歸真堂山藥購自溫縣歸真堂。

1.1.2主要儀器。石墨消解儀，凱氏自動(dòng)定氮儀，電子天平，2695型四元梯度高效液相色譜儀（美國沃特斯公司），檢測(cè)器（2996型二極管陣列檢測(cè)器）。

1.1.3主要試劑。硫酸銅（分析純）、硫酸鉀（分析純）、氫氧化鈉（化學(xué)純）、硼酸（分析純）、37%鹽酸、95%乙醇、0.1%溴甲酚綠溶液、0.1%甲基紅溶液，Waters公司試劑包：包括天門冬氨酸（Asp）、絲氨酸（Ser）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、組氨酸（His）、精氨酸（Arg）、蘇氨酸（Thr）、丙氨酸（Ala）、脯氨酸（Pro）、胱氨酸（Cys）、酪氨酸（Tyr）、纈氨酸（Va1）、蛋氨酸（Met）、賴氨酸（Lys）、亮氨酸（Leu）、異亮氨酸（Ile）、苯丙氨酸（Phe）17種濃度為2.5 mmol/L氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，6氨基喹啉N羥基琥珀酰亞胺基氨基甲酸酯（AQC）衍生劑，硼酸稀釋液，醋酸鈉緩沖液濃A液；乙腈（色譜純），鹽酸（GR），超純水（18MQ），其余試劑均為市售分析純。

1.2方法

1.2.1山藥蛋白質(zhì)含量測(cè)定。采用凱氏定氮法測(cè)定總氮含量，再乘以6.25。

1.2.2山藥氨基酸成分的測(cè)定。取0.50 g樣品到水解管，加10 ml 6 mol/L的鹽酸到水解管中后，使用酒精噴燈封口，110 ℃水解24 h，冷卻后用6 mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至90左右后移至50 ml容量瓶中。用超純水洗滌3次，定容，過濾后取濾液進(jìn)行柱前衍生后使用反相高效液相色譜法分析氨基酸含量。

柱前衍生：精確量取上述水解液0.4 ml，置于離心管中，加入稀釋后的衍生劑A液0.2 ml，衍生劑B液0.2 ml后搖勻，在50 ℃水浴鍋中加熱45 min取出，待溫度降至室溫后加入正己烷0.4 ml搖勻，并用孔徑為0.45 μm有機(jī)膜過濾，放置30 min后，取澄清的下層液進(jìn)行高效液相色譜分析。

色譜條件：色譜柱為Ultimate Amino acid，5 μm，4.6×250 mm；流動(dòng)相A為0.1 mol/L醋酸鈉溶液∶乙腈=93∶7（體積比），流動(dòng)相B為水∶乙腈=20∶80（體積比），其中醋酸鈉溶液用冰醋酸調(diào)節(jié)pH 6.5，流動(dòng)相梯度洗脫程序見表1；柱溫37 ℃；流速1 ml/min；檢測(cè)波長254 nm；進(jìn)樣量5 μl，記錄山藥的氨基酸色譜圖，同時(shí)用外標(biāo)法計(jì)算3種山藥的氨基酸含量。

2結(jié)果與分析

2.1蛋白質(zhì)含量的測(cè)定由表2可知，溫縣歸真堂山藥的蛋白質(zhì)含量高于番田山藥和普通山藥，歸真堂山藥的蛋白質(zhì)含量比番田山藥高0.5%，比普通山藥高40.8%；番田山藥蛋白質(zhì)含量比普通山藥高40.7%。

2.2氨基酸成分的測(cè)定如圖1、2、3、4及表3所示，3種山藥氨基酸組成較為全面，含有17種氨基酸，且除色氨酸外，3種山藥均含有人體必需的7種氨基酸，番田山藥和歸真堂山藥精氨酸含量最高，普通山藥的絲氨酸含量最高，歸真堂山藥的必需氨基酸含量高于番田山藥和普通山藥。

參考文獻(xiàn)

[1] 宋永剛，胡曉波，王震宙.山藥的活性成分研究概況[J].江西食品工業(yè)，2007（4）：45-48.

[2] 蔡金輝，嚴(yán)漸子，黃曉輝，等.山藥品種資源的分類研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1999，21（1）：53-57.

[3] 姜芳婷，李明靜，史會(huì)齊，等.山藥的研究[J].河南大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版，2004，23（2）：4-6.

[4] 國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典2010版（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：27.

[5] 倪少云，宋學(xué)華.山藥的營養(yǎng)成分分析[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究，2002，10（2）：26-27.

[6] 張重義.不同山藥品種的品質(zhì)評(píng)價(jià)與分析[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，31（S1）：42.