河南溫縣3種不同山藥蛋白質(zhì)含量及氨基酸成分分析

摘要[目的]通過對河南溫縣3種不同種類山藥蛋白質(zhì)總量的測定及氨基酸成分的測定來比較這3種山藥的營養(yǎng)價值。[方法]以3種不同種類的山藥為樣品，用凱氏定氮法測定3種山藥的蛋白質(zhì)含量，然后用高效液相色譜法對3種山藥的氨基酸成分進行分析。[結(jié)果]溫縣番田山藥蛋白質(zhì)含量3.95%，普通山藥（購自溫縣農(nóng)貿(mào)市場）蛋白質(zhì)含量2.82%，溫縣歸真堂山藥蛋白質(zhì)含量3.97%；溫縣番田山藥必需氨基酸含量0.389 9%，普通山藥必需氨基酸含量0.288 0%，歸真堂山藥必需氨基酸含量0.625 7%。[結(jié)論]歸真堂山藥營養(yǎng)價值高于番田山藥和普通山藥。

關(guān)鍵詞 山藥；蛋白質(zhì)含量；氨基酸；營養(yǎng)價值

中圖分類號S632.1文獻標(biāo)識碼A文章編號0517-6611（2014）30-10673-03

作者簡介王蕾（1963- ），女，河南鄭州人，副教授，從事生物化學(xué)與分子生物學(xué)研究。

山藥（Dioscorea opposita Thunb.）為薯蕷科（Dioscoreaceae）薯蕷屬（Dioscorea）植物的塊莖，主要分布于熱帶和亞熱帶地區(qū)，全世界有600種以上，而我國有90多種[1]。山藥又稱薯藥、玉芋等，據(jù)不完全統(tǒng)計，山藥的各種名稱有350種左右[2]。山藥是我國傳統(tǒng)的藥食同源食物之一，我國自夏、商起就開始種植山藥，明清以來逐漸應(yīng)用為藥材。山藥在《神農(nóng)本草經(jīng)》中被列為上品，其性平、味甘，中醫(yī)藥學(xué)上用作益氣、健脾胃、補肺腎藥，主治脾胃虛弱、泄瀉、消渴、遺精等癥[3]。李時珍在《本草綱目》中將其功用概括為“益腎氣，健脾胃，止泄痢，化痰涎，潤皮毛”5個主要方面。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明，山藥能治療虛弱、消化不良、慢性腸炎、糖尿病、遺精、盜汗等癥[4]。山藥產(chǎn)量很高，營養(yǎng)成分全面，含有豐富的碳水化合物和蛋白質(zhì)，其干品和谷物相比也毫不遜色，山藥塊莖主要含淀粉、蛋白質(zhì)、游離氨基酸等營養(yǎng)成分，以及黏性多糖（包括黏液質(zhì)及糖蛋白）、尿囊素、淀粉酶、膽堿、膽甾醇、麥角甾醇、多酚氧化酶等多種活性成分，這些化學(xué)成分是山藥營養(yǎng)價值和活性作用的物質(zhì)基礎(chǔ)[5]。

河南溫縣為我國山藥的道地產(chǎn)區(qū)，但溫縣種植山藥的地方較多，不同地方山藥品質(zhì)也有很大差異。筆者通過測定河南溫縣3種不同山藥的蛋白質(zhì)含量和氨基酸成分研究山藥的食用價值，為河南不同產(chǎn)地山藥的開發(fā)和利用提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1樣品。番田山藥購自河南溫縣番田，普通山藥購自溫縣農(nóng)貿(mào)市場，歸真堂山藥購自溫縣歸真堂。

1.1.2主要儀器。石墨消解儀，凱氏自動定氮儀，電子天平，2695型四元梯度高效液相色譜儀（美國沃特斯公司），檢測器（2996型二極管陣列檢測器）。

1.1.3主要試劑。硫酸銅（分析純）、硫酸鉀（分析純）、氫氧化鈉（化學(xué)純）、硼酸（分析純）、37%鹽酸、95%乙醇、0.1%溴甲酚綠溶液、0.1%甲基紅溶液，Waters公司試劑包：包括天門冬氨酸（Asp）、絲氨酸（Ser）、谷氨酸（Glu）、甘氨酸（Gly）、組氨酸（His）、精氨酸（Arg）、蘇氨酸（Thr）、丙氨酸（Ala）、脯氨酸（Pro）、胱氨酸（Cys）、酪氨酸（Tyr）、纈氨酸（Va1）、蛋氨酸（Met）、賴氨酸（Lys）、亮氨酸（Leu）、異亮氨酸（Ile）、苯丙氨酸（Phe）17種濃度為2.5 mmol/L氨基酸混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，6氨基喹啉N羥基琥珀酰亞胺基氨基甲酸酯（AQC）衍生劑，硼酸稀釋液，醋酸鈉緩沖液濃A液；乙腈（色譜純），鹽酸（GR），超純水（18MQ），其余試劑均為市售分析純。

1.2方法

1.2.1山藥蛋白質(zhì)含量測定。采用凱氏定氮法測定總氮含量，再乘以6.25。

1.2.2山藥氨基酸成分的測定。取0.50 g樣品到水解管，加10 ml 6 mol/L的鹽酸到水解管中后，使用酒精噴燈封口，110 ℃水解24 h，冷卻后用6 mol/L的NaOH溶液調(diào)pH至90左右后移至50 ml容量瓶中。用超純水洗滌3次，定容，過濾后取濾液進行柱前衍生后使用反相高效液相色譜法分析氨基酸含量。

柱前衍生：精確量取上述水解液0.4 ml，置于離心管中，加入稀釋后的衍生劑A液0.2 ml，衍生劑B液0.2 ml后搖勻，在50 ℃水浴鍋中加熱45 min取出，待溫度降至室溫后加入正己烷0.4 ml搖勻，并用孔徑為0.45 μm有機膜過濾，放置30 min后，取澄清的下層液進行高效液相色譜分析。

色譜條件：色譜柱為Ultimate Amino acid，5 μm，4.6×250 mm；流動相A為0.1 mol/L醋酸鈉溶液∶乙腈=93∶7（體積比），流動相B為水∶乙腈=20∶80（體積比），其中醋酸鈉溶液用冰醋酸調(diào)節(jié)pH 6.5，流動相梯度洗脫程序見表1；柱溫37 ℃；流速1 ml/min；檢測波長254 nm；進樣量5 μl，記錄山藥的氨基酸色譜圖，同時用外標(biāo)法計算3種山藥的氨基酸含量。

2結(jié)果與分析

2.1蛋白質(zhì)含量的測定由表2可知，溫縣歸真堂山藥的蛋白質(zhì)含量高于番田山藥和普通山藥，歸真堂山藥的蛋白質(zhì)含量比番田山藥高0.5%，比普通山藥高40.8%；番田山藥蛋白質(zhì)含量比普通山藥高40.7%。

2.2氨基酸成分的測定如圖1、2、3、4及表3所示，3種山藥氨基酸組成較為全面，含有17種氨基酸，且除色氨酸外，3種山藥均含有人體必需的7種氨基酸，番田山藥和歸真堂山藥精氨酸含量最高，普通山藥的絲氨酸含量最高，歸真堂山藥的必需氨基酸含量高于番田山藥和普通山藥。

參考文獻

[1] 宋永剛，胡曉波，王震宙.山藥的活性成分研究概況[J].江西食品工業(yè)，2007（4）：45-48.

[2] 蔡金輝，嚴(yán)漸子，黃曉輝，等.山藥品種資源的分類研究[J].江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1999，21（1）：53-57.

[3] 姜芳婷，李明靜，史會齊，等.山藥的研究[J].河南大學(xué)學(xué)報：醫(yī)學(xué)版，2004，23（2）：4-6.

[4] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010版（一部）[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：27.

[5] 倪少云，宋學(xué)華.山藥的營養(yǎng)成分分析[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究，2002，10（2）：26-27.

[6] 張重義.不同山藥品種的品質(zhì)評價與分析[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，1997，31（S1）：42.