摘要:目的 探討肉眼血尿標本中紅細胞對白細胞酯酶檢測結果準確性的影響及消除方法。方法 收集肉眼血尿標本,用尿干化學儀分別對離心前的尿標本和離心后的上清液進行尿白細胞酯酶檢測,并進行傳統的手工沉渣鏡檢。結果 肉眼血尿標本中白細胞酯酶假陽性率為93.75%,離心后取上清液做白細胞酯酶結果與顯微鏡沉渣鏡檢結果符合率為86.1%。結論 肉眼血尿中紅細胞能造成起白細胞酯酶假陽性,離心取上清液后再做干化學能消除這種干擾作用。臨床工作中白細胞酯酶陽性的肉眼血尿標本,必須結合顯微鏡檢查尿液白細胞,才能為臨床提供可靠的分析結果。
關鍵詞:肉眼血尿;白細胞酯酶;紅細胞;假陽性 尿常規是臨床檢驗三大常規檢查之一,為臨床疾病的診斷及治療提供了準確的依據。其中,尿紅細胞和白細胞的檢測,更是反映泌尿系統疾病的良好指標。然而,有大量文獻報道,尿白細胞酯酶檢測受多種因素的影響,如,維生素C或含大劑量先鋒霉素Ⅳ、慶大霉素、尿蛋白大于5g/L,均可致其結果呈假陰性[1-2]。目前筆者在臨床檢驗中發現在肉眼血尿標本中,白細胞酯酶檢測的假陽性率極高,因此,探討紅細胞對白細胞酯酶檢測結果準確性的影響及消除方法。
1 資料與方法
1.1一般資料 尿干化學分析儀DIUH-500,日本Olympus光學顯微鏡,萬佳低速離心機,玻片,DIUH原裝試紙條。
1.2試劑及配制 D-Hank,s液:用電子天平稱取Nacl 8g,Kcl0.4g,Na2HPO4.12H2O 0.152g,KH2PO4 0.06g,NaHCO3 0.35g,依次加入至800mldH2O中,溶解后調PH至7.2,定容至1000ml,高壓滅菌。
1.3方法
1.3.1標本的收集 收集本院2013年4月~12月臨床申請做尿液分析的門診及住院患者中新鮮的肉眼血尿標本100份,以及各項檢測結果均正常的尿液標本(其中上皮細胞在0~1/FP范圍內,且近期沒有服用任何藥物)100份(所有標本均在2h內檢測完畢),其中女性標本為非月經期標本。
1.3.2外周血血紅細胞懸液的制備 取ED-TA抗凝血,加等量生理鹽水,混勻,2000r/min離心5min,去上清;用D-Hank,s液將紅細胞洗滌3次,前2次2000r/min,5min,末次2000r/min,10min,去上清;加適量生理鹽水,將分離出的紅細胞配成20%的紅細胞懸液。
1.3.3用一次性塑料管收集上述人員新鮮肉眼血尿10ml,混勻,將試紙條浸入尿液2s后取出,用吸水紙取出試紙條邊上多余的尿液,置于尿干化學儀上檢測,然后將尿液置于離心機,1500rpm/min,離心5min,將上清液轉移至另一干凈的塑料管,做干化學檢測,留0.2ml沉渣,用微量吸管吸取混勻沉渣0.02ml,滴在載玻片上,蓋玻片覆蓋,觀察10個高倍鏡視野(HP),然后計算平均每個高倍視野里白細胞的數量。
1.3.4收集檢測結果正常的尿標本,每份標本中(10ml)加入0.2ml20%紅細胞懸液,混勻,然后進行尿干化學檢測。所有的檢測均在2h內完成。
1.3.5統計學處理 結果采用spss13.0軟件,結果用配對t檢驗分析,P<0.05表示差異有統計學差異。
2 結果
2.1肉眼血尿標本中白細胞酯酶假陽性率為93.75%(如表1),離心后取上清液做白細胞酯酶結果與顯微鏡沉渣鏡檢結果符合率為86.1%,離心前后白細胞酯酶結果做配對t檢驗,得出P<0.05,說明結果有統計學差異。
2.2為了驗證上述實驗結果,我們收集了100份正常尿標本,并往每份標本中(10ml)加入0.2ml紅細胞懸液,其中尿白細胞酯酶檢測結果為陽性的共有94例,沉渣鏡檢白細胞在正常范圍內,即白細胞酯酶假陽性率為94%,采用配對t檢驗分析,加入紅細胞懸液前后尿液白細胞酯酶結果有顯著差異(P<0.05)。
3 討論
尿白細胞檢測是臨床尿液常規中重要的檢驗項目,為泌尿系統疾病尤其是尿路感染的診斷和治療提供了重要的依據[3]。
本論文我們選取新鮮尿液標本就是為了排除因存放時間過久所造成的假陽性結果。我們首次提出肉眼血尿標本中紅細胞對白細胞酯酶的檢測具有重大影響,尿標本離心后取上清液能降低其假陽性率。為了驗證這一結果,我們收集了上皮細胞等有形成份都是陰性的尿標本進行實驗。然而至于紅細胞是如何導致尿白細胞酯酶假陽性這一問題,可能是因為紅細胞表面含有微量的和粒細胞酯酶。
綜上所述,臨床檢驗工作中對于肉眼血尿白細胞酯酶陽性的標本必須通過顯微鏡鏡檢加以確認,才能保證檢驗結果的準確性,將標本離心后取上清做干化學測定能減少這類標本白細胞的假陽性率。
參考文獻:
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[2]Cochat P,Dubourg L,Nogueira PK,et al.Urinalysis using dipsticks[J].Arch Pediatr,2002,9:876-877.
[3]王春燕,張淼發.sysmexVF100尿沉渣分析儀對尿路感染療效的監測[J].上海醫學檢驗雜志,2000,15(2):80.
編輯/蘇小梅