支原體感染實驗室藥敏結果分析

摘要：目的 對泌尿生殖道支原體感染的藥敏結果加以分析，監測其耐藥性的變遷。方法 采用支原體培養、藥敏一體化試劑盒，對非淋病性尿道（宮頸）炎（NGU）患者進行支原體分離、培養、鑒定及藥物敏感試驗。現對500例非淋病性尿道（宮頸）炎（NGU）進行支原體分離、培養、鑒定及藥敏試驗。結果 支原體陽性192例，陽性率38%，其中解脲支原體（UU）139例，占總陽性率的72.4%；人型支原體（Mh）11例占總陽性率的5.7%；混合感染42例，占總陽性率的21.9%[1]。藥敏分析結果顯示：強力霉素，美滿霉素，交沙霉素大多趨于敏感，而環丙沙星，氧氟沙星，羅紅霉素，阿齊霉素，螺旋霉素，壯觀霉素，左旋氧氟，司帕沙星，克拉霉素的耐藥率較高。結論 強力霉素，美滿霉素，交沙霉素可作為治療泌尿生殖道支原體感染的首選抗生素。

關鍵詞：泌尿生殖道；支原體感染；鑒定；藥物敏感性試驗

1資料與方法

1.1一般資料 臨床資料來自本院2011年6月～2013年7月男科及婦科門診就診，擬診為NGU的患者500例，均有初診泌尿生殖道炎癥。男177例，女323例。年齡18～56歲。標本為男性尿道分泌物，前列腺液，精液和女性宮頸分泌物，全部檢測支原體和藥物敏感測定。

1.2標本采集男性 用無菌棉拭子取尿道內口2～2.5 cm處分泌物，前列腺按摩液，精液，中段尿需取尿10 mL，經2000 r/min離心10 min，取尿沉渣接鐘；女性：擴陰器擴陰后，用無菌棉拭子取宮頸管內口1～2 cm處的單層柱狀上皮細胞，取樣拭子不可碰陰道壁，也可用羊水培養，陽性培養液（普通支原體培養基獲得）用無菌吸嘴吸取30～50 ul。

1.3試劑 所用的支原體分離培養，鑒定及藥物敏感試驗配套試劑來自珠海銀科醫學工程有限公司提供的。

1.4實驗原理 標本的處理及培養，鑒定，藥物敏感分析均按照珠海市銀科醫學工程有限公司提供的試劑盒支原體鑒定，半定量計數及藥敏試驗于一體。試劑盒由液體藥敏培養基和藥敏測試板組成。培養基中含有蛋白胨、酵母提取物、血清、生長因子等營養物，并加有尿素、精氨酸被分解生成的堿性物質引起pH值上升，培養基由黃色變成紅色。培養基內加有抑菌劑，可抑制泌尿生殖道中細菌和真菌的生長。

1.5實驗方法

1.5.1空白對照取出測試板，用無菌吸嘴吸取100 UL培養液加入A1-空白對照孔。

1.5.2接種標本將標本棉簽伸入小瓶，靠近液面上方的瓶壁擠壓棉簽，使標本滲入，丟棄棉簽，或直接加入30～50 uL的陽性培養液。標本加入后充份搖勻使之混合。

1.5.3加樣至測試板吸取100 uL含菌培養液加入其余的微孔中。

1.5.4礦物油封蓋所有微孔滴加1～2滴試劑盒所附的礦物油。（注意：一定要使礦物油覆蓋液面，否則培養液蒸發，結果不準）

1.5.5培養將測試板加蓋后置培養箱中，35℃～37℃培養24～48 h，觀察結果。

1.6試驗結果判定

1.6.1培養基與分離孔均不變色者為陰性。

1.6.2培養基由黃變紅，且透明清亮，試劑條上的分離鑒定孔變紅，有UU和（或）MH生長，分離計數≥104 CCU/ML和≤104 CCU/ML兩種情況。

1.6.3藥敏結果的判定 藥敏孔變紅，說明有UU和（或）MH，若低濃度和高濃度孔均不變色，判定UU和（或）MH對該種抗生素敏感；若低濃度和高濃度孔均變色，判定UU和（或）MH對該種抗生素耐藥；若僅有低濃度孔變色，判定UU和（或）MH對該種抗生素中敏。

2結果

2.1支原體分離培養檢測結果500例支原體陽性192例中，UU感染139例占72.4%（139/192）；Mh感染11例占5.7%（11/192）；混合感染42例占21.9%（42/192）。

2.2 500例支原體對12種抗生素的體外藥物敏感試驗結果結果如下：環丙沙星的耐藥率高達82.8%，左旋氧氟77.1%螺旋霉素77.1%，壯觀霉素67.2%，氧氟沙星64.1%，羅紅霉素48.4%，阿齊霉素47.9%，司帕沙星44.8%，克拉霉素41.2%。。UU和Mh對環丙沙星，氧氟沙星，羅紅霉素，阿齊霉素，螺旋霉素，壯觀霉素，左旋氧氟，司帕沙星，克拉霉素的耐藥率較高；對強力霉素，美滿霉素，交沙霉素的敏感性較高，應作為目前治療泌尿生殖道支原體感染的首選抗生素[3]。

3討論

3.1支原體是介于病毒和細菌之間的最小原核微生物，是一類能獨立生活，最簡單的，最小的原核細胞微生物[2]。

3.2支原體侵犯人體的黏膜細胞，黏附在宿主細胞表面，破壞宿主細胞膜，損傷宿主細胞，造成炎癥性改變。

3.3 NGU是臨床上常見的性傳播疾病之一。NGU的病原體主要是支原體，引起生殖道感染的主要是解脲支原體（Uu）和人型支原體（Mh）。一般女性生殖道感染后可引起陰道炎，宮頸炎，子宮內膜炎，輸卵管炎及不育癥等。本文實驗數據顯示，在500例由支原體感染的非淋菌性泌尿生殖道炎的患者中，Uu感染最為多見，其次為Uu和Mh的混合感染，Mh感染最少。

3.4對于支原體的耐藥性實驗，本文使用珠海銀科醫學工程有限公司生產的試劑盒，它采用了敏感析點--高低藥敏濃度測定的新設計。與此同時，這種試劑盒將分離培養，鑒定及藥敏試驗同步進行，實現了快速化，標準化，準確化。

3.5支原體感染的治療，隨著抗生素的應用，耐藥菌株明顯增加。因此，本地區NGU患病率的上升、耐藥菌株的增多以及多種藥物重復耐藥現象與抗生素的使用有一定關系。耐藥菌株不斷增多的原因可能由以下兩方面造成：①由于以往一般條件的實驗室難以完成支原體的培養及藥敏試驗，臨床治療支原體感染多為經驗用藥，濫用廣譜抗生素雖然有一定的療效，但效果不夠理想，易造成耐藥菌株產生。②有些患者由于各種原因不到醫院就診，自購抗生素服用，雖然癥狀有所緩解，但治療不徹底，盲目反復服藥形成惡性循環，加速耐藥株的產生。因此，為了減少支原體耐藥菌株的發生，控制經驗用藥及抗生素的濫用是關鍵，①要搞好宣傳教育工作，避免患者盲目自行用藥；②臨床醫生應根據藥敏試驗結果選擇用藥，正確指導患者進行治療。

3.6對192株支原體的體外藥物敏感試驗結果分析可見UU和MH對環丙沙星，螺旋霉素，壯觀霉素，氧氟沙星，羅紅霉素，阿齊霉素，左旋氧氟，司帕沙星，克拉霉素的耐藥性與以前相比都明顯增加。因此支原體對這些藥物的耐藥性已不容忽視。試驗結果同樣表明，交沙霉素、美滿霉素和強力霉素是治療UU、MH和MH+UU的有效藥物。此外，強力霉素（或美滿霉素）與克林霉素聯合用藥療效肯定，這一點已經得到臨床證實，原因尚需進一步研究探討。

參考文獻：

[1]劉長德，張艷，余成源，等.支原體培養假陽性結果原加分析[J].中華檢驗醫學雜志，2006，29（3）：214.

[2]倪語星，尚紅.臨床微生物學與檢驗[M].4版.北京：人民衛生出版社，2008：303-312.

[3]涂斌，羅少鋒，劉素玲，等.泌尿生殖道支原體感染現狀及耐藥性分析[J].中華醫院感染學雜志，2006，（6）.編輯/張燕