超聲輔助提取何首烏中卵磷脂的新工藝研究

摘要：通過因素試驗，研究了超聲輔助提取何首烏中卵磷脂的工藝優化，確定最佳工藝條件為：乙醇濃度80%、提取時間40分鐘、提取溫度45℃，固液比1：4（g/mL），提取2次，在此條件下，何首烏卵磷脂收率為109.9（mg/100g）。

關鍵詞：何首烏；卵磷脂；超聲波；提取方法

*作者簡介：：江尚飛（1979- ），男，講師，主要研究方向：中藥制劑。.

【中圖分類號】R122.1【文獻標識碼】A【文章編號】1672-8602（2014）07-0292-01

何首烏為蓼科植物何首烏Polygonum multiflorum Thunb.的干燥塊根，具有養血滋陰、補肝腎、烏須發、強筋骨等功效。現代臨床用于促進造血功能，提高機體免疫功能，降血脂，抗動脈粥樣硬化，保肝，延緩衰老，影響內分泌功能，潤腸通便等作用，物質基礎主要為卵磷脂、蒽醌類、葡萄糖苷類等成分。其中所含的卵磷脂類是其重要的活性成分，具有抗衰老、降血脂、防治心血管疾病的作用；有研究發現卵磷脂能改進神經功能障礙及紊亂，恢復腦功能，增強記憶力等功能。為研究何首烏卵磷脂提取工藝，本文通過正交實驗考察乙醇濃度、提取溫度、提取時間、固液比、提取次數等因素對何首烏卵磷脂提取率的影響，優選出了何首烏卵磷脂的最佳提取工藝。

1儀器與試藥

1.1儀器

SPD-10A型紫外檢測器；HS3120型超聲波提取儀（天津市恒奧科技發展有限公司）；AUX220型雙量程分析天平（日本島津）。

1.2試藥

制何首烏購于重慶市慧遠中藥飲片有限公司；卵磷脂（貴州迪達生物有限公司，批號：8002-43-5）；無水乙醇分析純，其他試劑均為分析純。

2實驗方法

2.1超聲輔助何首烏卵粗粉提取根據卵磷脂不溶于丙酮的特點，在超聲環境下先用丙酮處理何首烏，除去其中的水分、膽固醇以及脂肪等成分，然后用乙醇進行提取。提取液用旋轉蒸發儀蒸發濃縮，用乙醚溶解提取，恒溫蒸發乙醚后，丙酮脫色，過濾，蒸發丙酮，加入無水乙醇溶解，將樣品液轉移到25mL容量瓶中，用無水乙醇定容至刻度，即得樣品溶液。

2.2標準曲線的繪制

2.2.1卵磷脂標準溶液配制：準確稱取卵磷脂標準品0.0325g，置于25mL容量瓶中，用無水乙醇定容，配成卵磷脂含量為1.3mg/mL的標準液，待用。

2.2.2準確吸取卵磷脂標準溶液0.30、0.60、0.90、1.20、1.50、1.80、2.10、2.40、2.70mL于9個5mL容量瓶中，用無水乙醇定容，得到濃度分別為0.078、0.156、0.234、0.312、0.390、0.468、0.546、0.624、0.702mg/mL的卵磷脂溶液。在21lnm下分別測定上述卵磷脂溶液的吸光值，以卵磷脂溶液濃度為橫坐標，以吸光值為縱坐標，繪制C-A曲線，見圖1。計算得回歸方程為：A = 2.509C+0.2251 （R=0.9973），表明卵磷脂在此范圍內呈良好的線性關系。

3結果與討論

3.1乙醇濃度對卵磷脂收率的影響

準確稱取5份樣品，在溫度為25℃，提取時間為20min，提取次數為2次，固液比（粗粉：溶劑）為l：2（g/mL）的條件下，考察乙醇濃度與收率的關系，結果見圖2。卵磷脂收率隨乙醇濃度的升高而增加，當乙醇濃度≥80%，其增加趨勢不明顯。考慮到乙醇回收，生產成本因素，乙醇濃度選擇為80%。

圖1 卵磷脂測定標準曲線 圖2 乙醇濃度對卵磷脂收率的影響

3.2溫度對卵磷脂收率的影響

準確稱取5份樣品，在乙醇濃度為80%，提取時間為20 min，提取次數為2次，固液比（粗粉：溶劑）為1：2（g/mL）的條件下，考察溫度對收率的影響，結果見圖3。卵磷脂的收率隨溫度的升高而增加，45℃收率達到最高，為1.025（mg/g），以后收率逐漸下降。這可能是由于溫度的升高，加速了卵磷脂的氧化分解，因此乙醇提取卵磷脂溫度以45℃為最佳。

3.3超聲時間對卵磷脂收率的影響

準確稱取5份樣品，在乙醇濃度為80%，溫度為45℃，固液比為l：2（g/mL），提取次數為2次的條件下，考察超聲時間對收率的影響，結果見圖4。隨著超聲時間的延長，收率呈正增長趨勢，時間越長收率越高，但趨勢越來越緩，因此，提取時間以40 min為宜。

圖3 溫度對卵磷脂收率的影響 圖4 提取時間對卵磷脂收率的影響

3.4固液比對卵磷脂收率的影響

準確稱取5份樣品，在乙醇濃度為80%，溫度為45℃，提取時間為40 min，提取次數為2次的條件下，考察固液比對收率的影響，結果見圖5。隨著固液比的增加，卵磷脂的收率明顯增加。這是因為增加提取溶劑用量能增加固液接觸面積，提高溶質擴散速率，從而提高提取率。當固液比提高到1：6以后，收率增加幅度降低，綜合收率和乙醇回收，固液比選用1：4（g/mL）較為合理。

3.5提取次數對卵磷脂收率的影響

準確稱取3份樣品，在乙醇濃度為80%，溫度為45℃，提取時間為40 min，固液比為l：4（g/mL）的條件下，考察提取次數對收率的影響，結果見圖6。提取次數越多，提取率越高，但隨著次數的增多，單次的提取效率越低，而且隨著提取次數增多雜質也相對增加，影響產品的純度，給后續步驟造成麻煩，因此提取2次效果較好。

圖5 固液比對卵磷脂收率的影響 圖6 提取次數對卵磷脂收率的影響

4.結論

以何首烏粗粉為實驗材料，以乙醇為溶劑，超聲輔助提取何首烏卵磷脂的最佳工藝條件為：乙醇濃度80%、提取時間40分鐘、提取溫度45℃，固液比1：4（g/mL），提取2次，在此條件下，何首烏卵磷脂收率為109.9（mg/100g）。

超聲波提取提取溫度低、提取率高、提取時間短，并且適應性廣、提取藥液雜質少、提取工藝成本低，目前廣泛用于中藥材和各種動、植物有效成分的提取，何首烏中卵磷脂應用超聲波提取還很少，但作為何首烏卵磷脂實現高效、節能、環保式提取的現代高新技術手段，超聲波輔助提取應用前景廣闊。

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