摘要:目的 通過分析肝素鈉抗凝血漿的生化檢驗結果,探討其應用于急診生化檢驗的可行性。方法 隨機選取我院自2013年11月~2014年4月的100例受檢者,隨機分配50例兩組,分別用常規非抗凝法采集的血清及肝素鈉抗凝血漿用管裝入同一受檢者的標本各3 mL,對照組加入常規非抗凝法采集的血清,實驗組加入肝素鈉抗凝血漿,采用全自動生化分析儀和電解質分析儀,測定生化檢驗項目,對檢驗結果進行統計、分析。結果 離心分析后的標本各項含量值,實驗組采用肝素鈉抗凝血漿分離結果較為快速、準確。結論 肝素鈉有抗凝能力強,不易溶血,可減少放置誤差,分離血漿速度快等優點[1],檢測結果準確可靠,多種生化檢驗項目均可用肝素鈉抗凝血漿替代血清作為標本,特別適合急診生化項目。但應在回報時注明標本的類型,方便臨床醫師參考。
關鍵詞:肝素鈉抗凝血漿;抗凝法采集血清;急診生化檢驗
肝素是血液化學成分測定中最好的抗凝劑。肝素是一種含硫酸基團的黏多糖,分子量為1.5萬,其抗凝機制是與抗凝酶Ⅱ一起,在低濃度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用,并能加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶,從而組織凝血酶形成[2];還有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。在傳統的血清標本分離方法中,分離速度緩慢嚴重延長了檢驗報告,尤其是急診檢驗報告的發出時間,對患者的治療造成了阻礙。制備的血清時,利用傳統方法中常常遺留下纖維蛋白凝絲等雜質,會對檢驗的器械造成損傷,在管道比較狹窄的器械中造成堵塞。同時,利用常規方法對血液進行分離,需要很高的操作技巧,一個小的失誤就會對血液成分造成破壞[3],從而延長分離時間,不能滿足臨床對檢驗結果的需要。因此我院通過對比分析使用肝素抗凝采集的血漿和常規非抗凝法采集的血清在進行生化檢測項目時各項參數的比對情況來探討肝素鈉抗凝血漿的生化檢驗結果,考慮其應用于急診生化檢驗的可行性。現我院將具體操作方法總結如下。
1資料與方法
1.1一般資料 隨機選取我院自2013年11月~2014年4月的100例受檢者,隨機分配50例兩組,年齡在20~68歲,受檢者身體各項指標無明顯差異,實驗組50例。將這兩組的受檢者進行采集的血清,分別用常規非抗凝法采集的血清及肝素鈉抗凝血漿用管裝入同一受檢者的標本各3 mL,對照組加入常規非抗凝法采集的血清,實驗組加入肝素鈉抗凝血漿,采用全自動生化分析儀和電解質分析模儀,測定生化檢驗項目,對檢驗結果進行統計、分析。
1.2方法 在進行實驗過程中,應該保障患者正常的生理狀態。空腹抽取患者靜脈血于真空肝素抗凝管和真空普通管各3.0 mL。50例將真空抗凝管的血液輕輕上下翻轉使得肝素鈉與血液混合均勻,便于肝素鈉發揮血液抗凝作用,進行離心,離心速度3000 r/min,時間15 min,將血漿分離,實驗備用。對照組常規非抗凝法采集的血清放置在室溫下進行血液自行凝固,然后在37℃恒溫箱中水浴15~30 min,應特別注意血液在恒溫箱中的保管,進行離心,離心速度和時間同真空抗凝管,將血清分離,實驗備用。除去檢驗過程中無法使用的實驗標本,在相同條件下進行測定[4]。而后,對比分析使用肝素抗凝采集的血漿和常規非抗凝法采集的血清在進行生化檢測項目時各項參數的比對情況。
2結果
經以上操作方法后發現,離心分析后的標本各項含量值,實驗組采用肝素鈉抗凝血漿分離結果較為快速、準確。兩組檢驗結果中的K+濃度差異具有統計學意義:①溶血現象的發生。在利用肝素鈉進行血漿的抗凝過程中,發生了極少量的溶血,而在普通血液標本的凝固過程中,血小板的破裂會釋放出一小部分的K+到血液中,同時在離心過程中,由于被離心機和離心速度的影響,使得檢驗對象中的部分紅細胞細胞膜遭到破壞,存在于細胞內的K+流入血液。②K+的滲出。根據細胞膜內外濃度差的滲透原理,隨著血清分離時間的延長,紅細胞內的部分K+會滲出到紅細胞外,升高血清中的K+濃度。③肝素與血液中的K+生成肝素鉀,影響離子電極對K+的測定,使血漿K+濃度低于血清K+。
3討論
目前靜脈血清作為臨床廣泛使用的生化檢驗標本,臨床診斷依據以及正常參考值的設定多來源于靜脈血清,但是由于血清分離時間較長,而血細胞在此段時間中凝血、離心、生理代謝等多可能引起血細胞擠壓、變形、破壞,造成部分檢驗項目的誤差,且隨著時間延長逐漸加劇[5]。在臨床的治療中,快速準確無疑是診斷工作的最基本的要求,是醫務人員挽救生命的關鍵因素。而快捷準確的生化檢驗工作在很大程度上影響著診斷工作的進展,所以說,實現生化檢驗工作的準確迅速具有重要的意義。肝素具有多方面的抗凝作用,是一種分子量較大的粘多糖,含有硫酸基團,自身帶多個負電荷。對于血液抗凝的作用機制主要是對血液中的凝血活酶及凝血酶的形成和活性進行抑制,阻礙血液中的血小板聚集,從而達到血液抗凝的作用。肝素抗凝無血液凝固的過程,提高了急診生化檢驗效率,為搶救患者贏得了寶貴時間。通過試驗表明,采血時加入肝素鈉抗凝劑后,對測定血液中總蛋白質含量結果有較明顯的影響,會使其測得結果高于用血清測得總蛋白質3%~5%[6]。但加入了抗凝劑后,其總蛋白含量低于血清總蛋白質含量,其原因是血液加入肝素鈉抗凝劑后,阻斷了凝血活酶的生成,阻止了血液凝固,導致纖維蛋白原不能水解轉化成纖維蛋白單體,有效阻止了纖維蛋白單體的形成,這些纖維蛋白原仍留在血漿中。而血清是血液經凝固后,纖維蛋白原水解轉化為纖維蛋白單體,并因凝固而消耗,離心后隨血細胞一并分離出去了。因此,血漿中的總蛋白質量是包含了纖維蛋白原在內的所有蛋白質[7],而血清中是不含有纖維蛋白原的總的蛋白質含量,理論上應該低于血漿中的總蛋白含量。因此在進行血液總蛋白質含量測定時,最好以血清為標本。我院自2013年11月~2014年4月的100例受檢者,隨機分配50例兩組,分別用常規非抗凝法采集的血清及肝素鈉抗凝血漿用管裝入同一受檢者的標本各3 mL,對照組加入常規非抗凝法采集的血清,實驗組加入肝素鈉抗凝血漿,采用全自動生化分析儀和電解質分析儀測定生化檢驗項目,對檢驗結果進行統計、分析。結果表明,離心分析后的標本各項含量值,實驗組采用肝素鈉抗凝血漿分離結果較為快速、準確。肝素鈉有抗凝能力強,不易溶血,可減少放置誤差[8],分離血漿速度快等優點,檢測結果準確可靠,多種生化檢驗項目均可用肝素鈉抗凝血漿替代血清作為標本,特別適合急診生化項目。
綜上所述,肝素鈉有抗凝能力強,不易溶血,可減少放置誤差,分離血漿速度快等優點,多種生化檢驗項目均可用肝素鈉抗凝血漿替代血清作為標本,特別適合急診生化項目,也值得今后的臨床推廣與運用。
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