幾種不同產地枸杞中甜菜堿含量的比較

摘要：根據《農業行業標準》中的相應方法提取枸杞中的甜菜堿，通過單因素試驗優化其主要工藝條件，如料液比、提取時間、絡合劑加入量、絡合時間等。結果表明，甜菜堿提取的最佳工藝條件為：料液比1 g ∶60 mL，提取時間 2 h，提取液與絡合劑的比為 1 ∶5，絡合時間2 h，在此條件下，3種不同地區枸杞中的甜菜堿含量由大到小排序為：甘肅枸杞（9.26%）>青海枸杞（8.73%）>寧夏中寧枸杞（8.71%）。

關鍵詞：枸杞；甜菜堿；單因素；提取工藝

中圖分類號： Q946.88；R284.2 文獻標志碼： A 文章編號：1002-1302（2014）07-0330-02

收稿日期：2013-09-24

基金項目：寧夏自然科學基金（編號：NZ12122）。

作者簡介：郝鳳霞（1978—），女，寧夏中寧人，碩士，講師，研究方向為天然產物有效成分提取與分離及藥物檢測。Tel：（0951）2062322；E-mail：hao_fx@nxu.edu.cn。枸杞子為茄科植物枸杞（Lycium chinense Mill.）或寧夏枸杞（Lyciumbarbarum L.）的干燥成熟果實，在國內外均有分布，其在國內的產區主要集中在西北地區，其中寧夏產的枸杞最為著名，是寧夏的“五寶”之一，此外甘肅、青海等地的枸杞品質也很高。現在醫學研究表明，枸杞具有抗氧化、抗衰老、免疫調節、降血糖、降血脂等作用[1-3]。甜菜堿是枸杞果、葉、柄中主要的生物堿之一，具有強烈的吸濕性能，此外還可以抗腫瘤、降血壓、抗消化性潰瘍及胃腸功能障礙，并且可以治療肝臟疾病[4]，2010版《中華人民共和國藥典》中以甜菜堿和枸杞多糖作為評價枸杞質量的2個重要指標[5]。本試驗首先以寧夏中寧枸杞為研究對象，對其中的甜菜堿進行提取，并采用不同方法進行測定，采用單因素試驗等多種方法優化其主要影響因素如料液比、提取時間、絡合劑用量、絡合時間等，初步建立從中寧枸杞中提取分離甜菜堿的工藝；再對甘肅和青海的枸杞進行測定，以比較不同地區枸杞中的甜菜堿含量，找出品種、產地對枸杞質量造成的差異性，以期為甜菜堿的進一步開發利用提供一定的參考。

1材料與方法

1.1試驗材料

中寧枸杞采自寧夏中寧縣舟塔鄉，青海枸杞、甘肅枸杞購自寧夏中寧枸杞交易市場。將枸杞置于電熱鼓風干燥箱中，60 ℃連續烘干20 h后粉碎，過40目篩，放于冰箱中保存。

濃鹽酸、飽和雷氏鹽溶液（15 g/L）、99%乙醚溶液、70%丙酮溶液、甜菜堿標準品（純度>99.99%）等試劑均為分析純；實驗室用水為蒸餾水。相應溶液的配制方法為：（1）99%乙醚溶液：吸取1 mL水，加入到99 mL無水乙醚中；（2）70%丙酮溶液：量取30 mL水，加入到70 mL丙酮中；（3）1.5 g/L甜菜堿標準溶液：稱取0.150 0 g甜菜堿標準品，置于100 mL燒瓶中，再加少量蒸餾水攪拌使之溶解，將溶液轉移至 100 mL 容量瓶中用蒸餾水定容；（4）15 g/L飽和雷氏鹽溶液：稱取1.500 0 g雷氏鹽，加90 mL蒸餾水攪拌，用濃鹽酸調節pH值至1.0，于室溫下不斷攪拌45 min后抽濾，定容至100 mL（現配現用）。

1.2試驗儀器

UV2450紫外-可見分光光度計（日本島津公司）；L/L-S 電子天平（梅特勒-托利多儀器有限公司）；DZF-6020電熱鼓風干燥箱（鞏義市英峪予華儀器廠）；7DL80-2B臺式離心機（上海安亭科技儀器廠）；SHB-Ⅱ循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）。

1.3試驗方法

稱取2.000 0 g甜菜堿烘干樣品，用80 mL蒸餾水溶解后于室溫放置3 h，不停地攪拌、混勻、抽濾、棄殘渣。用濃鹽酸調節pH值為1.0左右，抽濾后定容至100 mL；吸取3.00 mL移入10 mL離心管中，加蓋后在冰箱中存放15 min；加入 5 mL 雷氏鹽溶液，加蓋后再置于冰箱內存放1 h；取出在 1 000 r/min 條件下離心15 min，棄去上清液，加入99%的乙醚5 mL搖勻，1 000 r/min條件下離心15 min；棄去上清液，加入5.0 mL 70%的丙酮溶液，測定吸光度。

2結果與分析

2.1甜菜堿標準曲線的繪制

取6支試管，分別加入0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0 mL甜菜堿標準溶液，再分別加入2.5、2.4、2.3、2.2、2.1、2.0 mL蒸餾水，使最終總體積為3 mL，使其濃度分別為：0.25、0.30、035、0.40、0.45、0.50 mg/mL。在冰箱中存放15 min后分別滴加5 mL雷氏鹽溶液，再置于冰箱中3 h，取出后在 1 000 r/min 離心15 min，棄去上清液，加入99%的乙醚 5 mL，1 000 r/min離心15 min，自然揮發至干。以70%丙酮溶液作為空白，用紫外-可見分光光度計測定吸光度，確定甜菜堿標準溶液的最大吸收波長為523 nm，在此波長處測定各個濃度的吸光度值，并繪制甜菜堿的標準曲線。甜菜堿紫外色譜圖及甜菜堿標準曲線分別見圖1、圖2，甜菜堿標準曲線為y=0500 24x-0.095 02，r2=0.994 5。

2.2甜菜堿提取的單因素試驗

3結論

提取甜菜堿時采用《農業行業標準》中的《蒸餾水冷浸法》和《中華人民共和國藥典》中的《80%乙醇熱回流法》這2種方法作為提取甜菜堿的方法，比較這2種方法的甜菜堿得率發現，采用《農業行業標準》的方法，甜菜堿得率為3.35%，而采用《中華人民共和國藥典》的方法，甜菜堿得率3.13%，且蒸餾水冷浸法比80%乙醇熱回流法提取方法安全、簡單易操作，成本低，因此選用《農業行業標準》作為提取甜菜堿的方法。

不同地區枸杞中的甜菜堿含量不同，可能與枸杞生長地域、環境、濕度、日照等生態環境因素有關，如枸杞作為中成藥配伍使用時，應嚴格控制及規范枸杞產地、采摘期等，使中成藥中枸杞的甜菜堿和多糖等指標符合藥典規定。

參考文獻：

[1]謝忱，徐麗珍，李憲銘，等. 枸杞子化學成分的研究[J]. 中國中藥雜志，2001，26（5）：35-36.

[2]江蘇新醫學院. 中藥大辭典[M]. 上海：上海科學技術出版社，1979：1518.

[3]徐月紅，何嵐，徐蓮英，等. 枸杞的免疫藥理研究進展[J]. 中藥材，2000，23（5）：295-298.

[4]張宇金，高世勇，何立巍. 甜菜堿的生物活性研究[J]. 哈爾濱商業大學學報：自然科學版，2006，22（1）：13-16.

[5]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京：化學工業出版社，2009：232-233.